一、逆境对应激犬激素及血液生理生化指标的影响（论文文献综述）
权金强[1]（2021）在《非编码RNA参与虹鳟热应激的调控作用及其在ceRNA机制中的功能验证》文中认为虹鳟（Oncorhynchus mykiss）,属鲑科大麻哈鱼属,是一种典型的冷水性鱼类,然而,虹鳟对较高水温的耐受能力很差,其适宜生长水温为12℃～18℃,且必须在流水或微流水条件下养殖。在全球气候变暖和极端高温天气频发的大环境下,高温胁迫成为水产养殖产业面临的主要环境问题之一。因此,在我国大部分地区,夏季高温是虹鳟养殖环节中的最大威胁,很易造成虹鳟减产或大面积死亡。近年来,非编码RNA在机体生长、发育以及应激等过程中发挥重要的调控作用已受到广泛关注,由非编码RNA（如miRNA、lncRNA）介导的靶基因（mRNA）的调控,可能是应答热刺激、增强适应性的主要策略。因此,为了进一步深入揭示非编码RNA参与虹鳟肝脏热应激的调控机制,本研究通过高通量测序和生物信息学分析研究了正常组（18℃）和热处理组（24℃）虹鳟肝脏组织中非编码RNA及其靶基因参与竞争性内源RNA（ceRNA）调控的分子机制;利用双荧光素酶报告基因法验证了关键的novel-m0007-5p与hsp90ab1、LOC110485411之间的靶向关系;通过构建虹鳟原代肝细胞模型,进一步在细胞水平验证了LOC110485411—novel-m0007-5p—hsp90ab1参与热应激的调控机制。上述研究为缓解虹鳟热应激药物研发、抗热应激策略制定以及耐热品系的选育和改良提供了科学依据。研究主要获得的结果如下:1、通过慢性热应激下虹鳟肝脏组织中全转录组测序,从6个测序文库（对照组（CG）,n=3,热处理组（HS）,n=3）中共获得了4138个circRNA、5916个lncRNAs、67107个mRNA和2730个miRNA。通过严格的阈值共筛选出了324个显着差异表达circRNAs,428个差异表达的lncRNAs,105个显着差异表达miRNAs以及1885个显着差异表达的mRNAs。诸多差异表达的非编码RNA表明它们在虹鳟肝脏响应热应激的过程中发挥了重要作用。2、构建了circRNA-miRNA-mRNA的ceRNA调控网络,预测了一些重要的调控关系如novel＿circ＿003889-novel-m0674-3p-hsp90ab1,novel＿circ＿002325-mi R-18-y-HSPA13和novel＿circ＿002446-novel-m0556-3p-hsp70。一些参与代谢过程、生物调控或对刺激反应的基因在高温下被高度诱导（如hsp90ab1、hsp70和hspa13等）。发现了一些与热应激相关的重要通路,如内质网蛋白加工、雌激素信号通路和HIF-1信号通路等。这提示circRNA可能会通过对miRNA的调控来影响虹鳟肝脏响应热刺激的过程中HSPs蛋白的表达,而这些影响可能与蛋白质折叠与加工等途径有关。3、构建了lncRNA-miRNA-mRNA的ceRNA调控网络,一些重要的调控通路如内质网蛋白质加工通路、抗原加工和递呈、雌激素信号通路、NOD样受体信号通路、MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路等被显着富集;并发现了两个重要的调控关系对:LOC110485411-novel-m0007-5p-hsp90ab1和LOC110506561-mi R-8159-x-hsp90a.1。这提示lncRNA在虹鳟肝脏响应热刺激的过程中通过调控novel-m0007-5p、mi R-8159-x等miRNA的表达来影响靶基因蛋白的表达,从而发挥lncRNA的抗热应激功能。4、通过生物信息学方法预测了LOC110485411、novel-m0007-5p以及hsp90ab1之间的靶向关系,并构建了野生型重组载体（pmir GLO-hsp90ab1-WT、pmir GLOLOC110485411-WT）和突变型重组载体（pmir GLO-hsp90ab1-MUT、pmir GLOLOC110485411-MUT）,利用双荧光素酶报告基因法分别验证了LOC110485411与novel-m0007-5p以及hsp90ab1与novel-m0007-5p存在靶向关系。这表明LOC110485411、hsp90ab1是novel-m0007-5p的靶基因,由此我们推测LOC110485411可能是通过novel-m0007-5p发挥调控作用的。5、通过向虹鳟原代肝细胞中转染外源性novel-m0007-5p mimics和inhibitor,发现它们可以有效地与靶基因hsp90ab1和LOC110485411结合并发挥抑制或促进作用,而且对肝细胞活力、细胞增殖和凋亡无显着影响。热应激下过表达novel-m0007-5p对靶基因hsp90ab1和LOC110485411的抑制作用具有时效性;同样,siRNA沉默LOC110485411的表达也具有时效性,siRNA可以通过沉默LOC110485411的表达来影响hsp90ab1 mRNA的表达。这提示我们,在虹鳟原代肝细胞响应热刺激的过程中存在ceRNA调控机制,LOC110485411通过调控novel-m0007-5p的表达来影响了靶基因hsp90ab1的表达,以此来抵抗热刺激。
