一、丹参酸乙对大鼠心脏成纤维细胞增殖和c-fos基因表达的影响（论文文献综述）
赖石凤[1]（2020）在《基于斑马鱼模型进行丹参酮ⅡA及衍生物的安全性评价和菲并咪唑衍生物的功效性探索》文中研究指明【目的】斑马鱼已广泛应用于药物毒物学、生态环境毒物学等研究领域。通过应用斑马鱼模型评估药物的安全性,可以发现药物对心脏、血管、神经等发育方面的影响,为药物合理使用及规避应用风险提供理论参考。丹参作为传统上品中药,应用历史悠久,成分复杂。丹参酮IIA是其主要的活性成分,具有良好的生物活性,但由于邻苯二醌结构等使得临床使用具有一定局限性,因此,本研究选取丹参酮IIA及对其结构进行改造优化活性良好的丹参酮IIA衍生物TA20应用斑马鱼模型同时进行心脏、血管、神经行为等安全性评价。涉及中草药和化学药品如抗肿瘤药的药物不良反应案例数量逐年增加,药物的毒副作用会对心脏、血管、神经和预后等方面产生不良影响。癌症严重威胁着我们的健康,临床使用的抗肿瘤化学治疗药物均有不同程度的毒副作用,有些严重的毒副反应是限制药物剂量或使用的直接原因。抗肿瘤药促进术后并发症的发生成为癌症切除术后的抗肿瘤药一个潜在毒副作用。抑制肿瘤细胞增殖,同时抑制术后炎症并发症的化合物已成为抗癌药物的候选药物之一。本研究同时对抗肿瘤药菲并咪唑衍生物进行了抗肿瘤活性和术后炎症并发症进行研究。【方法】（1）以斑马鱼胚胎的存活率、致畸率、孵化率、体长、伤口愈合能力等指标观察药物对斑马鱼形态发育的影响;（2）以斑马鱼胚胎的心脏面积、心率、静脉窦-动脉球（SV-BA）间距作为心脏发育评价指标,以肠下静脉（SIVs）生长情况作为血管发育评价指标,来观察药物对斑马鱼心血管发育的影响;（3）通过观察自发尾收缩次数、触碰后的逃避行为次数评价药物对斑马鱼神经行为发育的影响。（4）通过体外MTT和体内肝癌斑马鱼模型研究了新合成表征的菲并咪唑衍生物（L082和L142）的抗肿瘤活性;通过切尾诱导炎症反应研究菲并咪唑衍生物L082对伤口炎症反应的影响,并进一步通过检测ROS和NO来研究化合物炎症作用机制。【结果】（1）暴露于40μM浓度下Tan-ⅡA会使斑马鱼静脉窦与动脉球之间的间距（SV-BA）缩短、心脏面积缩小和心率降低,丹参酮IIA明显抑制胚胎生长,导致体长缩短、伤口修复愈合能力受损,并且增加胚胎形态的致畸性,但在最高浓度（40μM）下也不致死,不会导致孵化延迟;在心血管方面,会缩小心脏面积,减低心率,会缩短静脉窦与动脉球的距离和抑制肠下静脉血管的新生;在神经行为方面,在10μM浓度下会抑制自发尾收缩次数和触碰逃避反射行为次数;在机制探索中抑制炎症细胞聚集反应。（2）暴露在10μM、20μM丹参酮IIA咪唑衍生物TA20浓度下,斑马鱼胚胎肠下静脉血管的新生会受到抑制,但斑马鱼形态发育、心脏发育和神经行为发育以及组织修复能力没有影响。（3）新合成的菲并咪唑衍生物L082和L142可以明显抑制多种肿瘤细胞的生长,其中L082化合物抑制斑马鱼体内肝癌增殖,而且在80μM浓度间能抑制伤口炎症细胞聚集反应、促进伤口炎症细胞清除达到抗炎的作用,进一步研究发现L082能同时抑制ROS和NO的产生。【结论】（1）丹参酮IIA在40μM浓度下斑马鱼胚胎中具有明显的发育毒性、心血管毒性、神经行为毒性,因此开发丹参酮IIA产品时应引起重视。（2）丹参酮IIA咪唑衍生物TA20与丹参酮IIA相比较,毒性低,可以用作有效的低毒剂,使其活性的进一步探究更具有意义。（3）新合成表征的菲并咪唑衍生物L082具有良好的体内体外抗肿瘤活性,同时在80μM浓度下可抑制伤口炎症反应,从而可能减少术后并发症毒副作用发生的风险。
李爽[2]（2018）在《基于活血通络的中药及中药复方对人肾小球系膜细胞的影响》文中指出目的:1、基于活血通络的中药及中药复方芪蓟肾康加味对人肾小球系膜细胞作用机制的探讨。本研究采用血管紧张素Ⅱ作为刺激因子,诱导体外培养的人肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质增殖,运用血清药理学方法,选择不同时间点,通过观察芪蓟肾康加味煎剂药理学清对体外培养的人肾小球系膜细胞纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ型胶原（ColⅣ）及TGF-β/Smad信号转导通路中TGF-β、Smad2、Smad3、Smad7等靶点的影响,从而探讨芪蓟肾康加味煎剂治疗肾小球疾病的作用机制;2、基于活血通络法,选取芪蓟肾康加味之君药丹参的主要水溶性成分（丹参多酚酸盐）,具有活血之代表作用,干预由血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞,观察不同时间点细胞增殖情况,选择细胞活性稳定之时间点观察TGF-β/Smad信号转导通路中TGF-β、Smad2、Smad3、Smad7等靶点的影响,从而探讨丹参（丹参多酚酸盐）治疗肾小球疾病的作用机制;3、基于活血通络法,选取芪蓟肾康加味之使药海风藤,为通络之代表药,干预由血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞,观察不同时间点细胞增殖情况,选择细胞活性稳定之时间点观察TGF-β/Smad信号转导通路中TGF-β、Smad2、Smad3、Smad7等靶点的影响,从而探讨海风藤治疗肾小球疾病的作用机制;材料与方法:1.材料1.1实验动物SPF级SD大鼠,辽宁长生生物技术有限公司,许可证号:SCXK（辽）2015-0001,30只,体质量180-220 g,雌雄各半。1.2细胞株人肾小球系膜细胞株,广州吉妮欧生物科技有限公司,官网货号Catalog#4200。1.3中药材黄芪、小蓟、丹参、白花蛇舌草等九味中药饮片由辽宁中医药大学附属医院药剂科提供。1.4主要仪器及试剂FC酶标仪（Thermo公司）血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）,Wako公司,批号014-18211;小牛血清（FBS）,GIBICO公司,批号1108862;RPMI-1640培养液,HyClone公司,批号ABB212915;强的松片,国药集团容声制药有限公司,批号16032631;ELISA试剂盒:均由AMEKO公司购买,TGF-β96T ELISA试剂盒（AE98029Hu）、FN 96T ELISA试剂盒（AE90205Hu）、ColⅥ96T ELISA试剂盒（AE90348Hu）。兔抗Smad2多克隆抗体,Abclonal公司,批号分别为:A7699。兔抗Smad3多克隆抗体,Abclonal公司,批号分别为:A7536。鼠抗β-actin多克隆抗体,Proteintech公司,批号:60008-1-1g。注射用丹参多酚酸盐,上海绿谷制药有限公司,批号:16070123;海风藤颗粒剂,江阴制药有限公司,批号:1604053。2.方法2.1细胞培养:人肾小球系膜细胞,培养1-2天后更换含10%FBS的RPMI-1640培养液（即完全培养液）培养,将细胞接种于75 cm2培养瓶中。取对数生长期的细胞,待细胞覆盖培养瓶底80%,吸出原培养液,用PBS缓冲液润洗两次,加2-3 mL胰酶消化,放置于37℃0.5%CO2培养箱培养消化4-5 min,镜下观察细胞情况,待细胞边缘缩小、基本脱离瓶底时,加入完全培养液14 mL终止消化。用吸管反复吸取培养液轻轻吹打瓶壁细胞,确保瓶底全部被吹到。细胞脱离瓶底后形成细胞混悬液,收集于50 mL离心管中,1800 r/min离心10 min后,吸出上清液,加入完全培养液,制成密度为1.0×105/mL细胞混悬液,备用。2.2药理血清制备:SD大鼠30只,雌雄各半,体质量180220 g按体重随机分为5组,每组6只,分别为正常组,强的松组,芪蓟肾康加味煎剂高、中、低浓度组。大鼠1 mL/100g（体质量）/天灌胃,连续灌胃5天,末次给药后1h腹主动脉采血并分离血清,将同一组大鼠含药血清集中在一起,备用。2.2.1具体给药方法如下（实验一分组）:正常组给予生理盐水1mL/100 g（体质量）每日灌胃一次。芪蓟肾康加味煎剂高浓度组按生药量47.2 g/kg/d（大鼠与人等效剂量的4倍）灌胃,每日1次;芪蓟肾康加味中浓度组按生药量23.6 g/kg/d（大鼠等效剂量的2倍）灌胃,每日1次;芪蓟肾康加味低浓度组按生药量11.8g/kg/d（大鼠与人等效剂量）灌胃,每日1次。（芪蓟肾康加味煎剂由辽宁中医药大学附属医院煎药室制备）强的松组按照成人1.5 mg/kg/d,最多60 mg/d,折合大鼠药量6.25 mg/kg/d灌胃,每天一次。2.2.2芪蓟肾康加味煎剂制备:煎煮方法参照国家中医药管理局相关规定煎煮。煎药应当使用符合国家卫生标准的饮用水,待煎药物应当先行浸泡30min,煎煮开始用水量一般以浸过药面2-5cm为宜。使用煎药机煎药,药物煮沸后再煎煮20-30min,煮沸后再煎煮15-20min。煎药温度一般不超过100℃。2.3 MTT法:依据预实验结果采用15%浓度的含药血清及10-8mol/L浓度的AngⅡ进行实验,取1.0×105/mL细胞混悬液接种于96孔培养板中,分为正常组、模型组、强的松组、芪蓟肾康加味高、中、低浓度组,每组设3个复孔。培养一天后吸出原培养液,每孔加入150μL的含0.5%FBS的RPMI-1640培养液,同步饥饿细胞24h后,吸出上清,每孔加200μL含药血清,37℃5%CO2培养箱同步培养（24h、48h、72h）后,每孔加入20uL MTT（5 mg/mL）,继续培养4h,终止培养,吸弃孔内培养液,加入150μL DMSO/孔,置摇床低速震荡10min,使结晶物充分溶解,通过酶联免疫检测仪在590 nm波长处测定其光吸收值（OD值）。