一、祛瘀生肌法对实验性大鼠创面肉芽组织中细胞周期的动态影响（论文文献综述）
刘青武[1]（2021）在《回阳生肌汤和鸡血藤对慢性皮肤溃疡愈合过程中MSCs趋化和迁移功能的调节作用研究》文中研究说明背景:慢性皮肤溃疡是糖尿病、放化疗、周围血管病等常见的并发症,是外科常见病及多发病,迁延难愈,愈后常复发。尤其是长期不愈合,呈现疮面清冷,脓液稀薄,疮周紫黯不温的症状,在中医属于阴证疮疡的疮面,治疗难度最大。近年来,以间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells,MSCs）为主的细胞治疗在慢性创面修复中取得较大进展,但植入MSCs修复溃疡的治疗方法,存在细胞来源不稳定、操作复杂、不良反应及费用昂贵等不足,临床使用和推广困难。慢性皮肤溃疡属于中医“疮疡”的范畴,其中慢性皮肤溃疡阴证具有“肾精虚衰”的特点。北京中医医院皮外科奠基人赵炳南教授及其传人王玉章、吕培文教授以益肾填精、活血通络的回阳生肌汤治疗慢性皮肤溃疡阴证安全有效。鸡血藤作为回阳生肌汤活血通络的主要成分,其促进骨髓造血功能的作用受到广泛报道,但鸡血藤用于创面修复的研究较少。干细胞具有中医“肾精”的属性,因此提出回阳生肌汤通过益肾填精、活血通络促进内源性骨髓MSCs的增殖,提升其趋化和迁移能力,达到化生气血、生肌长肉,而促进慢性皮肤溃疡创面愈合的假说。研究将通过体内和体外实验加以验证,探索回阳生肌汤及其主要成分鸡血藤治疗慢性皮肤溃疡阴证的作用和靶点。目的:研究回阳生肌汤及其主要成分鸡血藤促进慢性皮肤溃疡愈合过程中,对MSCs增殖、趋化和迁移功能的调节作用及其机制,为临床中医血管外科防治慢性皮肤溃疡阴证提供实验基础和理论依据。方法:1.回阳生肌汤和鸡血藤水提物入血成分分析:BALB/C小鼠灌胃给药,制备含药血清,采用高效液相色谱串联质谱技术（Ultra-performance liquid chromatography combined with tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS）对回阳生肌汤和鸡血藤水提物的入血成分进行分析;2.体内实验:（1）db/db糖尿病小鼠伤口模型:采用db/db糖尿病小鼠背部正中部位全厚层皮肤打孔的方法制备糖尿病伤口模型,并使用回阳生肌汤干预;采用数码相机拍照记录创面大小,分析创面愈合率;采用苏木精-伊红染色（Hematoxylin-Eosin staining,HE）染色观察创面组织学形态;提取小鼠全骨髓细胞,采用显微镜下计数方法观察骨髓细胞数量;流式细胞术检测骨髓中干细胞标志物CD29、CD44、干细胞表面抗原（Stem cell antigen 1,Sca-1）、CD117阳性细胞比例;免疫荧光染色检测创面中MSCs标志物CD29、CD271阳性细胞数量;炎症因子芯片检测创面中白介素3（Interleukin 3,IL-3）、IL-6、IL-13等炎症因子表达;（2）骨髓抑制大鼠伤口模型:采用尾静脉注射（8mg/kg）的多柔比星联合背部正中部位全厚层皮肤打孔的方法,制备骨髓抑制大鼠伤口模型,并使用回阳生肌汤和鸡血藤水提物进行干预;采用数码相机拍照记录创面大小,分析创面愈合率;称量胸腺及脾脏重量,计算胸腺指数和脾指数;采用血常规检测观察外周血白细胞数量;酶联免疫吸附法（ELISA）检测了大鼠血清中基质细胞衍生因子-1（Stromal cell-derived factor-1,SDF-1）和粒细胞集落刺激因子（Granulocyte-Colony Stimulating Factor,G-CSF）的浓度;HE及Masson染色并观察创面组织学形态和胶原含量;免疫荧光染色检测创面中CD34、CD133阳性细胞数量;流式细胞术检测骨髓及外周血中CD29、CD90、CD34、CD133阳性细胞比例;采用骨髓细胞贴壁培养法提取和纯化各组药物干预后大鼠的BMSCs;EdU染色检测BMSCs的增殖能力;划痕和Transwell试验检测BMSCs的迁移和趋化能力;Western Blot法检测SDF-1和趋化因子受体4（CXC chemokine receptor 4,CXCR4）蛋白的相对表达量。3.体外实验:采用全骨髓细胞贴壁培养法纯化大鼠BMSCs;流式细胞术、成脂和成骨分化鉴定BMSCs;使用H2O2刺激BMSCs制作氧化应激BMSCs模型,并使用回阳生肌汤提取物和鸡血藤水提物干预;采用细胞增殖毒性检测试剂盒-8（Cell Counting Kit-8,CCK-8）检测BMSCs的增殖活力;划痕试验检测BMSCs的迁移能力;Transwell趋化试验检测BMSCs的趋化能力;Western Blot法检测BMSCs中SDF-1和CXCR4蛋白表达水平。结果:1.回阳生肌汤和鸡血藤水提物入血成分分析:（1）对回阳生肌汤的入血成分进行分析,共得到19个化合物,包括黄酮类,萜类,皂苷类及糖类,含量较高者分别为刺芒柄花苷、汉黄芩素、马钱素、（6αR,11αR）-10-羟基-3,9-二甲氧基紫檀烷、16-氧乙酰茯苓酸甲酯、莫诺苷、核黄素、β-谷甾醇、奥刀拉亭-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花黄素、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷,主要来自鸡血藤、牛膝、苍术、山茱萸、黄芪、茯苓;（2）对鸡血藤水提物的入血成分分析,共得到8个化合物,均为黄酮类化合物,含量由高到低分别为芒柄花黄素、阿夫罗摩辛、异甘草素、大豆素、3,7-二羟基-6-甲氧基二氢黄酮醇、密花豆素、樱黄素、卡亚宁。2.体内实验（1）db/db糖尿病小鼠伤口模型:整体药效观察显示,与模型组比较,回阳生肌汤组小鼠创面愈合率升高;在创面中,与模型组相比,创面肉芽组织新生增多,MSCs 标志物 CD29、CD271 阳性细胞数量增多,IL-3、IL-6、IL-15、Fas 配体（Fas ligand,Fas L）表达升高,IL-13、肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α）、细胞间黏附分子-1（Intercellular Cell Adhesion Molecule-1,ICAM-1）、嗜酸性粒细胞趋化因子（Eotaxin）、趋化因子LIX/CXCL5表达降低;在骨髓中,与模型组比较,回阳生肌汤组小鼠骨髓细胞数量增加,骨髓中MSCs标志物CD29、CD44、Sca-1阳性细胞比例升高。（2）骨髓抑制大鼠伤口模型:整体药效观察显示,与模型组比较,回阳生肌汤组和鸡血藤水提物可提高模型大鼠的创面愈合率,升高胸腺指数和脾指数;在创面中,与模型组比较,可见回阳生肌汤组和鸡血藤水提物组大鼠中创面炎性细胞数量减少,胶原合成增加,干细胞标志物CD34、CD133阳性细胞数量增多;在骨髓中,CD29、CD90、CD34、CD133阳性细胞比例增加;在外周血中,与模型组比较,回阳生肌汤和鸡血藤水提物组血清中SDF-1和G-CSF的浓度升高,白细胞数量增加,CD29、CD90、CD34、CD133阳性细胞比例增多;分离提取药物干预后的原代大鼠BMSCs,与模型组比较,可见回阳生肌汤和鸡血藤水提物组BMSCs增殖细胞数量增加,迁移能力和趋化能力增强,SDF-1和CXCR4蛋白表达增多。3.体外实验:大鼠BMSCs细胞呈梭形,呈旋涡状、席纹状排列,折光性良好;第三代细胞MSCs标志物CD29、CD44阳性细胞比例分别99.9%和97.8%,造血干细胞表面标志物CD45表达率为0.47%。氧化应激状态下的原代大鼠BMSCs的增殖活力降低,趋化和迁移能力下降;与模型组比较,回阳生肌汤和鸡血藤水提物组BMSCs增殖活力升高,迁移和趋化能力增强,SDF-1和CXCR4蛋白表达升高。结论:1.回阳生肌汤和鸡血藤入血成分主要为黄酮类化合物,提示黄酮类化合物在回阳生肌汤和鸡血藤的药效中发挥了重要作用;2.回阳生肌汤干预db/db糖尿病小鼠伤口模型,能够加速创面愈合,并促进小鼠骨髓BMSCs的增殖,增加创面干细胞的数量,调控创面的炎症反应,促进肉芽组织新生;3.回阳生肌汤和鸡血藤水提物干预骨髓抑制大鼠伤口模型,能够促进大鼠血清SDF-1和G-CSF的分泌,且激活模型大鼠BMSCs SDF-1/CXCR4信号轴,促进骨髓干细胞的增殖、迁移和趋化能力,并动员干细胞进入外周血中,增加创面干细胞的数量,促进胶原合成,加速创面的修复;4.回阳生肌汤和鸡血藤水提物在体外作用于大鼠BMSCs,能够激活SDF-1/CXCR4信号轴,保护氧化损伤的BMSCs的活性,提升氧化损伤状态下BMSCs的迁移和趋化能力。
