一、16例牛双芽巴贝西虫病诊疗报告（论文文献综述）
王帆[1]（2021）在《云岭山脉西南部地区巴贝虫病调查与流行特征研究》文中认为目的:以云南省云岭山脉西南部地区的部分县（市）为本次调查的空间范围,宿主动物（家畜、小型兽类）、传播媒介蜱和特定人群为研究对象。采用病原学、分子流行病学的方法,调查了解该地区宿主动物和传播媒介蜱、特定人群感染巴贝虫情况,并对感染巴贝虫的18S rRNA的基因序列及遗传进化进行分析,为巴贝虫病的防控提供科学依据。方法:1.采用抗凝血管采集家畜静脉血血样;采用夹线法、笼日法结合的方法捕获小型兽类,采集肝、脾脏样本;布旗法采集游离蜱,体表搜集法采集动物体表寄生蜱;定点医院采集不明原因发热和贫血患者静脉血血样、献血者血样。2.采用血液/组织基因组DNA提取试剂盒对上述样本进行DNA提取,扩增巴贝虫18S rRNA基因。PCR扩增阳性产物送测序公司进行测序,获得的序列登陆NCBI网站（http://www.ncbi.nlm.nih.gov）进行BLAST比对同源性分析、构建系统发育树进行遗传进化分析。3.对不明原因发热、贫血患者的血液制作血涂片进行形态学检测,经姬姆萨染色后显微镜下镜检,观察红细胞内感染巴贝虫情况,保存图像记录。结果:1.样本采集情况:在云南省云岭山脉西南部地区的3个调查县市（云龙县、剑川县和洱源县）采集小型兽类的脏器样本498份,分属4目8科14属27种。在4个调查县市（腾冲市、耿马县、云龙县和剑川县）采集家畜血液样本1139份（牛342份、羊747份、马33份和驴17份）;采集媒介蜱样本1003份（分属5属9种）;采集4个县（市）特定人群血液样本1373份（不明原因发热811份,贫血患者208份,献血者354份）。2.小型兽类检测结果:在498只小型兽类中共检出巴贝虫55份,阳性率为11.04%,分属7种小型兽类。云龙县和剑川县的样本检出巴贝虫阳性,阳性率分别为31.58%（54/171）和0.47%（1/212）,洱源县未检出阳性。3.家畜检测结果:在1139份家畜血液样本中共检出巴贝虫55份,阳性率为4.83%。牛、羊血液样本中均有检出,阳性率分别为2.05%（7/342）和6.43%（48/747）,马和驴未检出。4个县（市）均有分布,阳性率由高到低分别为剑川县22.61%（26/115）、云龙县7.55%（16/212）、耿马县1.85%（1/54）和腾冲市1.58%（12/758）。4.蜱虫检测结果:在1003只蜱虫中检出巴贝虫58份,阳性率为5.78%。分别从4种蜱中检出:粒形硬蜱（Ixodes granulatus）、卵形硬蜱（Ixodes ovatus）、微小扇头蜱（Rhipicephalus microplus）和猛突血蜱（Haemaphysalis montgomeryi）,阳性率依次为17.31%（9/52）、8.46%（17/201）、6.64%（30/452）和0.81%（1/123）。4个县（市）均有检出,阳性率分别为耿马县9.63%（18/187）、云龙县6.30%（8/127）、剑川县4.93%（14/284）和腾冲市4.44%（18/405）。5.人群检测结果:在1373份特定人群血液样本中检出巴贝虫28份,阳性率为2.04%,均为贫血患者。28例阳性者中外周血涂片染色镜检,21例观察到疑似巴贝虫感染的红细胞。结论:1.云南省云岭山脉西南部地区的宿主动物、传播媒介蜱和特定人群中存在巴贝虫感染。2.调查区域巴贝虫的宿主动物和媒介蜱种类复杂多样。分别在牛、羊、7种小型兽类、4个蜱种中检出巴贝虫,其中川西白腹鼠（Niviventer excelsior）和印度长尾鼩鼱（Soriculus leucops）中检出巴贝虫为首次报道。粒形硬蜱、微小扇头蜱和猛突血蜱中检测出田鼠巴贝虫,之前也未见报道。3.调查区域检出的巴贝虫具有较高的多样性特征。共检出8种巴贝虫,与人类疾病相关的有田鼠巴贝虫（Babesia microti）、猎户巴贝虫（Babesia venatorum）和双芽巴贝虫（Babesia bigemina）。在宿主动物中检测到的田鼠巴贝虫为Otsu型、媒介蜱中检测到的为Kobe型。在贫血患者中检测到田鼠巴贝虫Otsu型和猎户巴贝虫天竺株（Babesia venatorum Tianzhu strain）。4.云南省腾冲市可能为巴贝虫病的自然疫源地。该地区宿主动物、媒介蜱和特定人群中检测出的田鼠巴贝虫18S rRNA基因序列相似度达94.4%～99.7%,遗传进化分析具有共同的祖先,表明该地区可能存在宿主、媒介和人群间病原体的传播链。本研究采用分子流行病学调查的方法,证实云南省云岭山脉西南部地区巴贝虫的宿主动物和传播媒介蜱种类多、分布广,巴贝虫虫种具有多样性较高的特征,且证实特定人群中存在巴贝虫感染。由于本课题时间有限,病原体的特征和人群感染情况等工作仍在进行中。本结果为云南省云岭山脉西南部地区巴贝虫病自然疫源地的确定奠定了前期研究基础。