2.3.1实验分组（1）实验二分组:正常组（完全培养液）、模型组(完全培养液+10-8mol/L AngⅡ)、丹参多酚酸盐高剂量(完全培养液+10-8mol/L AngⅡ+200umol/L丹参多酚酸盐)、中剂量组(完全培养液+10-8mol/L AngⅡ+20umol/L丹参多酚酸盐)、低剂量组(完全培养液+10-8mol/L AngⅡ+2umol/L丹参多酚酸盐)。（2）实验三分组:正常组（完全培养液）、模型组(完全培养液+10-8mol/L AngⅡ)、海风藤高剂量(完全培养液+10-8mol/L AngⅡ+10mg/mL海风藤药液)、中剂量组(完全培养液+10-8mol/L AngⅡ+1mg/mL海风藤药液)、低剂量组(完全培养液+10-8mol/L AngⅡ+0.1mg/mL海风藤药液)。2.4 ELISA法检测TGF-β、FN、ColⅣ含有量:分别于24h、48h、72h后收集细胞上清液,采用酶联免疫吸附法（ELISA法）,严格按试剂盒所附说明书操作,每组设10个复孔,检测TGF-β、FN、ColⅣ蛋白浓度。检测出OD值后,依据标准曲线计算出对应浓度。2.5免疫印迹分析法（Weatern blot）检测:收集48h时间点培养的肾小球系膜细胞并提取各组总蛋白,采用考马斯亮蓝法测定各组样品中蛋白含量,根据蛋白定量的结果,加入相应体积的总蛋白样品与5×蛋白质凝胶电泳上样缓冲液,100℃加热5min使蛋白变性。按常规方法进行10%-12%的SDS-PAGE变性电泳,每泳道加样10ul,80V电泳30min,100V电泳90min,转至PVDF膜,转膜缓冲液中60mA转膜90min,TBST封闭1h,分别加兔抗Smad2、Smad3多克隆抗体（1:1000）4℃过夜,经振荡、TBST洗涤后分别加入羊抗兔二抗（1:5000）,DAB显色,拍照。采用Scion Image软件分析对灰度值进行分析。2.5 Real-Time-PCR检测:收集48h时间点经处理的细胞,用trizol一步法抽取细胞总RNA,并测定A260/280,鉴定RNA纯度。分别取上述各组细胞克隆的总RNA,逆转录成cDNA,按照试剂说明步骤行Real-time-PCR检测,以GADPH引物作对照分析。TGF-β-F:5′-TAC TAC GCA AGG AGG TCA-3′,TGF-β-R:5′-AGC AAC ACG GGT TCA GGT-3′;Smad7–F:5′-CCA AAG GTC ACC ACC ATC CC-3′,Smad7-R:5′-CTT CAG TTT CTT GAG CAC CGA GT-3′;GADPH-F:5′-GAA ACG GCT ACC ACA TCC-3′,GADPH-R:5′ACC AGA CTT GCC CTC CA-3′。引物由北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司合成。扩增条件:95℃2min;95℃15s,60℃30s,共40个循环;取其循环阈值（Ct值）,采用比较2-△△Ct法分析TGF-β、Smad7基因在细胞中的相对含有量。2.6统计学方法:各数据资料采用（x±S）表示,采用SPSS17.0统计软件进行统计分析。组间统计采用单因素方差分析多重比较进行分析P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.MTT法结果1.1模型组与正常组比较,各时间点的模型组OD值均具有统计学意义（P<0.05）,并随着时间的延长而升高;与模型组比较,24h芪蓟肾康加味煎剂高、低浓度组及强的松组,48h芪蓟肾康加味煎剂高、中、低浓度组与强的松组均具有统计学意义（P<0.05）。1.2模型组与正常组比较,时间点24h,48h,72h均具有统计学意义（P<0.01）,并且随着时间的延长而升高。丹参多酚酸盐各组与模型组比较,24h、48h及72h时间点均具有统计学意义（P<0.01）,丹参多酚酸盐各剂量组比较,于24h、48h、72h均无统计学意义。1.3模型组与正常组比较,各时间点24h,48h,72h具有统计学意义（P<0.01）,并且随着时间的延长而升高。海风藤各组与模型组比较,24h及48h时间点均具有统计学意义（P<0.01）,72h时间点仅海风藤高剂量组与模型组具有统计学意义（P<0.01）。2.ELISA法检测结果2.1 ELISA法检测TGF-β含量:模型组与正常组比较,各时间点（24h、48h、72h）的模型组TGF-β具有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较各时间点的含药血清给药组均具有统计学意义（P<0.01）;与强的松组比较,24h芪蓟肾康加味煎剂各浓度组均具有统计学意义（P<0.05）;48h芪蓟肾康加味煎剂低浓度组具有统计学意义（P<0.05）;72h芪蓟肾康加味煎剂高、中浓度组均具有统计学意义;与芪蓟肾康加味煎剂高浓度组比较,各时间点低浓度均具有统计学意义（P<0.01）。2.2 ELISA法检测FN含量:模型组与正常组比较,各时间点（24h、48h、72h）的模型组FN具有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较各时间点的含药血清给药组均具有统计学意义（P<0.01）;与强的松组比较,24h芪蓟肾康加味煎剂中、低浓度组均具有统计学意义（P<0.05）;48h芪蓟肾康加味煎剂各浓度组均具有统计学意义（P<0.05）;72h芪蓟肾康加味煎剂高、低浓度组均具有统计学意义;与芪蓟肾康加味煎剂高浓度组比较,各时间点低浓度组均具有统计学意义（P<0.01）。2.3 ELISA法检测ColⅣ含量:模型组与正常组比较,各时间点（24h、48h、72h）的模型组ColⅣ具有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较各时间点的含药血清给药组均具有统计学意义（P<0.01）;与强的松组比较,24h芪蓟肾康加味煎剂各浓度组均具有统计学意义（P<0.05）;48h芪蓟肾康加味煎剂高、中浓度组均具有统计学意义（P<0.05）;72h芪蓟肾康加味煎剂低浓度组具有统计学意义;与芪蓟肾康加味煎剂高浓度组比较,各时间点低浓度组均具有统计学意义（P<0.01）。3.蛋白免疫印迹法结果（Western Blot）3.1实验一:收集48h时间点细胞进行实验,模型组与正常组比较,模型组Smad2、Smad3具有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较各含药血清给药组均具有统计学意义（P<0.01）;与强的松组比较,芪蓟肾康加味煎剂高、中浓度组均具有统计学意义（P<0.01）;与芪蓟肾康加味煎剂高浓度组比较,中、低浓度组具有统计学意义（P<0.01）。与中浓度组比较,低浓度组具有统计学意义（P<0.01）。3.2实验二:收集48h时间点细胞进行实验,模型组与正常组比较,Smad2、Smad3表达均增多（P<0.01）;丹参多酚酸盐各组与模型组比较,Smad2、Smad3蛋白表达均减少（P<0.05）;丹参多酚酸盐各组比较,Smad2蛋白:高、中剂量组较低剂量组蛋白表达水平下调,具有统计学意义（P<0.01）;Smad3蛋白:各剂量组比较无统计学意义。3.3实验三:收集48h时间点的各组细胞进行实验,模型组与正常组比较,Smad2、Smad3表达均增高（P<0.01）;海风藤各组与模型组比较,Smad2、Smad3蛋白表达均降低具有统计学意义（P<0.01）;海风藤各组比较,Smad2蛋白:海风藤高、中剂量组较低剂量组蛋白表达水平下调（P<0.01）,Smad3蛋白:海风藤高剂量组较中剂量组、低剂量组表达水平下调（P<0.01）。4.Real-Time-PCR结果4.1实验一:收集48h时间点的各组细胞进行实验,与正常组比较,模型组TGF-βmRNA具有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较各含药血清给药组均具有统计学意义（P<0.01）;与强的松组比较,芪蓟肾康加味煎剂各浓度组均具有统计学意义（P<0.01）;与芪蓟肾康加味煎剂高浓度组比较,中、低浓度具有统计学意义（P<0.01）;与中浓度组比较,低浓度组具有统计学意义（P<0.01）。与正常组比较,模型组Smad7 mRNA具有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较各含药血清给药组均具有统计学意义（P<0.01）;与强的松组比较,芪蓟肾康加味煎剂高、中浓度组均具有统计学意义（P<0.01）;与芪蓟肾康加味煎剂高浓度组比较,中、低浓度均具有统计学意义（P<0.01）;与中浓度组比较,低浓度组具有统计学意义（P<0.01）。4.2实验二:选择48h时间点收集细胞进行实验,TGF-βmRNA相对表达情况:模型组与正常组比较,具有统计学意义（P<0.01）;丹参多酚酸盐各组与模型组比较,具有统计学意义（P<0.01）;Smad7 mRNA相对表达情况:模型组与正常组比较,具有统计学意义（P<0.01）;丹参多芬酸盐各组与模型组比较,具有统计学意义（P<0.01）。4.3实验三:收集48h时间点的各组细胞进行实验,TGF-βmRNA相对表达情况:模型组与正常组比较,具有统计学意义（P<0.01）;海风藤各组与模型组比较,具有统计学意义（P<0.01）;Smad7 mRNA相对表达情况:模型组与正常组比较,具有统计学意义（P<0.01）;海风藤各组与模型组比较,具有统计学意义（P<0.01）。结论:1.血管紧张素Ⅱ能够诱导人肾小球系膜细胞及细胞外基质增殖;2.强的松能够有效抑制人肾小球系膜细胞及细胞外基质的增殖,并抑制TGF-β/Smad信号通路的传导;3.芪蓟肾康加味煎剂能够抑制人肾小球系膜细胞及细胞外的增殖,具有类激素样作用,可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路各靶点,从而延缓肾小球硬化;4.芪蓟肾康加味煎剂的类激素样作用随着剂量增高而呈现加强趋势;5.丹参多酚酸盐能够抑制肾小球系膜细胞增殖,通过作用于TGF-β/Smad信号转导通路的各靶点,从而抑制肾小球硬化;6.海风藤能够抑制肾小球系膜细胞增殖,通过作用于TGF-β/Smad信号转导通路的各靶点,从而抑制肾小球硬化。