黄俊[2]（2020）在《为探索回阳、养阴生肌机制搭建急慢性创面LncRNA的CNC图》文中提出目的:研究急慢性创面特异表达Lnc RNA与m RNA基因功能之间调控网络,为探索回阳、养阴生肌的机制提供理论基础。方法:用基因芯片技术对慢性难愈合创面和急性创面组织的RNA总量进行提取,再挑选出2倍差异及P<0.05Lnc RNA及m RNA进行差异表达分析,得到基因表达谱。将基因表达谱中的m RNAs进行KEGG通路分析,可以发现其中下调及上调最明显的通路,再分别对最明显的通路进行其Pathway Map展示,从而可以明显得到显着m RNA指标,将这些显着m RNA指标进行q-PCR验证,得到有意义的阳性指标后与差异Lnc RNA交集得出Lnc RNA-m RNA共表达网络,并基于Lnc RNA-m RNA共表达网络挑选出不同Lnc RNA进行功能验证。结果:检测差异分析后的基因表达谱,发现上调差异有502个,下调差异有1204个;m RNA分析发现上调差异621个,下调差异505个,KEGG通路分析发现上调和下调的通路均有10条;通过分别对上调、下调最明显的通路进行Pathway Map展示,挑选出显着m RNA指标8个:BMP2、IFNB1、IL6、IL18、PIK3CB、SMAD7、SMAD9、β-actin,分别将其进行q-PCR验证,得到有意义的阳性指标个5个:BMP2、IL6、IL18、PIK3CB、SMAD7,将这5个阳性指标和差异Lnc RNA交集得出Lnc RNA-m RNA共表达网络,并基于Lnc RNA-m RNA共表达网络挑选出不同Lnc RNA进行功能验证。结论:基于Lnc RNA-m RNA共表达网络挑选出的20个Lnc RNA,其在各个领域当中均有不同程度的报道,为后续的功能和机制研究提供了方向和重点,为探索回阳、养阴生肌的机制提供理论基础,为中医药加速慢性难愈合创面愈合的研究提供了新的思路。
李心甜[3]（2020）在《糖尿病肛漏应用美洲大蠊提取液的lncRNA高通量测序》文中研究说明目的:研究美洲大蠊提取液在促愈糖尿病肛漏创面中特异表达Lnc RNA与m RNA。方法:用高通量测序技术筛选糖尿病肛漏创面应用美洲大蠊提取液差异性表达的lnc RNAs和m RNAs。对差异表达的m RNAs及lnc RNAs进行GO分析和KEGG通路分析,挑选出显着表达的m RNAs及lnc RNAs。结果:筛选到具有显着差异的m RNA13186个（上调差异5162个,下调差异有8024个）,具有显着差异的lnc RNA2242个（上调差异有649个,下调差异有1593个）。对初步筛选的Lnc RNA进行分析,绘制出韦恩图取其交集1413个Lnc RNA作为最终预测的Lnc RNA。通过对靶标基因的初步预测,我们挑选出8个与本研究相关的lnc RNA。对差异表达的m RNAs及lnc RNAs进行GO分析,上调的m RNAs的GO功能主要富集在免疫系统过程、细胞活化、细胞过程调控、白细胞活化等;下调的m RNAs的GO功能主要富集在表皮发育、皮肤发育、组织发育、表皮细胞分化等。差异表达的lnc RNA-cis的GO功能主要富集在表皮细胞分化、上皮细胞分化、细胞代谢过程的调节、角质形成细胞等;差异表达的lnc RNA-trans的GO功能主要富集在细胞代谢过程、蛋白质结合等。对差异表达的m RNAs及lnc RNAs进行KEGG通路分析,筛选出与本研究相关的6条通路:m RNAs上调通路中的TNF signaling pathway、Chemokine signaling pathway、NF-kappa B signaling pathway,lnc RNA-cis通路中的Inflammatiory bowel disease（IBD）以及lnc RNA-trans通路中MAPK signaling pathway、AMPK signaling pathway。结论:研究发现lnc RNAs在促进创面修复中扮演重要的生物角色,得出8个可能影响美洲大蠊提取液促进糖尿病肛漏创面愈合的lnc RNA,并得出美洲大蠊提取液可能通过影响表皮及上皮细胞分化、细胞凋亡与生长、蛋白质的结合等功能从而促进创面愈合,筛选出6条可能与本课题研究相关的KEGG通路。
仇莲胤[4]（2019）在《黄芪注射液介导Wnt/β-Catenin信号通路调控表皮干细胞增殖分化促进糖尿病溃疡愈合的机制研究》文中进行了进一步梳理目的:观察黄芪注射液对糖尿病溃疡创面的治疗效果,探讨其促进糖尿病溃疡创面愈合的作用机制。方法:将192只大鼠除正常对照组外,其余大鼠腹腔注射链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）建立糖尿病模型（diabetes mellitus,DM）,随机分为糖尿病模型组、表皮生长因子组、黄芪注射液小剂量组、黄芪注射液中剂量组及黄芪注射液大剂量组。8周以后在大鼠背部作以深达深肌膜、直径为20mm的全层皮肤缺损开放性创面,即糖尿病溃疡模型（diabetic ulcer,DU）。于创面造模后第2天开始药物干预,观察创面愈合率、创面愈合时间;在创面愈合过程中（造模后的第7天、第14天、第21天）,切取创面内及创周皮肤组织,采用HE染色观察创面组织形态结构的变化;应用免疫组化观察β1整合素、K19、PCNA的水平变化;运用Western Blot、Real Time-q PCR等相关技术,分别从m RNA和蛋白水平,观察Wnt1、Wnt3a、β-catenin、GSK3β、Cmyc、Cyclin D1的表达变化,以细胞信号转导通路及表皮干细胞角度,围绕“上皮化-Wnt/β-Catenin信号转导通路-创面修复”重要病理机制,探讨黄芪注射液促进糖尿病性溃疡愈合的作用机制。结果:1、动物糖尿病造模情况:糖尿病模型组大鼠注射STZ之后,体重、血糖较正常对照组有明显差异（P<0.05）。2、创面愈合率、创面愈合时间比较:DU组创面造模后第3、7、14、21天,创面愈合率均明显低于正常创面组（P<0.01）;创面造模后第14、21天,黄芪注射液大剂量组创面愈合率高于DU组（P<0.01）。DU组与正常创面组比较,创面愈合时间明显延长（P<0.01）;各药物干预组中,黄芪注射液大剂量组创面愈合时间少于DU组（P<0.05）。3、创面组织免疫组化结果显示:在创面造模后第7、14、21天,DU组创面组织K19、β1整合素、PCNA的表达均明显低于正常创面组（P<0.01）;在这三个时间点,黄芪注射液大剂量组、表皮生长因子组创面组织K19、β1整合素、PCNA的表达均高于DU组（P<0.01）,黄芪注射液大、中剂量组K19、β1整合素、PCNA表达高于黄芪注射液小剂量组（P<0.05）。4、创面组织Western Blot结果:在创面造模后第7、14、21天,DU组创面组织β-catenin、C-myc、Cyclin D1蛋白的表达均明显低于正常创面组（P<0.01）,DU组β-catenin核内表达低于正常创面组（P<0.01）,DU组GSK-3β的表达高于正常创面组（P<0.05）。在这三个时间点,各药物干预组与DU组相比,表皮生长因子组、黄芪注射液大、中剂量创面组织β-catenin、β-catenin核内、C-myc的表达均高于DU组（P<0.05）;在GSK-3β的表达上,创面造模后第7、14天,表皮生长因子组、黄芪注射液大剂量组均低于DU组（P<0.05）。创面造模后第7、14、21天,黄芪注射液大剂量组β-catenin、β-catenin核内蛋白的表达均高于小剂量组（P<0.01）,创面造模后第14、21天,GSK-3β的表达明显低于黄芪注射液小剂量组（P<0.01）。5、创面组织Real Time-q PCR结果显示:在创面造模后第7、14、21天,DU组创面组织β-Catenin m RNA表达明显低于正常创面组（P<0.01）,GSK3βm RNA的表达高于正常创面组（P<0.01）;这三个时间点,各药物干预组与DU组相比,表皮生长因子组、黄芪注射液大剂量组创面组织β-Catenin m RNA表达高于DU组（P<0.05）,且GSK3βm RNA的表达低于DU组（P<0.05）;在创面造模后第7、14天,黄芪注射液大剂量组β-Catenin m RNA表达高于黄芪小剂量组（P<0.05）,而同时GSK3βm RNA表达低于黄芪小剂量组（P<0.05）。对于创面组织Wnt1、wnt3a m RNA的表达上,在创面造模后第7、14、21天,DU组表达均明显低于正常创面组（P<0.01）;各药物干预组与DU组相比,黄芪注射液大剂量组、表皮生长因子组Wnt1 m RNA、Wnt3a m RNA的表达均高于DU组（P<0.05）;创面造模后第14、21天,黄芪注射液大剂量组Wnt3a m RNA的表达高于黄芪小剂量组（P<0.01）。结论:1.黄芪注射液能提高糖尿病溃疡的创面愈合率,缩短创面愈合时间,有效促进糖尿病溃疡的愈合,且存在着一定的量效关系。2.黄芪注射液可能与Wnt/β-catenin信号通路活化有关,通过上调Wnt1、Wnt3a、β-catenin的表达,启动通路下游靶基因C-myc、Cyclin D1的转录,提高C-myc、Cyclin D1的表达而起到调节Wnt/β-catenin信号通路的作用,促进创面肉芽组织增生,促进表皮干细胞的增殖分化,加快创面上皮化的进程,从而促进糖尿病溃疡的愈合。
