问：引物是自己设计好还是从文献里面找好呢？
- 答：可靠的英文文献是可以直接用的，有现成的引物和条件，一般是好用的。这还要结合实验目的，一样的目的可以套用，否则最好自己设计。
- 答：当然是外文文献里的了
问：我之前是自己设计的引物，可是没有扩增出来片段，最后就选择用文献中的引物。
- 答：别人东西可以引用的 但不能让别人认为你是照抄照搬没有创新 引物相同后续后续的不同也可以的
在参考文献中你一定要表明你的那个文献的引用 不然别人就会认为你侵权啦
个人意见。。纯属参考吧 - 答：当然可以用别人引物啦 我一般做real time的引物都是搜文献报道的 这样才有保证 这个不存在侵权问题的
问：文献上看到一种蛋白，有基因序列号，可是上genbank blast一下，只有它自己，怎么设计引物？
- 答：有基因序列号，你就可以直接上genebank下载其序列，下载到全序列，你需要扩增的CDS区，也就是编码区，可以全外显子扩增，这样简单一点，也可以做cDNA克隆，然后再做，前者的话就可以直接根据其基因序列NG号设计引物，如果是做CDNA的话就根据其mRNA的序列NM号设计引物。
问：用别人的pcr引物怎么在论文中说明
- 答：如果你要扩增一个已经报道过其扩增引物的片段，当然是用文献报道的引物来扩增，因为人家报道的都是经过筛选的效果好的引物，一般成功率高。如果是扩增一个没有引物报道的序列，那只能是自己设计了。
问：求常用的植物actin基因序列或引物，山茶科的更好（查了文献没查到），文献里的引物序列用括号括起来是什么
- 答：植物大麦、玉米等actin 714bp
F 5'-CTCGACTCTGGTGATGGTGTG-3’
R 5'TTGGAGAT-3’
括号是简并引物的意思，即合成引物时，该位置会随机添加其中一个：
5‘-CAGATGGC（GT）GA（CT）GGTGAAGA（TC）AT-3’的一个可能是：
5‘-CAGATGGC G GA C GGTGAAGA T AT-3’自己排列组合一下就是。
送引物合成的时候序列如下：
5‘-CAGATGGCKGAYGGTGAAGAYAT-3’ - 答：通常actin基因用于基因表达定量的内参。不同植物的actin序列不同，必须找到同种植物的actin序列做参考；可以在Genbank中查找；也可根据文献查找。其他的持家基因housekeeping基因都可以作为内参基因。引物序列中的括号内的序列为简并碱基，即在括号内的位置，存在两种碱基，如上述括号内的（G/T）。