韩烨晨[3]（2017）在《复方中药对腹水综合征肉鸡肝组织纤维化的影响》文中研究表明肉鸡腹水综合征（Ascites Syndrome,AS）是一种常见的代谢病,病因复杂,发病率高,预后较差。中药作为纯天然产物,具有低残留、低毒副作用等特点,研究证实能有效防治AS。研究表明,TGF-β1等促纤维化因子及TGF/Smad通路与肝组织病理变化密切相关。本试验旨在研究AS肉鸡肝组织胶原蛋白和肝纤维化相关因子及其通路的变化,和复方中药有效防治AS的相关机理。方法:采用多因素法（饮水中添加0.12%Na+,日粮中添加3%猪油和4%鱼粉）诱导腹水综合征模型。309羽7日龄罗斯肉鸡随机分为空白组、模型组（多因素法诱导模型）、L-Arg组（多因素诱导模型,日粮中再添加1%L-Arg）、中药组（分为高、中、低剂量组,多因素诱导模型,饮水中分别添加2、1、0.5 g/kg.d复方中药）。于15、25、35和45日龄每组随机取10羽鸡只,称重,剖杀,观察病理变化,取心脏、肺脏、肝脏、脾脏测定脏器指数,取部分肝组织观察病理学变化,ELISA法检测肝组织α-SMA、I型胶原、III型胶原、HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF蛋白含量,荧光定量PCR法检测肝组织 HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF、Smad2、Smad3、Smad7 mRNA相对表达量,。结果:1、试验发现,模型组肉鸡体态瘦小,精神状态差,腹部膨大有波动感,穿刺可见稻草黄色液体,剖检可见心包积液,右心肥大,质软壁薄,肝、肺充血肿大。各剂量中药组和L-Arg组肉鸡症状均有不同程度减轻。2、与空白组相比,各日龄模型组AS发病率、腹水心脏指数、心脏指数、肺脏指数和肝脏指数显着增加（P<0.01或P<0.05）,体重和脾脏指数显着降低（P<0.01或P<0.05）;与模型组相比,各日龄各剂量中药组和L-Arg组AS发病率、腹水心脏指数、心脏指数、肺脏指数和肝脏指数显着降低（P<0.01或P<0.05）,体重和脾脏指数显着增加(P<0.01或P<0.05。3、与空白组相比,各日龄模型组肝组织α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、HIF-1α、TGF-β1、TβRI和CTGF蛋白水平显着增加（P<0.01或P<0.05）;与模型组相比,各日龄各剂量中药组和L-Arg组肝组织α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、HIF-1α、TGF-β1、TβRI和CTGF蛋白水平显着降低（P<0.01或P<0.05）。4、与空白组相比,各日龄模型组肝组织HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF、Smad2和Smad3 mRNA相对表达量显着增加（P<0.01或P<0.05）,Smad7 mRNA相对表达量显着降低（P<0.01或P<0.05）;与模型组相比,各剂量中药组和L-Arg组肝组织HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF、Smad2 和 Smad3 mRNA 相对表达量显着降低（P<0.01 或P<0.05）,Smad7 mRNA相对表达量显着增加（P<0.01或P<0.05）。结论:1、AS肉鸡AHI、心脏指数、肺脏指数、肝脏指数和肝组织α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF 蛋白含量以及 HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF、Smad2和Smad3 mRNA相对表达量增加,体重、脾脏指数和Smad7 mRNA相对表达量降低,表明TGF/Smad信号通路通过调控促纤维化相关因子,促进肝组织发生纤维化,参与AS形成与发展。2、复方中药和L-精氨酸能下调AS肉鸡AHI、心脏指数、肺脏指数、肝脏指数和肝组织α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、HIF-1α、TGF-β1、TβRI和CTGF蛋白含量以及HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF、Smad2和Smad3mRNA相对表达量,上调体重、脾脏指数和Smad7mRNA相对表达量,表明复方中药和L-精氨酸能通过TGF/Smad信号通路通过调控促纤维化相关因子,抑制肝组织发生纤维化,有效防治AS。
崔荷英[4]（2018）在《万金文武汤对大鼠糖尿病性心肌病的保护作用及其机制研究》文中认为目的1.观察朝医方万金文武汤对糖尿病心肌病大鼠的血清指标及形态学结构的影响;2.阐明万金文武汤对大鼠糖尿病心肌病发挥保护的作用机制;3.探讨万金文武汤对糖尿病大鼠抗心肌缺血/再灌注损伤的作用机制。方法1.健康雄性SD大鼠共60只,即正常组（Control组）10只,其余50只一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）65mg/kg,72h后测空腹血糖≥11.1 mmol/L确定糖尿病模型造模成功。正常饲养1个月后,开始灌胃给药。2.糖尿病大鼠随机分为5个组进行灌胃:（1）糖尿病组（DM组）,给予生理盐水,1mL/kg/d;（2）万金文武汤低剂量组（WJL组）,给予万金文武汤300 mg/kg/d;（3）万金文武汤高剂量组（WJH组）,给予万金文武汤600mg/kg/d;（4）二甲双胍组（Met组）,给予二甲双胍140mg/kg/d;（5）泽兰水提取物组（ALT组）,给予泽兰水提取物200mg/kg/d。灌胃8周,每日一次。3.药物灌胃8周结束后,每组各5只,麻醉,结扎冠状动脉左前降支构建心肌缺血/再灌注模型（缺血30min/再灌注60min）,正常假手术组（Sham Control组）只穿线不结扎,并持续观察心电图变化。4.通过试剂盒检测血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C、SOD、MDA、CK-MB以及血液中的GHb的变化;WesternBlot法检测心肌细胞HIF-1α、HO-1、VEGF、NF-κB、GSK3β、p-GSK3β、Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3 的蛋白表达;通过电镜观察心肌组织超微结构;免疫组化检测HIF-1α和VEGF的变化;HE染色观察心肌细胞结构变化。结果1.经药物灌胃8周后,与糖尿病模型组相比,万金文武汤高剂量组的血糖和GHb明显降低（P<0.05）,血清TC、TG、LDL-C、MDA、CK-MB明显下降（P<0.01）,血清SOD、HDL-C值出现显着上升（P<0.01）。2.通过WesternBlot法发现,在糖尿病心肌病中,与糖尿病模型比较万金文武汤高剂量组的HIF-1 α、HO-1、VEGF水平明显下降（P<0.05）,炎症因子NF-κB水平明显下降（P<0.05）,p-GSK3β/GSK3β水平明显上调（P<0.05）,Bcl-2/Bax水平明升高（P<0.05）,Cleaved-caspase-3/caspase-3 水平明显上升（P<0.05）。在心肌缺血/再灌注损伤中,与糖尿病I/R比万金高文武汤剂量I/R的HIF-1α、HO-1、VEGF水平明显上升（P<0.05）,炎症因子NF-κB水平明显下降（P<0.05）,p-GSK3β/GSK3β水平明显上调（P<0.05）,Bcl-2/Bax 水平明升高（P<0.05）,Cleaved-caspase-3/caspase-3 水平显着升高（P<0.05）。3.电镜结果显示,与糖尿病模型组相比,万金文武汤高、低剂量组均有不同程度改善。4.免疫组化结果显示,与糖尿病模型组比,万金文武汤高剂量组的HIF-1α和VEGF表达明显减少（P<0.05）。5.HE染色显示,万金文武汤高、低剂量组均有改善糖尿病心肌病导致的心肌细胞排列及形态变化。结论1.万金文武汤对大鼠糖尿病心肌病损伤发挥保护作用,其机制可能与调控HIF-1α,进而调节其下游的HO-1和VEGF表达,并抑制NF-κB等炎症因子,降低磷酸化的GSK-3β活性,减少Bcl-2/Bax比值及caspase-3等凋亡相关蛋白表达有关。2.万金文武汤可以改善糖尿病心肌病大鼠的心肌缺血/再灌注损伤,其机制可能与调控HIF-1α/HO-1和HIF-1α/VEGF信号通路,并降低NF-κB等炎症因子表达,抑制磷酸化的GSK-3β活性,下调Bcl-2/Bax比值及caspase-3等凋亡相关蛋白表达有关。