孔令臻[5]（2019）在《补益气血中药对体外培养人皮肤成纤维细胞增殖及生长因子表达的影响》文中进行了进一步梳理慢性皮肤溃疡是一种常见的外科疾病,病程长,影响患者生活质量,给社会带来沉重负担。中医治疗皮肤溃疡的传统方法是祛腐生肌法,面对腐祛肌不生的临床难题,唐汉钧教授创新性地提出了祛瘀生肌和补虚生肌治疗大法,临床疗效显着。补益气血法是补虚生肌的重要方法。气能生血,血能养气,气血外达肌肤对其进行濡养和温煦。创面愈合与人身气血关系密切。西医认为创面愈合是一个连续、复杂、协调的过程,肉芽组织的形成是创面修复愈合的关键。肉芽组织主要由大量成纤维细胞和毛细血管构成。成纤维细胞的增殖以及成纤维分泌的生长因子EGF、TGF-β、VEGF是创面修复过程中的关键因素。前期动物实验发现补益气血中药可上调大鼠创面血管内皮生长因子的合成和分泌,加速创面微毛细血管新生,加速创面肉芽组织生长,从而促进大鼠创面愈合。根据中医“气血”理论和前期动物实验研究基础,本实验研究补益气血中药对体外培养人皮肤成纤维细胞增殖及合成分泌生长因子EGF、TGF-β、VEGF的影响。进一步探索中医药促进创面愈合的作用机制,充实中医药促进创面愈合的基础研究内容,并为慢性皮肤溃疡内治药物研究奠定基础。研究目的:本实验拟在中医“气血”理论和前期动物实验研究基础之上,进一步观察补益气血中药（四君子汤、四物汤、八珍汤）对人皮肤成纤维细胞细胞周期、细胞增殖的影响,对人皮肤成纤维细胞合成分泌生长因子EGF、TGF-β、VEGF的影响,对人皮肤成纤维细胞EGF mRNA、TGF-βmRNA、VEGF mRNA表达的影响。研究方法:将人皮肤成纤维细胞进行复苏、传代、培养。选用第4～6代细胞在四君子汤、四物汤、八珍汤培养环境下,在不同时间点采用Cell Counting Kit-8（CCK8）法测定补益气血中药对人皮肤成纤维细胞增殖的影响;采用流式细胞仪（FCM）检测补益气血中药对人皮肤成纤维细胞增殖周期的影响;采用免疫印迹分析法（Wb）检测补益气血中药对人皮肤成纤维细胞合成分泌EGF、TGF-β1、VEGFA的影响;采用定量实时聚合酶链锁反应法（RT-PCR）测定补益气血中药对人皮肤成纤维细胞EGF mRNA、TGF-βmRNA、VEGF mRNA的影响。结果:1.四君子汤（10ug/L～1g/L）干预人皮肤成纤维细胞24h,与对照组相比较,四君子汤（10mg/L、100mg/L）能促进细胞增殖,细胞生长数量有差异（P<0.05）,且四君子汤（100mg/L）促进细胞增殖更明显（P<0.01）。四君子汤（10ug/L～1g/L）干预人皮肤成纤维细胞48h,与对照组相比较,细胞生长数量差异不明显（P>0.05）。四物汤（10ug/L～1g/L）干预人皮肤成纤维细胞24h,与对照组相比较,四物汤（10ug/L～1g/L）能促进细胞增殖,细胞生长数量有差异（P<0.05）,且四物汤（1mg/L～100mg/L）促进细胞增殖更明显（P<0.01）。四物汤（10ug/L～1g/L）干预人皮肤成纤维细胞48h,与对照组相比较,四物汤（1g/L）能促进细胞增殖,细胞生长数量有差异（P<0.05）,四物汤（10ug/L～100mg/L）促细胞生长数量无明显差异（P>0.05）。八珍汤（10ug/L～1g/L）干预人皮肤成纤维细胞24h,与对照组相比较,八珍汤（10ug/L～1g/L）能促进细胞增殖,细胞生长数量有差异（P<0.05）,且八珍汤（1mg/L～1g/L）促进细胞增殖更明显（P<0.01）。八珍汤（10ug/L～1g/L）干预人皮肤成纤维细胞48h,与对照组相比较,细胞生长数量无明显差异（P>0.05）。2.与对照组相比较,四君子汤组、四物汤组、八珍汤组人皮肤成纤维细胞G0/G1期比例降低,细胞增殖指数PI增高,差异明显（P<0.01）;四君子汤组、四物汤组、八珍汤组人皮肤成纤维细胞S期比例升高,差异明显（P<0.01）。与四君子汤组相比较,四物汤组人皮肤成纤维细胞G0/G1期比例降低,细胞增殖指数PI增高,差异明显（P<0.05）,人皮肤成纤维细胞S期比例降低差异不明显（P>0.05）,八珍汤组人皮肤成纤维细胞G0/G1期比例降低明显（P<0.01）,人皮肤成纤维细胞S期比例降低明显（P<0.01）。与四物汤组相比较,八珍汤组人皮肤成纤维细胞G0/G1期比例降低,细胞增殖指数PI增高,差异明显（P<0.01）,同时八珍汤组人皮肤成纤维细胞S期比例明显升高（P<0.01）。3.与对照组相比较,四君子汤组、四物汤组、八珍汤组EGF的表达明显增加（P<0.01）。与四君子汤组相比较,四物汤组EGF的表达降低（P<0.05）,八珍汤组EGF的表达明显降低（P<0.01）。与四物汤组相比较,八珍汤组EGF的表达降低（P<0.05）。与对照组相比较,四君子汤组、四物汤组、八珍汤组TGF-β1的表达明显増高（P<0.01）。与四君子汤组相比较,四物汤组TGF-β1的表达差异不明显（P>0.05）,八珍汤组TGF-β1的表达增高（P<0.05）。与四物汤组相比较,八珍汤组TGF-β1的表达增高（P<0.05）。与对照组相比较,四君子汤组、八珍汤组VEGFA的表达增高（P<0.05）,四物汤组VEGFA的表达明显增高（P<0.01）。与四君子汤组相比较,四物汤组、八珍汤组VEGFA的表达差异不明显（P>0.05）。与四物汤组相比较,八珍汤组VEGFA的表达差异不明显（P>0.05）。与对照组相比较,八珍汤（100mg/L）组EGF的表达增高（P<0.05）,八珍汤（10mg/L）组EGF表达增高并不明显（P>0.05）,八珍汤（1g/L）组EGF表达降低（P<0.05）。与对照组相比较,八珍汤（100mg/L）组TGF-β1的表达明显增高（P<0.01）,八珍汤（10mg/L）组TGF-β1的表达增高并不明显（P>0.05）,八珍汤（1g/L）组TGF-β1表达降低（P<0.05）。与对照组相比较,八珍汤（10mg/L）组VEGFA的表达增高（P<0.05）,八珍汤（100mg/L）组VEGFA的表达明显增高（P<0.01）,八珍汤（1g/L）组VEGFA的表达降低,但降低并不明显（P>0.05）。4.与对照组相比较,四君子汤组、四物汤组EGFmRNA表达量明显增高（P<0.01）,八珍汤组EGF mRNA表达量增高（P<0.05）。与四君子汤组相比较,四物汤组、八珍汤组EGFmRNA表达量明显降低（P<0.01）。与四物汤组相比较,八珍汤组EGF mRNA表达量明显降低（P<0.01）。与对照组相比较,四君子汤组、四物汤组、八珍汤组TGF-βmRNA表达量明显增高（P<0.01）。与四君子汤组相比较,四物汤组TGF-βmRNA表达量增高不明显（P>0.05）,八珍汤组TGF-βmRNA表达量明显增高（P<0.01）。与四物汤组相比较,八珍汤组TGF-βmRNA表达量明显增高（P<0.01）。与对照组相比较,四君子汤组、四物汤组、八珍汤组VEGF mRNA表达量明显增高（P<0.01）。与四君子汤相比较,四物汤组VEGFmRNA表达量明显增高（P<0.01）,八珍汤组VEGF mRNA表达量明显降低（P<0.01）。与四物汤组相比较,八珍汤组VEGF mRNA表达量明显降低（P<0.01）。结论:1.补益气血中药四君子汤、四物汤、八珍汤能加速人皮肤成纤维细胞有丝分裂,促进人皮肤成纤维细胞增殖,各组在浓度为100mg/L时,促进细胞增殖效果较明显且药物干预24h促细胞增殖效果明显。2.补益气血中药四君子汤、四物汤、八珍汤通过上调人皮肤成纤维细胞的EGF mRNA、TGF-βmRNA、VEGF mRNA的表达促进EGF、TGF-β1、VEGFA的分泌。3.补益气血中药四君子汤、四物汤、八珍汤可能通过加速人成纤维细胞的增殖,上调人皮肤成纤维细胞的EGF mRNA、TGF-βmRNA、VEGF mRNA的表达促进EGF、TGF-β1、VEGFA的分泌,加速血管再生,促进创面肉芽组织的生长及创面上皮化,最终促进创面愈合。4.补益气血中药四君子汤、四物汤、八珍汤促进EGF、TGF-β1、VEGFA的分泌表达存在差异,提示促进肉芽组织合成生长的靶点存在差异,与中医“气血”理论相吻合。5.中浓度八珍汤能促进人皮肤成纤维细胞合成分泌EGF、TGF-β1、VEGFA,低浓度八珍汤促进EGF、TGF-β1表达效果并不明显,高浓度八珍汤对于人皮肤成纤维细胞合成分泌EGF、TGF-β出现不同程度的抑制作用。补益气血中药在临床运用中需使用合理浓度。
王蕴珠[6]（2017）在《外用生肌类散剂的用药规律分析及海贝散治疗压疮的临床疗效观察》文中指出研究目的:1、外用生肌法是中医外治法独特理论之一,中医古籍中隐含了大量关于溃疡辨证施治的内容,本研究通过数据挖掘技术对中医外科古籍中外用生肌类散剂的用药及组方特点分析,总结外用生肌类散剂治疗溃疡的用药规律,以期从中挖掘有价值的内容以指导临床。2、根据压疮创面特点,从中药外用以及传统剂型在促进创面自我修复的优势出发,将中药外用制剂海贝散应用于压疮创面,评价其治疗创面和促进愈合的有效性和安全性,形成可在临床安全使用并适于推广的简便效廉的治疗方案。研究方法:1、根据湖南电子音像出版社出版的大型中医类电子图书《中华医典》为检索途径,其中以"临证各科-外伤科"为检索范围,以"生肌""收口" "长肉""生肉""生新""敛疮""敛口" "补肌""补肉"等为检索关键词,对于检索到的方剂从文献出处、年代、作者、方名、组成、功效主治、用法方面记录。以第七版《中药学》教材为标准,将从古籍中检索到的中药名称进行规范化整理。用SPSS统计学软件进行高频药物频数统计,关联规则分析和聚类分析。2、选取北京中医药大学东方医院64例压疮患者,随机分为治疗组和对照组,每组各32例,清创后分别予海贝散涂撒创面和藻酸盐敷料覆盖创面,并分别在治疗前,治疗后1周、2周、3周、4周观察两组创面疼痛程度、创面色泽、新生肉芽组织、创面愈合率、创面愈合时间和总体有效率等指标并做以记录,采用SPSS统计学软件进行结果分析。研究结果:1、本研究共纳入符合条件的外用生肌类散剂127首,共154味中药,对其进行高频药物统计,最常见的药物为乳香、轻粉、冰片、血竭、龙骨、没药、铅丹、儿茶、海螵蛸、石膏,最常用的外治药物是活血化瘀药,药物来源最多的是矿物类药,药物性味多寒、温、平,味多辛、甘、苦,归经多为心经、肝经、胃经。根据关联规则分析,得出最常用药物组合,前3位药对组合依次为:"乳香—没药"、"乳香-血竭"、"没药—血竭",通过聚类分析,得出新的药群,其组成与外用药治疗溃疡的作用机制相吻合。2、海贝散外用治疗压疮创面,可明显减缓患者的疼痛程度、改善创面色泽、促进新生肉芽组织生长、提高愈合率、缩短愈合时间具有促进创面愈合的作用。