王帆,江佳富,田杰,杜春红[2]（2021）在《人巴贝虫病的临床特征及诊疗研究进展》文中研究指明巴贝虫病是一种重要的蜱传人兽共患血液寄生虫病,在全球分布较广泛。对人致病的巴贝虫主要有田鼠巴贝虫、分歧巴贝虫、猎户巴贝虫和邓肯巴贝虫等12种。巴贝虫感染人体后主要临床症状为发热、头痛、寒战、肌痛和疲劳等,严重时可致死。巴贝虫病主要通过实验室检测结合临床特征、流行病学调查进行诊断,诊断技术主要包括血涂片镜检、血清学检测和分子生物学检测。目前,巴贝虫病常采用阿奇霉素与阿托伐醌联用或克林霉素与奎宁联用进行治疗。本文对不同巴贝虫虫种感染人体后的临床特征、巴贝虫病诊断技术和诊断标准,以及国内外常用治疗方法进行综述。
黄艳丽[3]（2013）在《Babesia microti截短性分泌抗原表达及两种蜱传病流行病学调查》文中指出蜱是人和动物多种病原的传播媒介，可传播包括田鼠巴贝斯虫病和播莱姆病螺旋体等多种细菌及原虫。近年来蜱传病不断扩散，该病不仅给养殖业带来了重大的经济损失，同时也危害到人类的健康。本研究选取田鼠巴贝斯虫分泌抗原1（Babesiamicroti secreted antigen1， BmSA1）的重组截短型分泌蛋白作为诊断抗原，建立了田鼠巴贝斯虫ELISA诊断方法。对其流行病学调查具有重要意义。通过生物信息学分析，选取BmSA1全长基因序列第72bp-762bp区段作为目的片段，即N-末端信号肽之后，C-末端跨膜区之前的228个氨基酸所编码基因片段，连接到pGEX-4T-1表达载体上，构建重组质粒。进行原核表达，成功得到高效表达的重组抗原。用GST-Bind纯化树脂纯化此重组抗原，用其作为诊断抗原。发现该抗原可检测早期感染（5d）和长期感染（55d）以后的样本，表明该抗原对不同时期感染的宿主均具有诊断价值，为田鼠巴贝斯虫早期诊断提供了一种敏感特异的方法。为了进一步对两种蜱传病进行血清学调查，本研究以重组GST-tBmSA1蛋白和莱姆病螺旋体鞭毛平截性蛋白（GST-tFlaA）作为诊断抗原，分别对河南省、广西省、青海省、上海市、浙江富阳市、南京市等6个地区的牛、羊、猪、犬、野鼠、鼠兔的2641份血清样品进行ELISA检测。结果表明，田鼠巴贝斯虫病以猪的感染率最高，为15.0%，其次是犬（感染率为12.22%），再次是野鼠（感染率为10.67%），其他动物感染率均低于6%。莱姆病以犬的感染率最高，为7.48%，其次是羊（感染率5.99%），再次是猪（感染率5.2%），其他动物感染率低于5%，鼠和鼠兔的感染率最低，为0。此研究不仅建立了田鼠巴贝斯虫的敏感高效的ELISA检测方法，而且对中国不同地区的多种动物的两种蜱传病进行了血清学调查，研究结果为蜱传病的流行现状和进一步有效防控提供了理论依据，在兽医和公共卫生学方面都具有重要意义。
袁江玲[4]（2008）在《牛巴贝斯虫新疆株MSA-2c基因的克隆表达及其重组蛋白的抗原性研究》文中认为巴贝斯虫病（babesiosis）原被称焦虫病或血孢子虫病,是蜱传播的一类人畜共患血液原虫病的总称。而牛巴贝斯虫病（bovine babesiosis）是世界各国公认的危害养牛业最重要的寄生虫病之一。2003年,Wilkowsky等人发现牛巴贝斯虫MSA-2c蛋白含有高度的免疫源性和保守性的B细胞表型,可诱发牛产生敏感的中和抗体。这些研究提示MSA-2c蛋白可作为牛巴贝斯虫病检测的一种稳定的诊断工具,也可作为预防牛巴贝斯虫病基因工程亚单位疫苗的候选者。因此,研究MSA-2c基因及其编码蛋白已成为诊断和预防牛巴贝斯虫病的一个焦点。本研究工作主要包括以下三部分:1牛巴贝斯虫MSA-2c基因的克隆及序列分析利用GenBank中发表的牛巴贝斯虫MSA-2c基因序列,设计特异引物,以发病牛的全血基因组作为模板,通过PCR扩增方法,获得新疆牛巴贝斯虫MSA-2c基因,测序结果显示,序列全长为798bp,为一个完整的开放阅读框,由核酸序列推演出蛋白质分子量为29kDa,含267个氨基酸残基。