马滢[5]（2018）在《丹酚酸B调控pSmad3C/pSmad3L发挥抗肝纤维化—肝细胞癌作用》文中认为目的1.构建二乙基亚硝胺（Diethylnitrosamine,DEN）诱导小鼠肝纤维化-肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）动态模型,模拟肝纤维化-肝细胞癌发生发展过程。2.观察丹酚酸B（Salvianolic acid B,Sal B）对DEN诱导小鼠肝纤维化-HCC进程的影响。3.初步探讨Sal B经由pSmad3C/p21介导的抑制肝纤维化-肝癌信号、pSmd3L/PAI-1/c-Myc介导的促肝纤维化-肝癌信号转换机制。4.观察 Sal B 对转化生长因子-β1（Transforming grow factor beta 1,TGF-β1）诱导的HSC-T6细胞移行能力的影响,并初步分析在HSC-T6细胞中Sal B如何调控pSmad3C/p21 与 pSmad3L/PAI-1/c-Myc 信号转换。方法1.建立动物模型,观察Sal B对肝纤维化-HCC病变进程的影响。100只雄性昆明种小鼠,随机分成5组:正常对照组、模型组、不同剂量SalB(15,30 mg·kg-1)组、阳性药物秋水仙碱(0.2 mg·kg-1)组,每组20只。除正常对照组外,其余组根据小鼠体质量10 mL·kg-1腹腔注射1.0%DEN溶液（连续16周,1次/周）诱导肝纤维化-HCC模型,对照组给予相应溶媒。于造模当天开始,Sal B组小鼠分别给予15、30mg·kg-1·d-1 Sal B灌胃,阳性药物组给予0.2mg·kg-1·d-1秋水仙碱灌胃,正常对照组给予相应溶媒灌胃,持续给药至16周末。于造模第12、16周结束时分批处死小鼠,肝脏活检,苏木精-伊红（HE）染色、Van Gieson（VG）染色评估肝组织病理学特征。2.通过细胞划痕实验,观察Sal B对HSC-T6细胞移行能力的影响。实验分组:对照组,TGF-β1（60 pmol·L-1）刺激组,Sal B（25,50,100 umol·L-1）+TGF-β1（60 pmol·L-1）组。取HSC-T6对数生长期细胞,调整细胞密度为5.0×106 ml-1接种于6孔板中,待细胞生长面单层铺满后,更换无血清培养基饥饿2 h,划痕,于TGF-p1刺激组加入60pmol·L-1 TGF-βi,Sal B干预组分别加入Sal B（25,50,100 μmol·L-1）和60pmol·L-1 TGF-β1,对照组加入等体积溶媒,分别于划痕0h、12 h、24 h后倒置光学显微镜下摄片。3.Western blot 法检测肝组织和 HSC-T6 细胞中 pSmad3C,pSmad3L,p21,PAI-1和c-Myc表达常规方法提取小鼠肝组织细胞或HSC-T6中的总蛋白,分别采用兔抗pSmad3C、兔抗pSmad3L、小鼠抗p21、兔抗PAI-1、兔抗c-Myc和兔或小鼠抗GAPDH抗体检测 pSmad3C,pSmad3L,p21,PAI-1 和 c-Myc 表达。结果1.Sal B改善DEN诱导的肝纤维化-HCC小鼠的一般状况DEN诱导的肝纤维化-HCC小鼠12周后,与正常组比较,模型组小鼠出现皮毛枯槁无光泽、食欲不振、活动减少等表现,体重逐渐减轻;和模型组比较,Sal B组症状改善,食欲增加,精神状况较好。2.Sal B对DEN诱导的小鼠肝纤维化期的影响2.1 Sal B对小鼠体质量、肝重与肝脏系数的无显着影响与正常组相比,12周末时,模型组小鼠体质量、肝重与肝脏系数明显降低;与模型组比较,Sal B组小鼠体质量与肝重有增加的趋势,肝脏系数无明显变化。2.2 Sal B改善小鼠肝纤维化病变与正常组相比,12周末模型组小鼠肝脏表面粗糙,边缘变钝,肝组织炎性细胞浸润,胶原纤维增生,大量胶原纤维分隔肝小叶结构形成假小叶结构;与模型组比较,SalB组小鼠肝脏表面较光滑,质地较柔软,肝组织胶原纤维增生轻于模型组,未形成假小叶结构,Sal B组小鼠病变程度减轻。2.3 SalB对DEN诱导的肝纤维化小鼠肝组织中pSmad3C,pSmad3L,p21和PAI-1表达的影响12周时,与正常组相比,模型组pSmad3L,PAI-1,p21表达量明显升高,pSmad3C表达无显着变化:与模型组比较,SalB组pSmad3L与PAI-1表达显着减少,pSmad3C和p21表达明显增加。3.Sal B对DEN诱导的小鼠HCC癌前病变的影响3.1 Sal B增加小鼠体质量、肝重与肝脏系数16周末时,与正常组相比,模型组小鼠体质量、肝重与肝脏系数明显减少;与模型组比较,Sal B组小鼠体质量、肝重与肝脏系数增加,差异均具有统计学意义。3.2 Sal B改善小鼠肝脏HCC癌前病变16周末时,模型组肝脏出现大量弥漫性结节,质地坚硬,肝小叶结构紊乱,肝细胞核体积变大,染色变深,分裂相增多;与模型组比较,Sal B组小鼠肝脏结节少,质地较柔软,细胞核异型性均轻于模型组。3.3 Sal B对DEN诱导的HCC癌前病变期小鼠肝组织中pSmad3C,pSmad3L,p21,PAI-1和c-Myc表达的影响16周时,与正常组相比,模型组小鼠肝组织中pSmad3C、p21表达增加,pSmad3L、PAI-1和c-Myc蛋白水平显着升高;与模型组比较,Sal B组pSmad3L、PAI-1和c-Myc表达明显减低,pSmad3C表达量增加,p21蛋白水平无显着变化。4.Sal B抑制TGF-β1诱导的HSC-T6细胞移行在HSC-T6细胞中,与对照组比较,随着TGF-β1刺激时间的延长,TGF-β1刺激组划痕伤口宽度逐渐变窄,而与TGF-β1刺激组相比,SalB干预组伤口愈合速度缓慢,伤口宽度较宽。5.Sal B 对 TGF-β1诱导的 HSC-T6细胞内 pSmad3C、pSmad3L、PAI-1 和 p21 表达的影响在HSC-T6细胞中,与TGF-β1刺激组比较,Sal B干预组pSmad3C和p21表达显着增加,而pSmad3L和PAI-1表达明显降低。结论1.DEN诱导小鼠肝纤维化-HCC 12周时为纤维化病变期,16周时为HCC癌前病变期。2.Sal B延缓DEN诱导的小鼠肝纤维化-HCC发展进程。3.Sal B抑制TGF-β1诱导的HSC-T6细胞移行,发挥抗肝纤维化的作用。4.Sal B延缓肝纤维-HCC发生发展可能与调控pSmad3C/p21和pSmad3L/PAI-1/c-Myc 信号转换有关。
覃凤传[6]（2017）在《基于RAAS拮抗探讨四逆汤合五苓散治疗肝硬化腹水的研究》文中提出目的:观察《伤寒论》经方四逆汤合五苓散治疗乙肝后肝硬化腹水患者的临床疗效及其对肾素-血管紧张素-醛固酮系统（renin-angiotensinaldosterone system,RAAS）的影响,并通过观察该合方对肝硬化腹水大鼠的抗纤维化作用及其对RAAS的影响,进一步阐明四逆汤合五苓散基于RAAS拮抗作用治疗肝硬化腹水的机制,从而丰富中医药治疗肝硬化腹水的理论体系,为《伤寒论》经方的临床应用提供科学依据,促进经方的二次开发。方法:一、临床研究选取乙肝后肝硬化合并腹水患者65例为观察对象,按随机数字表法随机分为对照组32例,治疗组33例。对照组予恩替卡韦（ETV）抗病毒+基础治疗（保肝）,治疗组予ETV+基础治疗+四逆汤合五苓散;共治疗3个月。并于治疗前后观察患者的临床症状,检测肝功能、肝纤四项、乙肝病毒载量、腹水B超及Fibrotouh检测肝脏硬度值（KPA）;并分别于治疗前、治疗后1个月、治疗结束后检测Ang-II、Aldo。二、实验研究方法:予SD雌性大鼠腹腔注射四氯化碳及苯巴比妥以制备肝硬化腹水大鼠模型。将大鼠先随机分为空白组、模型组、实验组、阳性对照组。空白组予灌服等体积蒸馏水;实验组予灌服四逆汤合五苓散;阳性对照组予灌服秋水仙碱;模型组造模成功后予灌服等体积蒸馏水,各组每天均灌胃1次,连续灌胃6周。实验结束时检测各组大鼠血清AST、ALT、ALB、Ang-II、Aldo、肝纤四项指标情况;HE染色观察肝组织病理学改变及大鼠腹水情况。结果:一、临床研究两组患者治疗后在临床症状积分、临床疗效、AST、ALT、Ang-II、Aldo、肝纤维化指标、肝脏硬度值、腹水分度及腹水量分级积分与治疗前比较,均得到改善（P<0.05）。两组治疗后,治疗组中的临床症状积分、临床疗效、AST、ALT、肝纤维化指标、肝脏硬度值、腹水分度及腹水量分级积分分别与对照组进行组间比较,有统计学差异（P<0.05）。两组患者治疗期间均未出现明显的不良反应。二、实验研究结果:1、治疗结束后:与空白组对比,模型组AST、ALT、HA、PC-III、IV-C、LN、Ang-II及Aldo含量均升高（P<0.05）;与模型组比较,实验组AST、ALT、TBIL、HA、PC-III、LN、Ang-II及Aldo含量均降低（P<0.05）,差异有统计学意义;模型组与阳性对照组比较均未见明显差异（P>0.05）。2、HE染色病理结果显示模型组的肝纤维化最重,实验组最轻。3、治疗结束后,实验组与模型组比较,实验组腹水量均较模型组降低（P<0.05）,差异有统计学意义。结论:四逆汤合五苓散治疗乙肝后肝硬化腹水患者,可改善乙肝后肝硬化患者的临床症状积分、临床疗效、AST、ALT、Ang-II、Aldo、肝纤维化指标、腹水分度及腹水量分级积分,抑制RAAS的激活,从而提高患者生活质量,延长患者的生命。RAAS的异常激活可加重肝硬化,而通过动物实验研究发现,四逆汤合五苓散能改善肝硬化腹水大鼠肝功能及肝纤维化指标,并可通过抑制RAAS轴的激活来发挥其抗肝纤维化的作用机制。