陈聪,陈云志,喻嵘,秦钟,杨长福,庄田畋,薛蕾,李文[7]（2017）在《中医药调控糖尿病常见并发症bax表达的实验研究述评》文中研究表明糖尿病及其并发症发病机制复杂,尚未完全阐明。研究发现靶细胞的损伤、凋亡,进而导致的组织损伤,是糖尿病各种并发症发生、发展的重要因素。Bax是重要的细胞凋亡因子,其表达水平的异常,与糖尿病各种并发症发生、发展密切相关。研究发现单味中药或复方,可通过降低糖尿病并发症靶细胞中bax表达水平,改善靶细胞功能,保护靶细胞结构,降低靶细胞凋亡率,从而延缓糖尿病并发症的发生发展。现对近年来中医药调控糖尿病常见并发症中bax表达的相关实验研究进行述评,以飨同道。
柴政[8]（2016）在《一效膏促进慢性皮肤溃疡创面修复的研究》文中研究表明目的:通过观察皮肤破损、激素干预、异物植入3种因素对小鼠皮肤溃疡创面的影响,探讨最符合临床慢性皮肤溃疡特点的复合因素叠加造模方法,为进一步研究提供理想的动物模型。并在此基础上观察一效膏对慢性皮肤溃疡小鼠创面愈合的影响,探讨其促进创面愈合的作用机制。材料与方法:实验一:清洁级昆明种小鼠,50只,均为雄性,体重20-22g。随机数字表法随机分为:皮损+激素+异物组、皮损+激素组、皮损+异物组、单纯皮损组、空白组;每组各10只小鼠。皮损+激素+异物组与皮损+激素组小鼠连续3天股部肌注氢化可的松注射液4ml/kg,其余各组小鼠注射等量生理盐水。于造模第4天用4%水合氯醛麻醉后,剪去背部毛,在腰椎正中部减除部分皮肤,造成直径大约为1.2cm的圆形皮肤全层切口。皮损+激素+异物组、皮损+异物组小鼠于皮肤切开后同时用血管钳将皮肤组织分离至肌筋膜,然后用镊子轻轻拉开切口,将消毒的塑料环边缘埋入切口内,最后将紧靠塑料环边缘的皮肤缝合二针,以防环脱落。造模成功后观察小鼠一般状态、疮面形态、分泌物,定期称量小鼠体重,测量创面面积并计算创面愈合率,造模后14天处死小鼠,剪下创面新生肉芽组织及创周组织,行HE染色观察创面组织毛细血管新生及成纤维细胞增殖情况。实验二:清洁级昆明种小鼠40只,随机分为空白组、模型组、一效膏组、康复新液组,每组各10只,除空白组外,各组小鼠采用皮损+激素+异物组方法造模,各治疗组给予相应药物,模型组予生理盐水涂抹创面,各组均每日换药一次,以无菌纱布覆盖创面,空白组不予干预。治疗后定期肉眼观察小鼠创面大体情况,测量创面面积并计算创面愈合率,于治疗后第21天处死小鼠,取塑料环内肉芽组织,用电子天平称取肉芽肿湿重,然后以10%福尔马林溶液固定保存,HE染色进行形态学观察,免疫组化法检测创面组织中bcl-2、bax蛋白表达水平。实验三:清洁级昆明种小鼠120只,随机分为空白组、模型组、一效膏组、康复新液组,每组各30只,每组在其基础上再分为一周组、二周组、三周组3个亚组,每组各10只小鼠。各组小鼠于规定时间结束观察,处死后,取塑料环内肉芽组织,1/3浸入10%福尔马林溶液固定保存,做组织学观察、免疫组化法检测用。2/3放入冻存管内超低温冰箱保存,作real-timepcr检测用。观察指标:血管内皮生长因子（vegf）,成纤维细胞生长因子（fgf）,转化生长因子（tgf-β）,cd34抗原,及成纤维细胞（fb）计数。结果:实验一:1.一般状态:造模1周后皮损+异物组、单纯皮损组小鼠活动状态较好,运动灵敏,进食良好,大便成形,体态与空白组相比略显瘦削。皮损+激素+异物组与皮损+激素组体态明显消瘦,进食量少,大便稀薄不成形,活动量明显减少,蜷缩,四肢及尾部冷。2.创面情况:单纯皮损组疮面于造模后第3天即出现鲜红肉芽组织,创面湿润,少量浆液性渗出,创面平坦,无明显结痂,愈合速度快。皮损+激素组疮面颜色暗淡,分泌物清晰,肉芽组织量少且不鲜嫩,创面愈合较单纯皮损组慢。皮损+异物组初期即有大量稠厚黄白色分泌物,分泌物下创面基底组织颜色鲜红,后期转为暗红,创面结痂较厚,愈合趋势不明显。皮损+激素+异物组,初期有大量清晰分泌物,中后期疮形散漫,平坦塌陷,色泽紫暗,肉芽苍白并被结痂覆盖,愈合趋势不明显。3.体重情况:造模当天各组小鼠体重无明显差异,造模后第1周各组体重比较,单纯皮损组体重增长最快,皮损+激素+异物组体重增长最慢。析因设计方差分析表明,激素注射与异物植入两种因素对小鼠体重变化均有影响。4.造模后各组小鼠创面愈合率比较,单纯皮损组愈合速度最快,皮损+激素+异物组最慢。5.组织学观察:单纯皮损组切片中可见较多新生排列整齐的毛细血管,伴有大量成纤维细胞,少量纤维母细胞及萎缩的炎性细胞,无明显水肿。皮损+激素组切片可见新生毛细血管及成纤维细胞排列较为稀疏,可见炎性细胞。皮损+异物组切片显示大量萎缩的炎性细胞,偶可见巨噬细胞及浆细胞,大小血管排列杂乱且部分破裂,红细胞溢出散落于组织间隙,并伴有水肿。皮损+激素+异物组切片可见毛细血管生成及成纤维细胞稀少,排列杂乱,可见炎性细胞。空白组皮下组织切片可见肌纤维排列整齐有序,无炎性细胞浸润。实验二:1.创面大体观察:一效膏组小鼠创面用药后第3-7天创面色泽由晦暗转红活,出现肉芽组织,创面湿润,较多稠厚分泌物,无明显结痂,触之较软,愈合趋势明显;康复新液组小鼠用药后第3-9天可见少量肉芽组织,色泽尚红活,表面较为干燥,分泌物清晰,少许结痂覆盖,愈合趋势较明显;模型组小鼠创面色泽晦暗,疮形散漫,平坦塌陷,愈合早期无明显肉芽组织,致中后期依稀可见少许苍白肉芽,表面被结痂覆盖,触之较硬,无明显愈合趋势。2.创面愈合率:治疗第5天,各治疗组与模型组比较,一效膏组、康复新液组创面愈合率明显提高（p<0.05）。治疗第10天,各治疗组与模型组比较,一效膏组、康复新液组创面愈合率明显提高（p<0.05）;一效膏组与康复新液组比较,差异无统计学意义。治疗第17天,与模型组比较,一效膏组、康复新液组创面愈合率明显提高（p<0.05）。3.创面肉芽组织湿重:用药后21天,各治疗组与模型组相比,一效膏组与康复新液组小鼠创面塑料环内肉芽组织湿重明显提高（p<0.05）。4.创面bcl-2、bax蛋白表达:各治疗组与模型组相比,一效膏组与康复新液组小鼠创面肉芽组织内bcl-2表达明显升高（p<0.001）,而bax表达明显降低（p<0.001）。5.组织学观察:正常组皮下组织切片可见肌纤维排列整齐有序,无炎性细胞浸润。模型组肉芽组织增生不明显,毛细血管数量稀疏,排列杂乱,内皮细胞与成纤维细胞数量稀少,可见炎性细胞,瘢痕增生明显。一效膏组肉芽组织增生较明显,毛细血管生成明显较模型组多,排列整齐,伴有大量成纤维细胞及少量纤维母细胞,偶可见少量炎性细胞,瘢痕增生不明显。康复新液组毛细血管生成、成纤维细胞情况与一效膏组相似,可见少量瘢痕组织。实验三:1.成纤维细胞计数:各治疗组与模型组比较,用药后第7、14、21天,一效膏组与康复新液组成纤维细胞计数明显提高（p<0.05）。2.cd34结果:各时间点,模型组cd34蛋白表达水平均明显高于空白组（p<0.01）;与模型组相比,各治疗组cd34蛋白表达水平明显提高（p<0.01）。3.vegf结果:免疫组化:各时间点,模型组vegf蛋白表达水平均明显高于空白组（p<0.05）。与模型组比较,各时间点一效膏组vegf蛋白表达均水平均有所提高,其中第7、14天两组间比较差异有统计学意义（p<0.05）,与模型组比较,各时间点康复新液组vegf蛋白表达均有所提高,其中第14天两组间比较差异有统计学意义（p<0.01）。rt-pcr:各时间点模型组vegfmrna表达水平均高于空白组（p<0.05）。与模型组比较,各时间点治疗组vegfmrna表达水平均有所提高（p<0.05）。4.fgf结果:免疫组化:各时间点,模型组fgf蛋白表达水平均明显高于空白组（p<0.01）。与模型组比较,各时间点一效膏组FGF蛋白表达均水平均有所提高,其中第14天两组间比较差异有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较,各时间点康复新液组FGF蛋白表达均有所提高。RT-PCR:各时间点模型组FGF mRNA表达均高于空白组,其中第7天两组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较,各时间点,一效膏组FGF mRNA表达均有所提高（P<0.01）。与模型组比较,各时间点康复新液组FGF mRNA表达均有所提高。5.TGF-β结果:免疫组化:各时间点,模型组TGF-β蛋白表达水平均高于空白组（P<0.05）。与模型组比较,各时间点一效膏组TGF-β蛋白表达均水平均有所提高,其中第7、14天两组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较,各时间点康复新液组TGF-β蛋白表达均有所提高,其中第7、14天两组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。RT-PCR:各时间点模型组TGF-βmRNA表达均高于空白组（P<0.05）。与模型组比较,各时间点一效膏组TGF-βmRNA表达水平有所提高（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,康复新液组TGF-βmRNA表达水平有所提高,其中第14、21天差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论:1.皮肤缺损叠加激素注射与异物植入的复合因素造模方法,能有效维持创面慢性皮肤溃疡的状态,且符合中医外科阴症疮疡的证候特点。2.一效膏能有效促进慢性皮肤溃疡创面的愈合,提高创面愈合率,并能促进创面肉芽组织的生成,其作用机制可能与上调bcl-2表达水平,下调bax表达水平有关。3.一效膏能通过上调VEGF、FGF、TGF-β表达水平,促进创面毛细血管的新生和成纤维细胞的增殖,进而促进慢性皮肤溃疡创面的愈合。