核酸序列及蛋白序列同源性分析,新疆牛巴贝斯虫MSA-2c基因与国际标准株相比有一个碱基的突变,蛋白质序列未发生变化。证明本研究在国内首次成功克隆了牛巴贝斯虫疫苗候选基因MSA-2c基因。2牛巴贝斯虫MSA-2c基因的原核表达、重组蛋白的纯化及免疫反应性研究构建了重组原核表达载体pGEX-4T2/MSA-2c,用CaCl2法转化大肠杆菌,获得多拷贝重组菌株,经IPTG诱导表达,谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B （Glutathione Sepharose 4B）纯化后,SDS-PAGE和Western-Blot分析结果表明,诱导表达的pGEX-4T2/MSA-2c阳性菌株表达出大小为55kDa,具有反应活性的重组蛋白。ELISA试验显示,重组蛋白免疫的试验小鼠抗体效价可达1:220,000以上,证明MSA-2c基因的重组蛋白可作为牛巴贝斯虫病检测的一种稳定的诊断工具,也可作为预防牛巴贝斯虫病基因工程亚单位疫苗的候选者。3牛巴贝斯虫MSA-2c基因的真核瞬时表达、重组质粒的纯化及免疫反应性研究重组质粒pCDNA3.1+/MSA-2c尾静脉注射试验用小白鼠,利用小鼠体细胞进行真核表达后,取其肝脏提取总RNA,RT-PCR结果显示,重组质粒pCDNA3.1+/MSA-2c能在小鼠体内瞬时表达。肌肉注射重组质粒4次后,取阳性血清作为抗体,纯化的GST融合蛋白作为抗原进行Western-Blot检测,可得到目的条带,ELISA试验显示,重组质粒免疫的试验小鼠抗体效价可达1:100,000以上,证明重组质粒作为核酸疫苗免疫动物具免疫反应性。
闫卫华,秦彩玲,梁忠民,张笃印,石冬梅,肖尚修,澹台永丰,张新光[5]（2000）在《16例牛双芽巴贝西虫病诊疗报告》文中研究表明
二、16例牛双芽巴贝西虫病诊疗报告（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、16例牛双芽巴贝西虫病诊疗报告（论文提纲范文）
（1）云岭山脉西南部地区巴贝虫病调查与流行特征研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 宿主动物感染巴贝虫情况调查 |
| 1.1 材料和方法 |
| 1.1.1 实验材料、仪器设备和试剂 |
| 1.1.2 实验方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 小型兽类检测结果与分析 |
| 1.2.2 家畜检测结果与分析 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 小型兽类感染巴贝虫的讨论 |
| 1.3.2 家畜感染巴贝虫的讨论 |
| 第二章 蜱感染巴贝虫情况调查 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 实验材料、仪器设备和试剂 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 不同地区不同蜱种巴贝虫检测结果 |
| 2.2.2 不同蜱种感染巴贝虫情况 |
| 2.2.3 序列比对及系统进化发育分析 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 人群感染巴贝虫情况调查 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 实验材料、仪器设备和试剂 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 巴贝虫检测结果 |
| 3.2.2 形态学检测 |
| 3.2.3 序列分析和同源性比较 |
| 3.2.4 同一地区宿主和媒介感染巴贝虫结果分析 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 人巴贝虫病的临床特征及诊疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 |
（3）Babesia microti截短性分泌抗原表达及两种蜱传病流行病学调查（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语表 |