朱宇溪,周慢,赵兴旺,陈秋[7]（2017）在《糖尿病心肌病的中医治疗进展》文中指出糖尿病心肌病[1]（diabetic cardiomyopathy,DMC）是指发生于糖尿病患者的,不能用高血压性心脏病、冠状动脉粥样硬化性心脏病及其他心脏病变来解释的心肌疾病。糖尿病心肌病是糖尿病最常见也是最危险的并发症之一,其病变关键在于心肌纤维化、心室重塑及心肌细胞凋亡,尤其是心肌细胞功能与数量的改变。常表现为心脏扩大、充血性心力衰竭、心律失常、心绞痛等。中医将糖尿病心肌病归纳至"消渴","心悸","胸痹","真心痛"的范畴内。中医药在整体治疗、辨证论治等方面有着独特的优势,其治疗的主要目的是缓解患者症状、改善生活质量等。本文将就近几年中医药治疗糖尿病心肌病的方法以论述。
金宝兰[8]（2017）在《解毒通络浸膏干预实验性糖尿病大鼠心肌纤维化作用机制研究》文中提出目的:观察解毒通络浸膏对实验性糖尿病大鼠心肌纤维化相关细胞因子影响,从细胞因子角度探讨解毒通络浸膏对糖尿病心肌病的作用机制。方法:1健康雄性60只wister大鼠适应性喂养一周,进行造模组（52只）、正常组（8只）随机划分,每公斤55毫克的STZ（1%）注射进造模组大鼠腹内,用于DM大鼠模型（实验性）制备,完成造模之后72小时抽取大鼠尾静脉血,进行空腹血糖（fast blood glucose,FBG）检测,血糖≥16.7mmol/L,尿糖+++以上视为造模成功。将STZ造模成功的35只大鼠继续普通饲料喂养12周后,随机分为糖尿病性心肌病（DCM）模型组12只、解毒通络浸膏组12只,依那普利组11只。分别灌胃给予解毒通络浸膏水溶液16.7g/kg/d,依那普利1.5mg/kg/d,DCM组和正常组给予等体积的蒸馏水,连续灌胃共6周。观察大鼠一般状态,记录每周体重及监测血糖;实验结束第18周时记录左心室插管测定血流动力学指标,计算全心重指数（全心重/体重,HW/BW）;生化法检测空腹血糖及脂代谢指标,ELISA法检测大鼠血清AngⅡ,血清LN。2观察光学显微镜心肌组织病理形态学及超微结构变化。3采用免疫组织化学法检测NF-kB、TLR4、Coll I及CollⅢ、TGF-β1的表达;应用半定量RT-PCR检测TLR4、HGF的m RNA表达。结果:1解毒通络浸膏能够改善实验性DCM大鼠的一般状态及多饮、多食、多尿、消瘦的临床症状。2解毒通络浸膏能够抑制实验性DCM大鼠心脏肥大,具有改善心功能及保护作用,减少AngⅡ及LN水平。3解毒通络浸膏能够降低实验性DCM大鼠空腹血糖、TC、TG、LDL-C、Hs-CRP,改善糖代谢和脂代谢。4解毒通络浸膏能够改善实验性DCM大鼠的心脏组织病理学及超微结构的改变,减少胶原的积聚,可能具有抑制心肌纤维化作用。5解毒通络浸膏能够抑制干预DCM大鼠心肌纤维化作用与降低心肌组织中NF-kB、TLR4、Coll I、CollⅢ及TGF-?1蛋白的表达相关。6解毒通络浸膏能够抑制干预实验性DCM大鼠心肌组织中TLR4的表达及增加HGF的表达,具有心脏保护作用与改善心肌纤维化作用。结论:解毒通络浸膏能够改善实验性DCM大鼠的一般状态及多饮、多食、多尿、消瘦的症状;抑制心脏肥大,具有改善心功能及保护作用;减少AngⅡ及LN水平;空腹血糖、TC、TG、LDL-C、Hs-CRP,改善糖代谢和脂代谢;改善心肌组织病理学及超微结构的改变,减少胶原的积聚;抑制心肌纤维化作用与降低心肌组织中NF-kB、TLR4、Coll I、CollⅢ及TGF-?1蛋白的表达相关;抑制心肌组织中TLR4的表达及增加HGF的表达,具有心脏保护作用与改善心肌纤维化作用。
张晓[9]（2017）在《丹参对成骨细胞和破骨细胞生物学行为的双向调控作用及其机制研究》文中研究表明第一部分丹参对小鼠前成骨细胞的增殖分化的影响及其与MAPK信号通路关系研究目的:研究丹参对于小鼠前成骨细胞（MC3T3-E1）的增殖、分化及矿化的影响,并研究其与细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）和p38细胞信号通路的关系。方法:分别用生药浓度为75mg/L、150mg/L、300mg/L的丹参注射液稀释液干预MC3T3-E1小鼠前成骨细胞,并设对照组;用CCK8法检测细胞增殖活性的改变,培养21d后茜素红染色法检测各组钙结节生成情况,实时荧光定量PCR（qPCR）法检测各组骨钙素（BGP）、Runt相关基因2（Runx2）mRNA表达情况。设300mg/L浓度的丹参干预组和对照组,蛋白免疫印迹法检测p-ERK1/2、p-p38蛋白的表达情况;用ERK1/2信号通路抑制剂PD98059和p38信号通路抑制剂SB203580分别抑制ERK1/2、p38通路后,qPCR检测成骨相关基因BGP、Runx2基因mRNA表达改变。结果:与对照组相比,24h、48h、72h三个时间点,经不同浓度的丹参干预后MC3T3-E1细胞的OD值均较对照组升高,且呈浓度依赖性。培养21d后茜素红染色结果不同浓度丹参干预组钙结节生成数量比对照组明显增多（p<0.01）。在4d和7d两个时间点,各个浓度丹参干预组的BGPmRNA、Runx2 mRNA相对表达量较对照组均增加,并呈浓度、时间依赖性。经过丹参干预后（300mg/L）,磷酸化ERK1/2蛋白表达相对表达量是对照组的1.4倍（P<0.05）,磷酸化p38蛋白的表达与对照组相比差异无统计学意义。300mg/L丹参组比300mg/L丹参+PD98059组的BGPmRNA、Runx2mRNA相对表达量均明显增多,分别是1.35倍和1.08倍（P<0.01、P<0.05）;但与300mg/L丹参+SB203580组相比,BGPmRNA、Runx2mRNA相对表达量差异无统计学意义。结论:丹参能促进成骨细胞增殖、分化,增进矿化作用,作用机制可能与激活MAPK信号通路中的ERK1/2通路有关,而与p38信号通路无明显相关。第二部分丹参通过P38MAPK和JAK2/STAT3信号通路对高铁环境下MC3T3-E1小鼠前成骨细胞起保护作用目的:研究丹参对高浓度铁离子环境下的MC3T3-E1小鼠前成骨细胞的增殖、成骨分化、矿化能力的影响,并探索其中的作用机制。方法:在培养基中加入高浓度铁离子模拟成骨细胞铁蓄积,设F1组:50μmol/L的枸橼酸铁铵（FAC）;F2组:200μmol/L的FAC;D1+F2组:75mg/L的丹参+200μmol/L的FAC;D2+F2组:150mg/L的丹参+200μmol/L的FAC组;D3+F2组:300mg/L的丹参+200μmol/L的FAC组,及对照组;用CCK8法检测细胞增殖活性的改变;茜素红染色法检测各组钙结节生成情况;流式细胞术检测细胞凋亡率改变;实时荧光定量PCR法（qPCR）检测各组BGP、Runx2、Col1a基因mRNA表达情况。对F2组、D2+F2组及CON组用western blot检测磷酸化p38（p-p38）、p-JAK2、p-STAT3蛋白的表达情况。结果:经过CCK8法检测,用一定浓度丹参处理的MC3T3-E1细胞（D1+F2组、D2+F2组）的存活率高于高铁组（F2组）的存活率（p<0.01）;经茜素红染色法检测,D2+F2组的钙结节生成率明显大于F2组;经流式细胞术检测结果提示在高铁培养环境中加了不同浓度的丹参各组比单纯高铁组（F1、F2组）的MC3T3-E1凋亡率明显下降（p<0.01）;经qPCR检测,相比高铁组（F2组）,加了不同浓度的丹参各组,成骨相关基因（BGP、Runx2、Col1a）的mRNA的表达均明显增加（P<0.05）;Western blot检测发现在高铁培养环境下p-p38、p-JAK2和p-STAT3蛋白的表达量均明显增加（p<0.01）。而加入一定浓度丹参后p-p38和p-JAK2蛋白的表达又明显减少（p<0.01）。结论:丹参能拮抗高浓度铁离子环境对MC3T3-E1小鼠前成骨细胞的增殖、成骨分化、矿化的抑制作用,并且减少细胞凋亡,故对铁蓄积环境下的成骨细胞起保护作用,其中的机制可能与丹参抑制了P38MAPK信号通路和JAK2/STAT3信号通路的激活有关。第三部分丹参对小鼠巨噬细胞系RAW264.7的增殖、破骨分化和破骨功能的影响及其机制研究目的:研究丹参对小鼠前破骨细胞RAW264.7的增殖、分化和破骨相关功能的影响和机制。方法:采用RANKL诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞在体外向破骨细胞分化的模型,用不同浓度的丹参的水溶性成分混合物（丹参注射液稀释液）处理细胞,浓度分别为75mg/L、150mg/L、300mg/L,用CCK8法检测细胞的增殖活性,通过抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase,TRAP）染色法检测各组破骨细胞数量;用荧光定量聚合酶反应（qPCR）检测破骨相关基因组织蛋白激酶（CTK）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、TRAP的mRNA转录情况;western blot检测破骨相关蛋白TRAP、CTK、NFATc1的表达情况;利用荧光探针DCFH-DA显示各组细胞内的活性氧（ROS）,并用荧光显微镜观测和多功能酶标仪上检测吸光度值两种方法检测ROS水平。结果:CCK8检测结果提示丹参能抑制RAW264.7细胞的增殖活性,且呈浓度依赖性;TRAP染色提示丹参能抑制破骨细胞的生成和成熟;qPCR检测提示丹参能抑制破骨相关基因CTK、MMP-9、TRAP的mRNA的转录,且呈浓度依赖性;western blot检测结果示丹参能抑制破骨相关蛋白TRAP、CTK、NFATc1的表达;荧光显微镜和酶标仪检测均显示,丹参能减轻RAW264.7细胞内ROS水平且呈浓度依赖性。结论:丹参能抑制RAW264.7细胞向破骨细胞方向分化,并能抑制RAW264.7细胞的增殖、破骨分化以及破骨相关功能,其中的机制与减少细胞内ROS生成和抑制NFATc1通路有关。