张晓芬,孙桂芳,陈亚峰,奉典旭[9]（2015）在《活血化瘀中药促进创面愈合的研究进展》文中指出目的探讨活血化瘀中药及其有效成分促进创面愈合的治疗作用。方法收集整理运用活血化瘀中药及其有效成分治疗各种创面的相关文献,结合中医辨证论治的理论和现代医学创伤修复学说进行探讨,并与临床实践相印证。结论中医学运用活血化瘀中药及其有效成分配伍袪腐生肌、清热解毒、回阳益气中药治疗各种创面效果显着,具有一定优势,为进一步临床使用活血化瘀药物治疗创面提供参考依据。
周灵君[10]（2012）在《中药炉甘石、赤石脂炮制机理及效应评价研究》文中提出本论文研究来源于国家药典委员会2010年版药典煅炉甘石修订项目（YS-129）和江苏省2009年度普通高校研究生科研创新计划项目（CX09B280Z）,并对其进行深化研究。论文包括文献研究和实验研究两大部分,研究内容概述如下:第一部分文献研究通过查阅古今相关文献,系统整理国内外多家学者的研究成果及专着论述,从以下几个方面分别进行综述:1.敛口生肌中药促进创面愈合的研究,包括疗效研究和作用机制研究;2.炉甘石的研究进展,包括品种考证与药材来源、鉴别与成分分析、炮制方法与工艺、炮制作用与机理、临床应用等五个方面;3.赤石脂的研究进展,包括品种考证与药材来源、鉴别与成分分析、炮制方法与作用、化学成分、药理与毒理、临床应用等六个方面,以期为本课题即将开展的实验研究提供必要的理论依据。第二部分实验研究1.采用问卷调查江苏省矿物药使用现状,对调查结果进行整理、统计和分析。结果表明江苏省使用的矿物药有43种,其中27种已被药典收载,包括金礞石、雄黄、轻粉等3个已很少使用品种,而常用药龙骨、龙齿和阳起石还未载入药典。此外,还存在对炉甘石、赤石脂等矿物药的产地背景不够重视、生熟混用等问题。因此,需加强对矿物药作用物质基础、炮制工艺和机理、作用机制的研究,建立矿物药质量标准和矿物药质量认定体系,充分利用矿物资源。2.采用XRD法对17批炉甘石和15批煅炉甘石样品进行成分分析,药典法测定ZnO含量,以期对市售矿物药生、煆炉甘石质量进行客观评价。完善锻炉甘石质量标准,在对煆炉甘石的含量测定方法进行研究的基础上,对主成分为锌化合物的市售煅炉甘石进行性状描述,开展砷、汞、铅、镉、铜五种重金属元素的检查和含量测定研究,规定煅炉甘石中ZnO最低含量。以抑菌活性和ZnO含量为指标,对炉甘石多次煅淬的煅淬次数和一次锻淬水飞的具体工艺进行研究,比较多次煅淬与煅淬水飞的优劣。采用XRD、IR、TEM等方法对炮制前后的样品进行成分分析和结构表征,深入探讨炉甘石炮制工艺和炮制机理。分别采用二甲苯致小鼠耳肿胀法和化学刺激法（小鼠扭体法）模型,观察炉甘石对小鼠的抗炎和镇痛作用。采用大鼠小面积全层皮肤缺损创面模型,通过考察炉甘石对损伤修复过程中大鼠体重和创面直径、创面肉芽组织的影响,开展炉甘石敛口生肌效应评价。研究结果及主要结论概述如下:（1）炉甘石质量评价与煅炉甘石质量标准研究:市售矿物药生、煅炉甘石XRD谱显示其多为CaCO3及其它杂质而无应有的ZnCO3或ZnO,与ZnO含量测定结果一致。少数含有ZnO的煅炉甘石,其XRD图谱则显示为基本未经煅烧分解的生品,样品中Pb、Cd、Cu、As含量也较高。检测结果表明市售炉甘石原矿物品种来源较为复杂,炮制品质量控制较为混乱。因此,急需建立严格的质量管理方法及质量标准,以确保用药安全和有效,而XRD法可以应用于矿物药生、煅炉甘石的鉴定及其质量控制。（2）炉甘石炮制工艺与炮制机理研究:700 ℃煅制能使炉甘石分解较完全;若采用多次锻淬工艺,40目炉甘石1次煅淬后ZnO含量高、抑菌活性强,拇指盖大小炉甘石7次煅淬效果最佳;一次煅淬水飞时,40目炉甘石700 ℃煅烧1 h即可使其分解较完全,ZnO含量高,水飞后颗粒变得小而均匀,可溶性杂质减少,吸湿性增强,抑菌活性增强。且一次锻淬水飞法省时省力,节约能源,是炉甘石合适的炮制方法。ZnO、ZnC03、Zn5（C03）2（OH）6和ZnS04均有抑菌效果,推测炉甘石的主要有效成分是锌元素。（3）炉甘石抗炎和镇痛作用研究:生炉甘石组和煅炉甘石1.665 mg ZnO·（g·d）-1、3.330 mg ZnO·g·d)-1两个剂量组能明显减轻小鼠耳廓肿胀度,与空白对照组比较差异非常显着（P<0.01）,提示炉甘石可对抗二甲苯所致的炎症反应,具有抗炎作用。生炉甘石组和煅炉甘石3.330 mg ZnO·g·d)-1剂量组有明显镇痛作用,而煅炉甘石低剂量组及黄芩膏阳性对照组均无明显的镇痛作用。对炉甘石抗炎、镇痛作用的物质基础及其作用机制还有待于进一步研究。（4）炉甘石敛口生肌效应评价研究:生、煅炉甘石对于大鼠体重的恢复并无明显作用;生炉甘石有助于缩小创口面积,而锻炉甘石对创口面积的缩小没有明显效果。炉甘石和煅炉甘石在高剂量时均可以促进肉芽组织中的新生毛细血管生成（P<0.01）,增加受损创面的血供,加速恢复。生炉甘石高剂量组在给药8天后,可以增大新生肉芽组织中毛细血管的面积（P<0.05）。而煅炉甘石高剂量组不仅可以增加大鼠创面新生肉芽组织中毛细血管的面积（P<0.01）,还增加了毛细血管的周长（P<0.01）。生、煆炉甘石均可增加大鼠创面肉芽组织中毛细血管管径和数量（P<0.01或P<0.05）,对新生毛细血管的生长具有明显促进作用。生、煆炉甘石均可以促进成纤维细胞增生,增加受损创面的血供,加速创口愈合。煅炉甘石可激活中性粒细胞,通过增加巨噬细胞、淋巴细胞数量,从而增强创面的免疫功能。炉甘石有抗炎和镇痛作用,炮制后吸湿性、抑菌作用增强,锌元素含量增加,敛口生肌作用增强,提示炉甘石的敛口生肌效应可能与上述因素有关。3.采用IR分析和XRD法对14批赤石脂、3批锻赤石脂和1批白石脂样品进行成分分析,KF置换EDTA容量法测定Al2O3含量,以期对市售矿物药生、煅赤石脂质量进行客观评价。在对赤石脂的含量测定方法进行研究的基础上,对最主要成分为多水高岭石的市售赤石脂进行了砷、汞、铅、镉、铜五种重金属元素的检查和含量测定研究。结合TG和烧失率分析,以Al2O3含量、吸湿性和抑菌活性为指标,对直接煅烧和加醋煅烧的赤石脂的具体炮制工艺进行研究,分析用醋与否以及用醋量、煅制温度、锻制时间对赤石脂炮制的影响。采用XRD、IR、SEM、TEM、ICP-MS分析和酸碱度、浸出物测定等方法对炮制前后的样品进行成分分析和结构表征,探讨赤石脂的有效成分和炮制机理。研究结果及主要结论概述如下:（1）赤石脂成分分析与含量测定研究:市售14批赤石脂生品的IR图谱显示其中13批样品的IR图谱与文献多水高岭石特征相一致,但是XRD分析显示只有4批赤石脂的最主要成分为多水高岭石,各样品A1203含量测定结果与XRD分析结果一致。因此IR分析不能单独作为鉴别赤石脂真伪的手段,XRD法可以应用于矿物药赤石脂的鉴定及其质量控制。部分样品中Pb、Cu、As含量较高,因此,急需建立严格的质量管理方法及质量标准,以确保用药安全和有效。（2）赤石脂炮制工艺与炮制机理研究:炮制后赤石脂的Al2O3含量增加,用醋与否以及用醋量、锻制时间对赤石脂的A1203含量和结构没有显着影响。每100kg赤石脂加30 kg醋和10 kg水调匀后搓条切段,700 ℃锻制1h能使Al2O3含量较高,吸湿性增强,浸出物增加,炮制后赤石脂由碱性转变为弱酸性,可以有效地酸化创面,降低创面的pH值,促进创面愈合,但是抑菌活性降低。铝在赤石脂中有无作用、有何作用、以何种形态发挥作用以及赤石脂的物质基础还有待于进一步研究确认。本研究有以下创新点:1.完善煆炉甘石饮片质量标准,研究成果被2010年版药典采用。参照药材标准,考察了煅炉甘石的含量测定方法,并在对收集的15批煅炉甘石饮片进行成分分析和结构表征的基础上,对主成分为锌化合物的煅炉甘石进行性状描述,建立砷、汞、铅、镉、铜五种重金属元素的检查方法和限度,规定煅炉甘石含氧化锌（ZnO）不得少于56.0%。其中煅炉甘石的性状和含量测定已被2010年版药典采纳。2.采用现代方法和技术较为系统地阐释炉甘石的炮制机理。采用多种化学成分分析和结构表征手段,结合药效学指标优选出炉甘石的最佳炮制方法是煅淬水飞法,并对其炮制机理进行系统阐述:高温煅烧使碳酸锌分解成ZnO,且锌不易损失,因此锌元素含量增加;水淬使炉甘石易粉碎;水飞可除去水溶性杂质,且使颗粒变得小而均匀,更适于临床应用;经过炮制,炉甘石吸湿性增强,可以使创面保持干燥,增强其收敛功效。3.本文较为系统地对炉甘石外用中医功效及其作用物质基础进行了评价。炉甘石吸湿性较强,有较好的抑菌作用,能够改善创面的血液循环,加速创面的新陈代谢,促进大鼠伤口成纤维细胞和毛细血管的形成,加快肉芽组织增生,从而加速皮肤创口的愈合。文献认为炉甘石中起抑菌作用的是ZnO,而ZnCO3无抑菌活性,ZnO含量直接影响炉甘石的抑菌活性。本文通过多种含锌化学物质的抑菌活性测试和锌元素含量、物质结构分析,推测炉甘石抑菌活性的有效成分是锌元素,游离态的锌元素含量影响炉甘石抑菌活性。
二、祛瘀生肌法对实验性大鼠创面肉芽组织中细胞周期的动态影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、祛瘀生肌法对实验性大鼠创面肉芽组织中细胞周期的动态影响（论文提纲范文）