| 目录 |
| 第一章 巴贝斯虫病的现状及研究进展 |
| 1.1 病原形态学 |
| 1.2 巴贝斯虫的生活史 |
| 1.3 流行病学 |
| 1.3.1 人巴贝斯虫病 |
| 1.3.2 欧洲巴贝斯虫的流行病学 |
| 1.3.3 美国巴贝斯虫的流行病学 |
| 1.3.4 中国巴贝斯虫的流行病学 |
| 1.4 诊断 |
| 1.4.1 血涂片染色镜检查病原体 |
| 1.4.2 动物接种法检测病原体 |
| 1.4.3 分子生物学诊断试验 |
| 1.4.4 血清学试验 |
| 1.5 防治 |
| 第二章 莱姆病的现状及研究进展 |
| 2.1 病原学 |
| 2.2 临床表现 |
| 2.3 流行病学 |
| 2.3.1 欧洲莱姆病的流行病学 |
| 2.3.2 美国莱姆病的流行病学 |
| 2.3.3 中国的莱姆病的流行病学 |
| 2.4 诊断 |
| 2.4.1 病原学方法 |
| 2.4.2 分子生物学方法 |
| 2.4.3 血清学方法 |
| 2.5 防治 |
| 第三章 田鼠巴贝斯虫截短型分泌抗原的重组表达及其在诊断上的应用 |
| 1 材料 |
| 1.1 试剂 |
| 1.2 仪器 |
| 1.3 菌种质粒 |
| 1.4 血清样本 |
| 1.5 引物 |
| 2 方法 |
| 2.1 PCR 反应体系及反应条件 |
| 2.2 含 BmSA1 全长基因的克隆测序 |
| 2.3 重组质粒 pGEX-4T-1/ BmSA1 的构建 |
| 2.4 重组质粒 pGEX-4T-1/ tBmSA1 的鉴定 |
| 2.5 重组蛋白的表达及形式分析 |
| 2.6 蛋白纯化及定量 |
| 2.7 重组抗原抗血清的制备及免疫印迹法试验 |
| 2.8 重组抗原的特异性分析 |
| 2.9 重组抗原 ELISA 检测方法的敏感性分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 田鼠巴贝斯虫 tBmSA1 基因及编码蛋白的生物信息学分析 |
| 3.2 田鼠巴贝斯虫 tBmSA1 截短型基因的克隆和表达 |
| 3.3 Western Blotting 检测重组蛋白 |
| 3.4 重组抗原的特异性结果 |
| 3.5 重组抗原 ELISA 方法的敏感性结果 |
| 4 讨论 |
| 第四章 田鼠巴贝斯虫病和莱姆病的流行病学调查 |
| 1 材料 |
| 1.1 试剂 |
| 1.2 仪器 |
| 1.3 重组抗原 |
| 1.4 阳性血清和阴性血清 |
| 1.5 二抗 |
| 1.6 田间血清样品 |
| 2 方法 |
| 2.1 酶联免疫吸附试验（间接 ELISA） |
| 2.2 ELISA 结果判定标准 |
| 3 流行病学调查结果 |
| 3.1 田鼠巴贝斯虫病和莱姆病螺旋体总体自然感染情况 |
| 3.1.1 牛感染田鼠巴贝斯虫和莱姆病螺旋体的结果 |
| 3.1.2 猪田鼠巴贝斯虫和莱姆病螺旋体的结果 |
| 3.1.3 羊感染田鼠巴贝斯虫和莱姆病螺旋体的结果 |
| 3.1.4 犬感染田鼠巴贝斯虫和莱姆病螺旋体的结果 |
| 3.1.5 鼠感染田鼠巴贝斯虫和莱姆病螺旋体的结果 |
| 3.1.6 鼠兔感染田鼠巴贝斯虫和莱姆病螺旋体的结果 |
| 3.2 同一地区不同动物感染两种病原的情况 |
| 3.2.1 广西地区水牛、山羊、犬、野鼠两种病原的感染情况 |
| 3.2.2 上海市松江奶牛、松江山羊、猪、犬对两种病原的感染情况 |
| 3.2.3 青海省龙门乡三社绵羊、天山羊场绵羊、青海鼠兔对两种病原的感染情况 |
| 3.3 田鼠巴贝斯虫病和莱姆病的混合感染情况 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 导师简介 |
（4）牛巴贝斯虫新疆株MSA-2c基因的克隆表达及其重组蛋白的抗原性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1 研究背景 |
| 1.1 病原体 |
| 1.2 流行病学研究 |
| 1.3 临床症状 |
| 1.4 病理变化 |
| 1.5 病原的体外培养 |
| 2 研究目的及意义 |
| 3 巴贝斯虫研究进展 |