刘倩[10]（2017）在《基于AdipoR1/AMPK通路探讨黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠糖脂代谢的影响》文中指出目的:基于Adipo R1/AMPK信号通路考察黄芪、葛根配伍对糖尿病大鼠肝脏糖脂代谢及炎症反应的影响,探讨黄芪、葛根配伍对糖尿病大鼠糖脂代谢、炎症反应的作用机制,分析黄芪葛根配伍对调节糖尿病大鼠糖脂代谢及炎症反应的交互效应,为临床治疗糖尿病的新药研发及合理用药奠定基础。材料与方法:将86只SPF级SD雄性大鼠,按照血糖因素随机分为（1）正常组11只、（2）模型组15只、（3）阳性对照组15只、（4）黄芪组15只、（5）葛根组15只、（6）黄芪葛根汤组15只。除正常组外,其余各组大鼠均一次性给予腹腔注射链脲佐菌素（STZ）46 mg·kg-1,诱导糖尿病模型。按照正常组蒸馏水10m L·kg-1、模型组蒸馏水10m L·kg-1、阳性对照组1.47g·kg-1、黄芪组2.7g·kg-1、葛根组1.35g·kg-1、黄芪葛根汤组4.05g?kg-1的剂量灌胃,各组连续给药30d。给药30d后,检测大鼠空腹血糖、血清胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）含量,用酶联免疫吸附试验法（ELISA法）检测大鼠肝脏组织胰岛素（Ins）、胰岛素受体（Ins R）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量,采用实时荧光定量PCR法（QPCR法）检测大鼠肝脏组织脂联素受体1（Adipo R1）、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、葡萄糖转运体4（GLUT-4）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）、过氧化物酶增殖体激活受体-α（PPARα）m RNA表达水平。实验数据用SPSS17.0进行统计分析。结果:1.对糖尿病大鼠血糖、血脂的影响（1）对糖尿病大鼠血糖的影响:模型组大鼠血糖显着增高,黄芪组、葛根组、黄芪葛根汤组大鼠血糖显着降低,差异有统计学意义（P<0.05）,黄芪、葛根之间交互作用无统计学意义（P>0.05）。（2）对糖尿病大鼠血脂的影响:（1）对糖尿病大鼠血清CHO的影响:模型组大鼠血清CHO水平显着增高,黄芪组、葛根组、黄芪葛根汤组大鼠血清CHO水平显着降低,差异有统计学意义（P<0.05）,黄芪、葛根之间交互作用无统计学意义（P>0.05）。（2）对糖尿病大鼠血清TG的影响:模型组大鼠血清TG水平显着增高,黄芪组、葛根组、黄芪葛根组大鼠血清TG水平显着降低,差异有统计学意义（P<0.05）,黄芪、葛根之间交互作用有统计学意义（P<0.05）,两药配伍优于单一用药。2.对糖尿病大鼠肝脏Ins、Ins R、TNF-α水平的影响（1）对糖尿病大鼠肝脏Ins水平的影响:模型组大鼠肝脏Ins水平显着降低,黄芪组、黄芪葛根汤组大鼠肝脏Ins水平显着增高,差异有统计学意义（P<0.05）,黄芪、葛根之间交互作用无统计学意义（P>0.05）。（2）对糖尿病大鼠肝脏Ins R水平的影响:模型组大鼠肝脏Ins R水平显着降低,黄芪组、葛根组、黄芪葛根汤组大鼠肝脏组织Ins R水平显着增高,差异有统计学意义（P<0.05）。黄芪、葛根之间交互作用有统计学意义（P<0.05）,两药配伍不如单用黄芪效果明显。（3）对糖尿病大鼠肝脏TNF-α水平的影响:模型组大鼠肝脏TNF-α水平均显着增高,黄芪组、黄芪葛根汤组大鼠肝脏TNF-α水平显着降低,差异有统计学意义（P<0.05）。黄芪、葛根之间交互作用有统计学意义（P<0.05）,两药配伍不如单用黄芪效果明显。3.对糖尿病大鼠肝脏Adipo R1、AMPK、GLUT-4 m RNA表达水平的影响（1）对糖尿病大鼠肝脏Adipo R1 m RNA表达水平的影响:模型组大鼠肝脏Adipo R1m RNA表达水平显着降低,黄芪组、葛根组、黄芪葛根汤组大鼠肝脏Adipo R1 m RNA表达水平显着增高,差异有统计学意义（P<0.05）,黄芪、葛根之间交互作用无统计学意义（P>0.05）。（2）对糖尿病大鼠肝脏AMPK m RNA表达水平的影响:模型组大鼠肝脏AMPK m RNA表达水平显着降低,黄芪组、黄芪葛根汤组大鼠肝脏AMPK m RNA表达水平显着增高,差异有统计学意义（P<0.05）,黄芪、葛根之间交互作用无统计学意义（P>0.05）。（3）对糖尿病大鼠肝脏GLUT-4 m RNA表达水平的影响:模型组大鼠肝脏GLUT-4m RNA表达水平均显着降低,黄芪组、葛根组、黄芪葛根汤组大鼠肝脏GLUT-4 m RNA水平显着增高,差异有统计学意义（P<0.05）,黄芪、葛根之间交互作用无统计学意义（P>0.05）。4.对糖尿病大鼠肝脏p38 MAPK、PPARαm RNA表达水平的影响（1）对糖尿病大鼠肝脏p38 MAPK m RNA表达水平的影响:模型组大鼠肝脏p38 MAPK m RNA表达水平显着增高,黄芪组、葛根组、黄芪葛根汤组大鼠肝脏p38 MAPK m RNA表达水平显着降低,差异有统计学意义（P<0.05）,黄芪、葛根之间交互作用无统计学意义（P>0.05）。（2）对糖尿病大鼠肝脏PPARαm RNA表达水平的影响:模型组大鼠肝脏PPARαm RNA表达水平显着降低,黄芪组、葛根组、黄芪葛根汤组大鼠肝脏PPARαm RNA水平显着增高,差异有统计学意义（P<0.05）,黄芪、葛根之间交互作用有统计学意义（P<0.05）,两药配伍不如单用黄芪效果明显。结论:1.黄芪与葛根单用、黄芪与葛根配伍（黄芪葛根汤）均能降低糖尿病大鼠血糖;黄芪葛根汤降糖作用未体现黄芪与葛根配伍的协同增效,表明在降糖方面,方药之间不是简单的加和关系。2.黄芪与葛根单用、黄芪与葛根配伍（黄芪葛根汤）均能降低糖尿病大鼠血脂水平,但降低CHO方面,黄芪与葛根无交互作用;降低TG方面,两药有交互作用,二药配伍优于单一用药,表明方药作用于机体的协同与拮抗具有选择性。3.黄芪与葛根单用、黄芪与葛根配伍（黄芪葛根汤）调节血糖与其调节肝脏Ins、Ins R水平有关,而调节糖脂代谢与炎症反应可能与Adipo R1/AMPK信号通路有关。
二、丹参酸乙对大鼠心脏成纤维细胞增殖和c-fos基因表达的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、丹参酸乙对大鼠心脏成纤维细胞增殖和c-fos基因表达的影响（论文提纲范文）
（1）基于斑马鱼模型进行丹参酮ⅡA及衍生物的安全性评价和菲并咪唑衍生物的功效性探索（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 引言 |
| 1.1 丹参概述 |
| 1.2 丹参酮ⅡA的药理作用研究进展 |
| 1.2.1 心血管保护 |
| 1.2.2 神经保护 |
| 1.2.3 抗肿瘤活性 |
| 1.3 丹参酮ⅡA衍生物研究进展 |
| 1.4 斑马鱼在安全性评价中的应用 |
| 1.5 论文的主要研究思路与创新点 |
| 第二章 基于斑马鱼模型进行丹参酮ⅡA及其衍生物的心血管及神经系统的安全性研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验材料和试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 斑马鱼养殖 |
| 2.3.2 对心血管发育的影响 |
| 2.3.3 对神经行为的影响 |
| 2.3.4 发育毒性 |
| 2.3.5 截尾促发炎症细胞聚集反应 |
| 2.3.6 统计分析 |
| 2.4 结果 |
| 2.4.1 对心脏功能的影响 |
| 2.4.2 对血管新生的影响 |
| 2.4.3 对神经行为发展的影响 |
| 2.4.4 生长发育的影响 |
| 2.4.5 对伤口愈合能力的影响 |
| 2.4.6 炎症细胞聚集作用 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 本章小结 |
| 第三章 基于斑马鱼模型进行菲并咪唑衍生物的抗肿瘤和抗术后炎症并发症研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验材料和试剂 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 斑马鱼饲养和产卵 |
| 3.3.2 对细胞存活力的测定 |
| 3.3.3 建立斑马鱼幼虫肝癌模型 |
| 3.3.4 截尾引发炎症反应 |
| 3.3.5 体内活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)的测定 |
| 3.3.6 胚胎的毒性终点 |
| 3.3.7 统计分析 |
| 3.4 结果 |
| 3.4.1 L082对细胞活力的影响 |
| 3.4.2 L082对斑马鱼HepG2细胞增殖的体内活性 |
| 3.4.3 化合物L082抑制切口炎症细胞聚集 |
| 3.4.4 化合物L082驱动切口炎症清除 |
| 3.4.5 化合物L082抑制ROS的产生 |
| 3.4.6 化合物L082抑制NO产生 |
| 3.4.7 化合物L082对斑马鱼发育形态的影响 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 本章小结 |
| 第四章 总结和展望 |
| 4.1 总结 |
| 4.2 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