（1）回阳生肌汤和鸡血藤对慢性皮肤溃疡愈合过程中MSCs趋化和迁移功能的调节作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词(表) |
| 综述 |
| 综述一 干细胞在创面修复中的研究进展 |
| 1 表皮干细胞 |
| 2 间充质干细胞 |
| 3 毛囊干细胞 |
| 4 细胞外囊泡 |
| 5 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 回阳生肌法治疗慢性皮肤溃疡的研究进展 |
| 1 疮疡的阴阳辨证 |
| 2 回阳生肌法的现代理论体系 |
| 3 回阳生肌法促进慢性皮肤溃疡愈合的机制 |
| 4 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 实验研究 |
| 实验一 回阳生肌汤和鸡血藤水提物入血成分分析 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 实验二 回阳生肌汤对db/db糖尿病小鼠伤口愈合及BMSCs增殖能力的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 实验三 回阳生肌汤对骨髓抑制大鼠伤口愈合及BMSCs增殖、趋化和迁移能力的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 实验四 鸡血藤水提物对骨髓抑制大鼠伤口愈合及BMSCs增殖、趋化和迁移能力的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 实验五 回阳生肌汤和鸡血藤水提物体外对氧化损伤大鼠BMSCs增殖、趋化和迁移能力的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 存在的问题与不足 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（2）为探索回阳、养阴生肌机制搭建急慢性创面LncRNA的CNC图（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 资料和方法 |
| 1 一般资料 |
| 1.1 样本来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 样本提取 |
| 2 微阵列芯片技术检测lncRNA |
| 2.1 实验试剂 |
| 2.2 实验仪器 |
| 2.3 总RNA提取 |
| 2.4 RNA质量测定 |
| 2.5 标记 |
| 2.6 杂交 |
| 2.7 数据采集和标准化芯片 |
| 2.8 差异表达分析和功能分析 |
| 第二部分 结果与分析 |
| 1 芯片标准化的结果 |
| 2 KEGG通路分析(见图2) |
| 3 PathwayMap展示 |
| 4 q-PCR验证 |
| 5 LncRNA-mRNA共表达网络图 |
| 6 LncRNA-mRNA的共表达网络图分析 |
| 第三部分 讨论 |
| 1 对慢性难愈合创面的认识 |
| 2 回阳生肌法治疗慢性难愈合创面 |
| 3 养阴生肌法治疗慢性难愈合创面 |
| 4 对lncRNA的认识 |
| 5 基因芯片及CNC网络图介绍以及对本课题的研究意义 |
| 6 导师前期试验 |
| 7 问题与展望 |
| 第四部分 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 中西医对慢性难愈合创面治疗的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
（3）糖尿病肛漏应用美洲大蠊提取液的lncRNA高通量测序（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 资料与方法 |
| 1 资料 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.2.1 肛漏诊断标准 |
| 1.2.2 2型糖尿病诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 剔除标准 |
| 2 方法 |
| 2.1 实验仪器 |
| 2.2 实验试剂和耗材 |
| 2.3 总RNA样本的制备 |
| 2.4 测序数据质量统计及参考基因组比对基本统计 |
| 2.5 整体基因差异表达分析及组间差异表达分析 |
| 2.6 GO分析和KEGG通路分析 |
| 第二部分 实验结果 |
| 1 总 RNA 样本质量分析 |
| 2 Lnc RNA预测初筛 |
| 3 差异表达的lnc RNA靶标基因预测 |
| 4 芯片检测差异表达的lnc RNAs和 m RNAs |
| 5 对差异表达的m RNAs和 lnc RNAs进行GO分析 |
| 5.1 对差异表达的m RNAs进行GO分析 |
| 5.2 对差异表达的lnc RNAs-cis、lnc RNAs-trans进行GO分析 |
| 6 对差异表达的m RNAs和 lnc RNAs进行KEGG通路分析 |
| 6.1 筛选差异表达的m RNAs和 lnc RNAs显着差异的前10条KEGG通路 |
| 6.2 显着差异表达的m RNAs和 lnc RNAs的KEGG展示图 |
| 第三部分 讨论 |
| 第四部分 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录A 知情同意书 |
| 综述 养阴、回阳生肌法在慢性难愈合创面治疗中的研究进展 |
| 参考文献 |
（4）黄芪注射液介导Wnt/β-Catenin信号通路调控表皮干细胞增殖分化促进糖尿病溃疡愈合的机制研究（论文提纲范文）
| 英文缩略语 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 动物饲养 |
| 1.1.3 主要试剂 |
| 1.1.4 主要仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 动物糖尿病模型建立 |
| 1.2.2 动物糖尿病溃疡模型建立及分组 |
| 1.2.3 动物分组给药 |
| 1.2.4 动物取材 |
| 1.2.5 组织病理学 |
| 1.2.6 免疫组织化学方法 |
| 1.2.7 免疫组织图像分析法 |
| 1.2.8 Western Blot |
| 1.2.9 Real Time-qPCR |
| 1.3 统计学方法 |
| 2 研究结果 |
| 2.1 建立大鼠糖尿病模型及皮肤溃疡模型 |
| 2.2 大鼠一般情况变化 |
| 2.3 各组大鼠体重、血糖变化情况 |
| 2.3.1 各组大鼠体重变化情况 |
| 2.3.2 大鼠血糖变化情况 |
| 2.4 各组大鼠创面愈合率、愈合时间比较 |
| 2.4.1 创面愈合率比较 |
| 2.4.2 创面愈合时间比较 |
| 2.5 各组大鼠创面愈合情况 |
| 2.6 创面组织HE染色 |
| 2.7 创面组织免疫组化检测 |
| 2.7.1 各组大鼠创面组织K19表达的比较 |
| 2.7.2 各组大鼠创面组织β1整合素表达的比较 |
| 2.7.3 各组大鼠创面组织PCNA表达的比较 |
| 2.8 创面组织Western Blot检测 |
| 2.8.1 各组大鼠不同时间点创面组织β-Catenin蛋白的表达 |
| 2.8.2 各组大鼠不同时间点创面组织GSK3β蛋白的表达 |
| 2.8.3 各组大鼠不同时间点创面组织β-Catenin核内表达情况 |
| 2.8.4 各组大鼠不同时间点创面组织C-myc、Cyclin D1的表达 |
| 2.9 创面组织Real Time-qPCR检测 |
| 2.9.1 各组大鼠不同时间点创面组织β-Catenin、GSK3βmRNA的表达 |
| 2.9.2 各组大鼠不同时间点创面组织Wnt1、wnt3am RNA的表达 |
| 3 讨论 |
| 3.1 中医学对糖尿病溃疡的认识 |
| 3.1.1 病因病机 |
| 3.1.2 治疗方法 |
| 3.2 西医学对糖尿病溃疡创面修复的认识 |
| 3.3 Wnt通路、表皮干细胞增殖分化与糖尿病溃疡的相关性 |
| 3.4 人重组表皮生长因子促进糖尿病溃疡愈合的作用 |
| 3.5 黄芪促进糖尿病溃疡愈合的中医理论基础与作用机制 |
| 3.5.1 黄芪促进糖尿病溃疡愈合的中医理论基础 |
| 3.5.2 黄芪促进创面愈合的作用机制 |
| 创新点 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 一、文献综述(全文) 中医药促进糖尿病溃疡愈合机制的研究进展 |
| 参考文献 |
| 二、在校期间参加学术会议及参与课题 |
（5）补益气血中药对体外培养人皮肤成纤维细胞增殖及生长因子表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 引言 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 实验药物 |
| 1.4 主要仪器与设备 |