| 3.1 巴贝斯虫致病的机理 |
| 3.2 抗巴贝斯虫感染的免疫机制 |
| 3.3 巴贝斯虫病的诊断 |
| 3.4 巴贝斯虫基因工程疫苗研制方面的研究 |
| 3.5 MSA-2C 基因的研究 |
| 第二章 牛巴贝斯虫裂殖子表面抗原MSA-2C 基因的克隆与序列分析 |
| 1 材料和主要试剂 |
| 1.1 菌种和载体 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 培养基和溶液 |
| 1.4 病料 |
| 2 方法 |
| 2.1 MSA-2C 基因的克隆 |
| 2.2 MSA-2c 基因片段亚克隆载体的构建及序列分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 PCR 扩增结果 |
| 3.2 PCR 扩增片段的克隆及酶切鉴定 |
| 3.3 测序结果 |
| 3.4 测序结果同源性比较 |
| 4 讨论 |
| 第三章 新疆牛巴贝斯虫MSA-2c 基因的原核表达与重组蛋白的纯化及免疫反应性研究 |
| 1 材料和主要试剂 |
| 1.1 菌种和载体 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 培养基和溶液 |
| 1.4 试验动物 |
| 2 方法 |
| 2.1 MSA-2c 基因原核表达载体的构建 |
| 2.2 MSA-2c 基因在原核细胞中的诱导表达及表达形式的确立 |
| 2.3 GST-MSA-2c 融合蛋白的纯化 |
| 2.4 ELISA 法检测GST-MSA-2c 融合蛋白的敏感性 |
| 2.5 GST-MSA-2c 融合蛋白抗血清的获取 |
| 2.6 ELISA 法测定抗体水平变化及效价 |
| 2.7 GST-MSA-2c 融合蛋白的免疫活性分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 MSA-2c 基因在原核表达载体的构建 |
| 3.2 GST-MSA-2c 融合蛋白的诱导表达及表达形式的确定 |
| 3.3 GST-MSA-2c 融合蛋白抗血清效价评估结果 |
| 3.4 蛋白定量结果 |
| 3.5 Western blot 检测结果 |
| 4 讨论 |
| 第四章 新疆牛巴贝斯虫MSA-2c 基因的的真核瞬时表达、重组质粒的纯化及免疫反应性研究 |
| 1 材料和主要试剂 |
| 1.1 菌种和载体 |
| 1.2 材料和试剂 |
| 1.3 培养基和溶液 |
| 1.4 试验动物 |
| 2 方法 |
| 2.1 MSA-2c 基因真核表达载体的构建 |
| 2.2 重组质粒的大量提取及纯化 |
| 2.3 pCDNA3.1+-MSA-2c 重组质粒在小白鼠体内的瞬时表达 |
| 2.4 pCDNA3.1+-MSA-2c 重组质粒抗血清的制备及抗体效价评估 |
| 2.5 Western-blot 检测 |
| 3 结果 |
| 3.1 真核表达载体的构建 |
| 3.2 RT-PCR 结果 |
| 3.3 MSA-2c 鼠源抗体效价评估 |
| 3.4 Western-blot 检测结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 附录I 常用试剂及配制 |
| 附录II 仪器设备 |
| 附录III 常用缩略语中英文对照表 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
四、16例牛双芽巴贝西虫病诊疗报告（论文参考文献）
- [1]云岭山脉西南部地区巴贝虫病调查与流行特征研究[D]. 王帆. 大理大学, 2021(09)
- [2]人巴贝虫病的临床特征及诊疗研究进展[J]. 王帆,江佳富,田杰,杜春红. 中国血吸虫病防治杂志, 2021(02)
- [3]Babesia microti截短性分泌抗原表达及两种蜱传病流行病学调查[D]. 黄艳丽. 甘肃农业大学, 2013(05)
- [4]牛巴贝斯虫新疆株MSA-2c基因的克隆表达及其重组蛋白的抗原性研究[D]. 袁江玲. 新疆农业大学, 2008(10)
- [5]16例牛双芽巴贝西虫病诊疗报告[J]. 闫卫华,秦彩玲,梁忠民,张笃印,石冬梅,肖尚修,澹台永丰,张新光. 河北畜牧兽医, 2000(01)