（2）基于活血通络的中药及中药复方对人肾小球系膜细胞的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 |
| 实验一 芪蓟肾康加味煎剂对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞TGF-β/Smad信号转导通路的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验二 丹参多酚酸盐对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞TGF-β/Smad信号转导通路的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验三 海风藤对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞TGF-β/Smad信号转导通路的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 第二部分 |
| 综述一 从“络”论治儿童肾小球疾病 |
| 参考文献 |
| 综述二 丹参、海风藤、青风藤与雷公藤治疗肾小球疾病研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（3）复方中药对腹水综合征肉鸡肝组织纤维化的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 文献综述 |
| 1 AS及其研究进展 |
| 1.1 AS主要发病原因 |
| 1.2 AS的主要临床症状和病理变化 |
| 1.3 AS发病机理 |
| 1.4 AS的主要防治办法 |
| 2 肝脏在AS中的变化及影响 |
| 3 肝脏与腹水 |
| 4 TGF/Smad通路及相关因子 |
| 前言 |
| 试验研究 |
| 1 试验材料 |
| 2 试验方法 |
| 3 试验结果 |
| 分析讨论 |
| 1 AS对肉鸡AHI、体重和脏器指数的影响 |
| 2 AS对肉鸡肝脏病理变化的影响 |
| 3 肝组织胶原在AS发病过程中的机制 |
| 4 肝组织促纤维化相关活性因子在AS发病过程中的机制 |
| 5 肝组织TGF/Smad通路在AS发病过程中的机制 |
| 6 复方中药对AS肝组织纤维化的防治作用 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| Abstract |
| 中英文缩写对照表 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 附件 |
（4）万金文武汤对大鼠糖尿病性心肌病的保护作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 缩略语 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 第二章 实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物与试剂 |
| 1.3 配制溶液 |
| 1.4 实验仪器及耗材 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 万金文武汤和泽兰水提取物的制备 |
| 2.2 糖尿病大鼠模型制备 |
| 2.3 大鼠急性心肌缺血/再灌注模型制备 |
| 2.4 大鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量 |
| 2.5 大鼠血清中SOD、MDA、CK-MB和溶血液中GHb的含量 |
| 2.6 Western Blot检测HIF-1α、HO-1、VEGF、NF-κB、GSK3β、p-GSK3β、Bcl-2、Bax、caspase-3、Cleaved-caspase-3蛋白表达 |
| 2.7 免疫组化测定HIF-1α、 VEGF的表达 |
| 2.8 HE染色 |
| 2.9 心肌超微结构的电镜表达 |
| 2.10 统计学分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 糖尿病大鼠血糖、GHb、SOD、MDA、CK-MB的表达 |
| 3.2 糖尿病大鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C的表达 |
| 3.3 Western Blot法检测糖尿病大鼠心肌组织中HIF-1α、HO-1、VEGF的蛋白表达 |
| 3.4 Western Blot法检测糖尿病大鼠心肌组织中GSK3β、p-GSK3β、Bcl-2、Bax、caspase-3、Cleaved-caspase-3的蛋白表达 |
| 3.5 Western Blot法检测糖尿病大鼠心肌组织中NF-κB的蛋白表达 |
| 3.6 电镜观察糖尿病大鼠心肌组织超微结构的变化 |
| 3.7 E染色法观察糖尿病大鼠心肌细胞形态结构的变化 |
| 3.8 免疫组化检测糖尿病大鼠心肌组织HIF-1α、VEGF蛋白表达 |
| 3.9 Western Blot法检测糖尿病大鼠心肌I/R后心肌组织HIF-1α、HO-1、VEGF的蛋白表达 |
| 3.10 Western Blot法检测糖尿病大鼠心肌I/R后心肌组织GSK3β、p-GSK3β、Bcl-2、Bax、caspase-3、Cleaved-caspase-3的蛋白表达 |
| 3.11 Western Blot法检测糖尿病大鼠心肌I/R后心肌组织NF-κB的蛋白表达 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 第三章 文献综述 |
| 1 糖尿病心肌病的概述 |
| 2 现代医学对糖尿病心肌病的研究概况 |
| 3 中医对糖尿病心肌病的研究概况 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（5）丹酚酸B调控pSmad3C/pSmad3L发挥抗肝纤维化—肝细胞癌作用（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 动物与细胞株 |
| 2.2 药品与试剂 |
| 2.2.1 药品 |
| 2.2.2 主要试剂与抗体 |
| 2.2.3 实验试剂配制 |
| 2.3 主要仪器和设备 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.4.1 动物实验 |
| 2.4.1.1 动物分组 |
| 2.4.1.2 构建DEN诱导小鼠肝纤维化-HCC动态模型 |
| 2.4.1.3 药物干预 |
| 2.4.1.4 小鼠一般状况观察 |
| 2.4.1.5 动物处死和肝组织处理 |
| 2.4.1.6 一般组织病理检查 |
| 2.4.1.7 Van Gieson(VG)染色 |
| 2.4.1.8 Western blot法检测小鼠肝组织中pSmad3C、pSmad3L、p21、PAI-1和c-Myc蛋白表达 |
| 2.4.2 细胞实验 |
| 2.4.2.1 HSC-T_6细胞复苏和冻存 |
| 2.4.2.2 Sal B干预TGF-β_1刺激的HSC-T_6细胞移行实验 |
| 2.4.2.3 Western blot法检测HSC-T_6细胞中pSmad3C、pSmad3L、p21、PAI-1和c-Myc蛋白表达 |
| 2.5 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 Sal B改善DEN诱导的肝纤维化-HCC小鼠的一般状况 |
| 3.2 Sal B对DEN诱导的小鼠肝纤维化的影响 |
| 3.2.1 Sal B对肝纤维化期小鼠体质量、肝重与肝脏系数的无显着影响 |
| 3.2.2 Sal B改善肝纤维化期小鼠肝脏大体形态特征的改变 |
| 3.2.3 Sal B改善肝纤维化期小鼠肝组织病理学变化 |
| 3.2.4 Sal B上调肝纤维化期小鼠肝组织中pSmad3C表达,抑制pSmad3L蛋白表达 |
| 3.2.5 Sal B抑制肝纤维化期小鼠肝组织中PAI-1表达,增加p21蛋白表达 |
| 3.3 Sal B对DEN诱导的小鼠HCC癌前病变的影响 |
| 3.3.1 Sal B增加HCC癌前病变小鼠体质量、肝重与肝脏系数 |
| 3.3.2 Sal B改善HCC癌前病变小鼠肝脏大体形态特征的改变 |
| 3.3.3 Sal B改善HCC癌前病变小鼠肝组织病理学变化 |
| 3.3.4 Sal B上调HCC癌前病变小鼠肝组织中pSmad3C表达,抑制pSmad3L蛋白表达 |
| 3.3.5 Sal B抑制HCC癌前病变小鼠肝组织中PAI-1和c-Myc蛋白表达 |
| 3.3.6 Sal B对HCC癌前病变小鼠肝组织中p21蛋白表达无显着影响 |
| 3.4 Sal B抑制TGF-β_1诱导的HSC-T_6细胞移行 |
| 3.5 Sal B对TGF-β_1诱导的HSC-T_6细胞内pSmad3C、pSmad3L、PAI-1和p21表达的影响 |
| 4.讨论 |
| 4.1 DEN诱导小鼠肝纤维化-HCG动态模型建立 |
| 4.2 Sal B发挥抗肝纤维化的作用，延缓肝纤维化-HCC发展进程 |
| 4.3 Sal B调控TGF-β_1/Smad通路延缓肝纤维化-HCG发生发展 |
| 4.4 Sal B调控pSmad3C/pSmad3L抑制HSC-T_6细胞的迁移 |
| 5.结论 |
| 6.下一步研究设想和与展望 |