| 1.5 主要试剂配制 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 补益气血中药(四君子汤、四物汤、八珍汤)冻干粉制备 |
| 2.2 实验分组 |
| 2.3 人皮肤成纤维细胞复苏、培养及传代 |
| 2.4 CCK8法测定补益气血中药对人皮肤成纤维细胞增殖的影响 |
| 2.5 流式细胞仪(FCM)检测人皮肤成纤维细胞增殖周期 |
| 2.6 免疫印迹分析法(Wb)检测补益气血中药对人皮肤成纤维细胞合成分泌EGF、TGF-β1、VEGFA的影响 |
| 2.7 实时荧光定量PCR测定补益气血中药对人皮肤成纤维细胞合成EGF mRNA、TGF-βmRNA、VEGF mRNA表达量的影响 |
| 2.8 统计分析 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 补益气血中药对人皮肤成纤维细胞增殖的影响 |
| 3.2 补益气血中药对人皮肤成纤维细胞增殖周期的影响 |
| 3.3 补益气血中药对人皮肤成纤维细胞合成分泌EGF、TGF-β1、VEGFA的影响 |
| 3.4 补益气血中药对人皮肤成纤维细胞合成EGF mRNA、TGF-βmRNA、VEGF mRNA的影响 |
| 4.讨论 |
| 4.1 中医基于“气血”理论对慢性皮肤溃疡的认识 |
| 4.2 西医对慢性皮肤溃疡的认识 |
| 4.3 补益气血中药对人皮肤成纤维细胞增殖的影响的探讨 |
| 4.4 补益气血中药对人皮肤成纤维细胞周期的影响的探讨 |
| 4.5 补益气血中药对人皮肤成纤维合成分泌EGF、TGF-β1、VEGFA及合成EGF mRNA、TGF-βmRNA、VEGF mRNA影响的探讨 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 附录1 :文献综述 基于中医“气血”理论论治下肢慢性溃疡近况 |
| 参考文献 |
| 附录2 :在读期间发表论文 |
（6）外用生肌类散剂的用药规律分析及海贝散治疗压疮的临床疗效观察（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTARCT |
| 英文缩略词对照表 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 慢性难愈性创面的传统认识和现代实践 |
| 一、慢性难愈合创面的传统认识 |
| 二、慢性难愈性创面的现代实践 |
| 参考文献 |
| 综述二 生肌法在慢性难愈性创面中的应用 |
| 一、祛腐生肌 |
| 二、祛瘀生肌 |
| 三、补益生肌 |
| 四、回阳生肌 |
| 五、中医生肌法作用机理研究 |
| 参考文献 |
| 第二部分 外用生肌类散剂的用药规律分析 |
| 一、研究目的 |
| 二、研究内容 |
| 三、研究方法 |
| 四、研究结果 |
| (一) 生肌类散剂高频药物分析 |
| (二) 生肌类散剂药物所属类别频数统计 |
| (三) 生肌类散剂药用来源频数统计 |
| (四) 生肌类散剂矿物类药含金属成分频数统计 |
| (五) 生肌类散剂药物性味归经频数统计 |
| (六) 基于关联规则的配伍规律分析 |
| (七) 聚类分析 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 临床研究 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 一、病例来源与分组 |
| 二、纳入与排除标准 |
| 三、研究方法 |
| 四、观察指标与方法 |
| 五、统计分析 |
| 研究结果 |
| 一、基本情况 |
| 二、创面疼痛程度比较 |
| 三、溃疡表面色泽变化 |
| 四、新生肉芽组织变化情况比较 |
| 五、溃疡愈合率比较 |
| 六、创面愈合时间比较 |
| 七、总有效率的比较 |
| 八、安全性检验 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）中医药调控糖尿病常见并发症bax表达的实验研究述评（论文提纲范文）
| 1 糖尿病血管并发症 |
| 1.1 糖尿病大血管病变 |
| 1.2 糖尿病微血管病变 |
| 1.2.1糖尿病心肌病 |
| 1.2.2糖尿病肾病 |
| 2 神经系统并发症 |
| 2.1 中枢神经系统并发症 |
| 2.2 周围神经系统并发症 |
| 3 糖尿病性皮肤病 |
| 4 糖尿病性阴茎勃起功能障碍 |
| 5 糖尿病合并高脂血症 |
| 6 结语 |
（8）一效膏促进慢性皮肤溃疡创面修复的研究（论文提纲范文）
| 中文论着摘要 |
| 英文论着摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 慢性皮肤溃疡小鼠模型的建立与中医阴症疮疡模型的探讨 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 一效膏对慢性皮肤溃疡小鼠创面愈合的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 一效膏对慢性皮肤溃疡小鼠创面组织VEGF、FGF、TGF-β影响的研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 附录 综述 |
| 慢性皮肤溃疡的中医研究概况 |
| 参考文献 |
| 现代医学关于生长因子对创面修复的调节作用的研究现状 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（9）活血化瘀中药促进创面愈合的研究进展（论文提纲范文）
| 1活血化瘀中药配伍应用治疗慢性难愈性创面 |
| 2单味活血化瘀药物或有效成分治疗创面的应用 |
| 3结语 |
（10）中药炉甘石、赤石脂炮制机理及效应评价研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 绪论 |
| 1 课题的研究背景 |
| 2 课题的研究目的与意义 |
| 3 课题的研究内容与研究方法 |
| 第一部分 文献研究 |
| 第一章 敛口生肌中药促进创面愈合的研究 |
| 第一节 敛口生肌中药的疗效研究 |
| 1 中药内服 |
| 2 中药汤剂外洗湿敷 |
| 3 复方膏剂外治 |
| 4 复方散剂外治 |
| 5 单味药外用 |
| 第二节 敛口生肌中药的作用机制研究 |
| 1 对创面生长因子的作用 |
| 2 促进创面的血液循环 |
| 3 对创面成纤维细胞及Ⅰ、Ⅲ型胶原的作用 |
| 4 调节创面免疫功能 |
| 5 对纤维结合蛋白(FN)的影响 |
| 6 对创面微量元素、pH值的影响 |
| 第二章 炉甘石的研究进展 |
| 第一节 品种考证与药材来源 |
| 1 品种考证 |
| 2 药材来源 |
| 第二节 鉴别与成分分析 |
| 第三节 炮制方法与工艺 |
| 1 传统炮制方法 |
| 2 现代炮制研究 |
| 第四节 炮制作用与机理 |
| 1 炮制作用的古代研究 |
| 2 炮制作用和机理的现代研究 |
| 第五节 临床应用 |
| 1 眼类疾病 |
| 2 皮肤病 |
| 3 肛门类疾病 |
| 4 慢性宫颈炎 |
| 5 念珠菌性包皮、龟头炎 |
| 6 腋臭 |
| 第三章 赤石脂的研究进展 |
| 第一节 品种考证与药材来源 |
| 1 品种考证 |
| 2 药材来源 |
| 第二节 鉴别与成分分析 |
| 第三节 炮制方法与作用 |
| 1 传统炮制方法 |
| 2 现代炮制研究 |
| 第四节 化学成分 |
| 第五节 药理与毒理 |
| 1 对血液系统的影响 |
| 2 抗炎作用 |
| 3 止泻作用 |
| 4 保护消化道粘膜作用 |
| 5 对磷烧伤的治疗作用 |
| 6 毒性或不良反应 |
| 第六节 临床应用 |
| 第四章 存在问题及前景 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 第一章 江苏省矿物药使用现状及建议 |
| 1 资料和方法 |
| 1.1 资料来源 |
| 1.2 分析方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 矿物药化学成分 |
| 2.2 矿物药用量 |
| 2.3 矿物药名称 |
| 2.4 矿物药来源 |
| 2.5 矿物药使用类型 |
| 2.6 矿物药治疗范围 |
| 3 讨论 |
| 4 建议 |
| 4.1 加强对矿物药基源的研究 |
| 4.2 加强对矿物药质量标准的研究 |
| 4.3 加强对矿物药炮制机理的研究 |
| 4.4 加强对矿物药作用机制的研究 |
| 参考文献 |
| 第二章 炉甘石炮制机理和效应评价研究 |
| 第一节 炉甘石质量评价及煅炉甘石质量标准研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试药与试剂 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 XRD测试及分析结果 |
| 2.1.1 测试条件及方法 |
| 2.1.2 XRD图谱及分析结果 |
| 2.2 煅炉甘石性状 |
| 2.3 炉甘石重金属元素的检查 |
| 2.3.1 定性检查 |
| 2.3.2 电感耦合等离子质谱法(ICP-MS)测定砷、汞、铅、镉、铜五种重金属元素含量 |
| 2.4 含量测定 |
| 2.4.1 煅炉甘石含量测定 |
| 2.4.2 铬黑T法测定市售生、煅炉甘石ZnO含量 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二节 炉甘石炮制工艺与炮制机理研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 仪器与材料 |
| 1.2 试药与试剂 |
| 1.3 实验用菌株 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 药物炮制 |
| 2.1.1 多次煅淬 |
| 2.1.2 煅淬水飞 |
| 2.2 ZnO含量测定 |
| 2.3 热分析 |
| 2.4 酸碱度与吸湿性 |
| 2.4.1 酸碱度 |
| 2.4.2 吸湿性 |
| 2.5 成分分析与结构表征 |
| 2.5.1 XRD测试 |
| 2.5.2 IR测试 |
| 2.5.3 TEM测试 |
| 2.5.4 ICP-MS测试 |
| 2.6 体外抑菌实验[6] |
| 2.6.1 增菌培养 |
| 2.6.2 样品配制 |
| 2.6.3 最低抑菌浓度测试(试管法) |
| 2.6.4 抑菌活性测试(平皿法) |
| 3 讨论 |
| 3.1 炮制工艺 |
| 3.1.1 煅制温度的选择 |
| 3.1.2 多次煅淬次数的选择 |
| 3.1.3 一次煅淬水飞工艺 |
| 3.1.4 多次煅淬与一次煅淬水飞的比较 |
| 3.2 炮制机理 |
| 3.2.1 有效成分 |
| 3.2.2 微量元素 |
| 3.2.3 酸碱度 |
| 3.2.4 吸湿性 |
| 3.2.5 炮制作用 |
| 3.2.6 其他 |
| 参考文献 |
| 第三节 炉甘石抗炎和镇痛作用研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 试药与试剂 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 自制煅炉甘石 |
| 2.2 炉甘石洗剂配制 |
| 2.3 统计学方法 |
| 2.4 抗炎作用——对小鼠耳肿胀的影响 |
| 2.5 镇痛作用——化学刺激法(小鼠扭体法) |
| 3 讨论 |
| 3.1 抗炎作用——对小鼠耳肿胀的影响 |
| 3.2 镇痛作用——化学刺激法(小鼠扭体法) |
| 参考文献 |
| 第四节 炉甘石敛口生肌效应评价研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 仪器与材料 |
| 1.2 试药与试剂 |
| 1.3 实验动物和饲料 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 实验方法 |
| 2.1.1 实验条件 |
| 2.1.2 统计学方法 |
| 2.1.3 实验分组和剂量 |
| 2.1.4 小面积全层皮肤缺损创面模型的建立[7,10] |
| 2.1.5 炉甘石对损伤的修复治疗 |
| 2.2 实验结果 |
| 2.2.1 炉甘石对损伤修复大鼠体重的影响 |
| 2.2.2 炉甘石对损伤修复大鼠创面直径的影响 |
| 2.2.3 炉甘石对损伤修复大鼠创面毛细血管数量及成纤维细胞数量的影响 |
| 2.2.4 炉甘石对损伤修复大鼠创面新生毛细血管面积及周长的影响 |
| 2.2.5 炉甘石对损伤修复大鼠创面新生毛细血管数密度、面密度及周密度的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 炉甘石对损伤修复大鼠体重和创面直径的影响 |
| 3.2 炉甘石对创面血液循环的作用 |
| 3.3 炉甘石对创面成纤维细胞的作用 |
| 3.4 炉甘石对创面免疫功能的影响 |
| 3.5 炉甘石的抗菌作用 |
| 3.6 炉甘石对创面微量元素的影响 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 第五节 本章小结 |
| 第三章 赤石脂的质量评价与炮制机理研究 |
| 第一节 赤石脂成分分析与含量测定研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试药与试剂 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 红外光谱测试与分析 |
| 2.1.1 各批次赤石脂、煅赤石脂和白石脂红外光谱图 |
| 2.1.2 红外光谱分析[1-3] |
| 2.2 XRD测试及分析结果 |
| 2.2.1 测试条件及方法 |
| 2.2.2 XRD图谱及分析结果 |
| 2.3 砷、汞、铅、锡、铜五种重金属元素的检查 |
| 2.3.1 定性检查 |
| 2.3.2 ICP-MS测定砷、汞、铅、镉、铜五种重金属元素含量 |
| 2.4 含量测定 |
| 2.4.1 KF置换EDTA容量法与X射线荧光分析法的比较 |
| 2.4.2 KF置换EDTA容量法的方法学考察 |
| 2.4.3 KF置换EDTA容量法测定市售生、煅赤石脂和白石脂Al_2O_3含量 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二节 赤石脂炮制工艺与炮制机理研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 仪器与材料 |
| 1.2 试药与试剂 |
| 1.3 菌株 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 Al_2O_3含量测定[34] |
| 2.2 药物炮制 |
| 2.2.1 加醋对赤石脂Al_2O_3含量的影响 |
| 2.2.2 正交法优选赤石脂炮制工艺 |
| 2.3 热分析 |
| 2.3.1 TG曲线 |
| 2.3.2 烧失率分析 |
| 2.4 酸碱度与吸湿性 |
| 2.4.1 酸碱度 |
| 2.4.2 吸湿性 |
| 2.5 成分分析与结构表征 |
| 2.5.1 IR测试 |
| 2.5.2 XRD测试 |
| 2.5.3 SEM观察 |
| 2.5.4 TEM观察 |
| 2.5.5 浸出物测定 |
| 2.5.6 ICP-MS测试 |
| 2.6 体外抑菌实验[7-12] |
| 2.6.1 增菌培养 |
| 2.6.2 样品配制 |
| 2.6.3 最低抑菌浓度测试(试管法) |
| 2.6.4 抑菌活性测试(平皿法) |
| 2.6.5 验证不同工艺赤石脂、白石脂、硅酸铝体外抑菌活性(试管+平皿法) |
| 3 讨论 |
| 3.1 热分析 |
| 3.2 酸碱度 |
| 3.3 吸湿性 |
| 3.4 IR光谱分析 |
| 3.4.1 赤石脂及其热产物的IR光谱分析 |
| 3.4.2 醋处理对赤石脂红外光谱的影响 |
| 3.5 XRD分析 |
| 3.5.1 赤石脂及其热产物的XRD分析 |
| 3.5.2 醋处理对赤石脂的影响 |
| 3.6 SEM观察 |
| 3.7 TEM观察 |
| 3.8 浸出物测定 |
| 3.9 ICP-MS分析 |
| 3.10 正交试验 |
| 3.11 Al_2O_3含量 |
| 3.12 抑菌活性 |
| 参考文献 |
| 第三节 本章小结 |
| 第四章 炉甘石和赤石脂炮制及敛口生肌效应共性与差异性分析 |
| 1 炮制方法 |
| 2 炮制机理 |
| 3 敛口生肌效应 |
| 第五章 结论与展望 |
| 一、论文主要结论与创新点 |
| 二、展望 |
| 附录 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、祛瘀生肌法对实验性大鼠创面肉芽组织中细胞周期的动态影响（论文参考文献）
- [1]回阳生肌汤和鸡血藤对慢性皮肤溃疡愈合过程中MSCs趋化和迁移功能的调节作用研究[D]. 刘青武. 北京中医药大学, 2021(01)
- [2]为探索回阳、养阴生肌机制搭建急慢性创面LncRNA的CNC图[D]. 黄俊. 湖南中医药大学, 2020(03)
- [3]糖尿病肛漏应用美洲大蠊提取液的lncRNA高通量测序[D]. 李心甜. 湖南中医药大学, 2020(03)
- [4]黄芪注射液介导Wnt/β-Catenin信号通路调控表皮干细胞增殖分化促进糖尿病溃疡愈合的机制研究[D]. 仇莲胤. 上海中医药大学, 2019(03)
- [5]补益气血中药对体外培养人皮肤成纤维细胞增殖及生长因子表达的影响[D]. 孔令臻. 上海中医药大学, 2019(03)
- [6]外用生肌类散剂的用药规律分析及海贝散治疗压疮的临床疗效观察[D]. 王蕴珠. 北京中医药大学, 2017(08)
- [7]中医药调控糖尿病常见并发症bax表达的实验研究述评[J]. 陈聪,陈云志,喻嵘,秦钟,杨长福,庄田畋,薛蕾,李文. 天津中医药大学学报, 2017(02)
- [8]一效膏促进慢性皮肤溃疡创面修复的研究[D]. 柴政. 辽宁中医药大学, 2016(01)
- [9]活血化瘀中药促进创面愈合的研究进展[J]. 张晓芬,孙桂芳,陈亚峰,奉典旭. 光明中医, 2015(08)
- [10]中药炉甘石、赤石脂炮制机理及效应评价研究[D]. 周灵君. 南京中医药大学, 2012(01)