| 参考文献 |
| 附录一 个人简历 |
| 附录二 致谢 |
| 附录三 丹酚酸及其有效成分对肝脏疾病的作用及作用机制的研究进展 |
| 参考文献 |
（6）基于RAAS拮抗探讨四逆汤合五苓散治疗肝硬化腹水的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 一、引言 |
| 1.肝硬化腹水的研究背景 |
| 2.RAAS轴与肝硬化 |
| 2.1 RAAS轴的研究进展 |
| 2.2 RAAS轴异常激活与肝纤维化 |
| 2.3 RAAS轴与肝硬化腹水 |
| 2.4 肝硬化腹水的治疗 |
| 3.中医对肝硬化腹水的认识 |
| 3.1 祖国医学对肝硬化腹水病名的认识 |
| 3.2 中医对肝硬化腹水病因病机的认识 |
| 3.3 乙肝后肝硬化与《伤寒论》三阴病的关系 |
| 3.4 乙肝后肝硬化腹水的体质学说 |
| 4.四逆汤合五苓散的方义 |
| 5.四逆汤合五苓散的现代药理研究 |
| 二、临床研究 |
| 1.病例选择 |
| 1.1 病例诊断标准 |
| 1.2 病例纳入标准 |
| 1.3 中医诊断标准 |
| 1.4 病例排除标准 |
| 1.5 病例剔除标准 |
| 1.6 病例脱落标准 |
| 1.7 病例终止标准 |
| 2.研究方法 |
| 2.1 研究对象分组及治疗方案 |
| 2.2 疗效观察指标 |
| 2.2.1 实验室检查 |
| 2.2.2 腹水B超及肝脏硬度值 |
| 2.3 疗效判定标准 |
| 2.3.1 中医症状积分观察 |
| 2.3.2 临床总体疗效情况 |
| 2.3.3 腹水分度标准 |
| 2.4 统计学分析方法 |
| 2.5 技术路线 |
| 3.临床研究结果 |
| 3.0 一般情况比较 |
| 3.1 两组治疗前后中医症状积分比较 |
| 3.2 两组治疗后的临床疗效比较 |
| 3.3 两组治疗前、治疗后的肝功能结果比较 |
| 3.4 两组治疗前后的肝纤四项结果比较 |
| 3.5 两组治疗前后的腹水分度比较 |
| 3.6 两组治疗前、治疗后一个月、治疗后三个月RAAS指标ANG-II及ALDO的比较 |
| 3.7 两组治疗前后KPA的的比较 |
| 3.8 两组治疗前后的HBV-DNA数值结果比较 |
| 3.9 安全性监测 |
| 4.讨论 |
| 4.1 临床研究结果分析 |
| 4.1.1 两组治疗前后的中医症状积分分析 |
| 4.1.2 两组治疗后的临床疗效分析 |
| 4.1.3 两组在改善肝功能的疗效分析 |
| 4.1.4 两组在改善肝纤维化指标的疗效分析 |
| 4.1.5 两组在改善腹水及RAAS轴指标ANGII及ALDO的疗效分析 |
| 4.1.6 两组在降低患者肝脏硬度值（KPA）的疗效分析 |
| 4.1.7 两组对降低乙肝病毒载量的影响分析 |
| 4.1.8 两组安全性分析 |
| 4.2 临床研究意义与展望 |
| 三、实验研究 |
| 前言 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 药物制备 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 复制动物模型 |
| 2.2 成模标准 |
| 2.3 实验动物分组与给药方法 |
| 3.实验指标检测 |
| 3.1 血清学指标 |
| 3.2 腹腔积液量的测量 |
| 3.3 肝组织HE染色 |
| 4.统计学处理 |
| 5.实验研究结果 |
| 5.1 大鼠一般情况 |
| 5.2 肉眼观察大鼠肝脏变化 |
| 5.3 HE染色 |
| 5.4 血清学指标 |
| 5.4.1 四逆汤合五苓散对肝硬化并腹水大鼠血清ALB、ALT、AST的影响 |
| 5.4.2 四逆汤合五苓散对肝硬化合并腹水大鼠血清HA、PC-III、IV-C、LN的影响 |
| 5.4.3 四逆汤合五苓散对肝硬化合并腹水大鼠血清RAAS指标ANG-II及ALDO的影响 |
| 5.4.4 四逆汤合五苓散对肝硬化并腹水大鼠尿量及腹水量的影响 |
| 6.讨论 |
| 6.1 实验研究结果分析 |
| 6.1.1 四组大鼠肝组织HE染色的镜下情况 |
| 6.1.2 四组大鼠肝功能（ALB、AST、ALT）及肝纤四项（HA、PC-III、IV-C、LN）的血清学情况 |
| 6.1.3 四组大鼠腹水量的结果分析 |
| 6.1.4 四组大鼠RAAS指标ANGⅡ及ALDO的结果分析 |
| 6.2 实验研究意义与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
（7）糖尿病心肌病的中医治疗进展（论文提纲范文）
| 1 中医如何认识糖尿病心肌病 |
| 2 中医治疗进展 |
| 2.1 单味中药 |
| 2.2 中药复方 |
| 2.3 针灸治疗 |
| 3 结语 |
（8）解毒通络浸膏干预实验性糖尿病大鼠心肌纤维化作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略语 |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1 糖尿病性心肌病中医药研究进展 |
| 2 糖尿病性心肌病西医研究进展 |
| 实验研究 |
| 实验一 解毒通络浸膏对实验性糖尿病大鼠心脏功能的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 实验二 解毒通络浸膏对实验性糖尿病大鼠心脏组织形态学的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 实验三 解毒通络浸膏对实验性糖尿病大鼠心脏组织相关蛋白及基因表达的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 1 解毒通络浸膏治疗的立法思想 |
| 2 解毒通络浸膏对 DCM 大鼠心脏功能的影响 |
| 3 解毒通络浸膏对实验性糖尿病大鼠心脏组织形态学的影响 |
| 4 解毒通络浸膏对实验性糖尿病大鼠心脏组织相关蛋白及基因表达影响 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附图 |
（9）丹参对成骨细胞和破骨细胞生物学行为的双向调控作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 本研究技术路线图 |
| 第一部分 丹参对小鼠前成骨细胞的增殖分化的影响及其与MAPK信号通路关系研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 丹参通过P38和JAK2/STAT3信号通路对高铁环境下MC3T3-E1小鼠前成骨细胞起保护作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 丹参对小鼠前破骨细胞RAW264.7 的增殖、分化和功能的影响 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 小结 |
| 综述一 丹参及其有效成分对骨代谢影响的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 丹参对骨代谢相关细胞信号通路影响研究进展 |
| 参考文献 |
| 英文缩略词表 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
（10）基于AdipoR1/AMPK通路探讨黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠糖脂代谢的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 现代中药治疗糖尿病及其并发症的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
四、丹参酸乙对大鼠心脏成纤维细胞增殖和c-fos基因表达的影响（论文参考文献）
- [1]基于斑马鱼模型进行丹参酮ⅡA及衍生物的安全性评价和菲并咪唑衍生物的功效性探索[D]. 赖石凤. 广东药科大学, 2020(01)
- [2]基于活血通络的中药及中药复方对人肾小球系膜细胞的影响[D]. 李爽. 辽宁中医药大学, 2018(07)
- [3]复方中药对腹水综合征肉鸡肝组织纤维化的影响[D]. 韩烨晨. 山西农业大学, 2017(01)
- [4]万金文武汤对大鼠糖尿病性心肌病的保护作用及其机制研究[D]. 崔荷英. 延边大学, 2018(12)
- [5]丹酚酸B调控pSmad3C/pSmad3L发挥抗肝纤维化—肝细胞癌作用[D]. 马滢. 安徽医科大学, 2018(12)
- [6]基于RAAS拮抗探讨四逆汤合五苓散治疗肝硬化腹水的研究[D]. 覃凤传. 广西中医药大学, 2017(04)
- [7]糖尿病心肌病的中医治疗进展[J]. 朱宇溪,周慢,赵兴旺,陈秋. 四川中医, 2017(05)
- [8]解毒通络浸膏干预实验性糖尿病大鼠心肌纤维化作用机制研究[D]. 金宝兰. 长春中医药大学, 2017(04)
- [9]丹参对成骨细胞和破骨细胞生物学行为的双向调控作用及其机制研究[D]. 张晓. 苏州大学, 2017(04)
- [10]基于AdipoR1/AMPK通路探讨黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠糖脂代谢的影响[D]. 刘倩. 辽宁中医药大学, 2017(02)