陈妍[2]（2020）在《急性冷暴露对断奶仔猪血液代谢指标及部分免疫指标的影响》文中提出冷应激是我国寒冷地区畜牧业面临的最普遍的一种环境气候逆境因素,严重影响着畜禽健康发展。本研究以30日龄断奶仔猪为研究对象,旨在探讨急性冷暴露对仔猪血液代谢指标及部分免疫指标的影响。选取体况相近健康断奶仔猪16头,随机分为常温对照（Normal temperature,NT）组、冷暴露2 h（Cold exposure 2 h,CE2h）组、冷暴露6 h（CE6h）组和冷暴露12 h（CE12h）组,每组4头。NT组饲养温度为24±2℃,CE组饲养温度为4±2℃。通过检测不同冷暴露时间断奶仔猪动脉血电解质与血气参数以及血清皮质醇（CORT）的水平变化,来评估断奶仔猪的应激状态。结果显示,断奶仔猪动脉血pH无显着变化（P>0.05）,二氧化碳分压（PCO2）,二氧化碳总量（tCO2）,碳酸氢根离子（HCO3-）在冷暴露12 h期间显示出先下降后恢复的变化趋势,其中tCO2（P<0.05）、HCO3-（P<0.01）在CE6h组显着低于NT组,钠离子（Na+）,钾离子（k+）,氯离子（Cl-）和阴离子间隙（AnGap）的水平显示出先上升后恢复的变化趋势,Na+（P<0.05）,k+（P<0.01）,Cl-（P<0.05）和AnGap（P<0.001）在CE6h组显着高于NT组。血清中CORT水平显示出先上升后恢复的变化趋势,在CE6h组显着高于NT组（P<0.01）。这些结果表明,冷暴露6 h诱导断奶仔猪体内酸碱失衡,血清CORT水平升高,断奶仔猪急性冷暴露模型构建成功。为探究急性冷暴露对断奶仔猪血液代谢指标的影响,通过生化分析、ELISA试剂盒来检测断奶仔猪血液中代谢产物葡萄糖（Glu）、总蛋白（TB）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、肌酸激酶（CK）、钙（Ca）、无机磷（P）、总胆红素（TBil）、甘油三酯（TG）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、淀粉酶（AMY）、花生四烯酸（AA）和谷氨酰胺（GLN）的水平变化。结果显示,Glu、Cr、CK的水平在冷暴露12 h期间显示出先下降后恢复的变化趋势,Cr（P<0.05）、CK（P<0.01）在CE6h组显着低于NT组;TB、ALB、GLO、P、TBil、TG、AA和GLN的水平显示出先上升后恢复的变化趋势,TB（P<0.001）、ALB（P<0.01）、GLO（P<0.01）、P（P<0.001）、TBil（P<0.05）、TG（P<0.01）、AA（P<0.01）和GLN（P<0.05）的水平在CE6h组显着高于NT组;BUN、Ca、AST、ALT、AMY的水平无显着性变化（P>0.05）。这些结果表明,急性冷暴露可引起断奶仔猪血清中Glu、TB、ALB、GLO、Cr、P、TBil、TG、CK、AA和GLN水平明显的改变。为探究急性冷暴露对断奶仔猪血液部分免疫指标的影响,通过ELISA试剂盒和qRT-PCR来检测血液中免疫球蛋白、炎性细胞因子以及应激蛋白HSP70的水平变化。结果显示,IgG和IgM的水平无显着性变化（P>0.05）。炎性细胞因子肿瘤坏死因子（TNF）-α和白介素（IL）-6 mRNA水平显示出先上升后恢复的变化趋势,在CE6h组显着高于NT组（P<0.001）;IL-10 mRNA水平显示出先下降后恢复的变化趋势,在CE6h组显着低于NT组（P<0.001）。热休克蛋白70（Heat shock protein 70,HSP70）mRNA水平显示出先上升后恢复的变化趋势,在CE2h组和CE6h组极显着高于NT组（P<0.001）。表明急性冷暴露可引起断奶仔猪全血中炎性细胞因子TNF-α,IL-6,IL-10以及应激蛋白HSP70mRNA水平发生变化。结论:断奶仔猪急性冷暴露模型构建成功;急性冷暴露可引起断奶仔猪血清中Glu,TB,ALB,GLO,TBil,Cr,CK,TG,P,AA和GLN水平明显的改变,全血中炎性细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10和应激蛋白HSP70 mRNA的表达发生显着的变化,使机体在糖代谢、脂质代谢、蛋白质代谢、氨基酸代谢和能量稳态等方面存在多种调节,同时激活固有免疫来维持机体稳态平衡。
陈一尘[3]（2020）在《肝癌病人慢性应激的测评及其对认知功能的影响》文中研究说明肿瘤是当前威胁人类的重要疾病之一,调查发现中国癌症病人的新发和死亡人数都排在世界前列,且每年还在继续增长,在癌症人口日益增长的背景下,关注癌症患者的身心困扰问题是心理学的重要议题。相对于其他癌种,肝癌多发于我国且死亡率较高,前期症状不明显,术后预后相对较差,病人更易处于应激状态。癌症不仅对患者的生理健康构成直接威胁,也会造成患者的心理痛苦。由于癌症患者处在典型的应激环境中,且暴露时间从确诊持续到结束治疗之后,因而属于典型的慢性应激人群。以往研究发现癌症患者普遍存在认知方面的问题,并可能对工作记忆这一认知功能的重要组成部分产生影响。但以往的癌症研究对象以女性和少部分癌种为主,没有关于肝癌患者的认知功能研究,先前研究的应激评估方法也较为局限,并未将现有量表测量和生理指标相结合进行系统评估,也缺乏癌症病人的慢性应激水平对认知功能和工作记忆的影响研究。因此,本研究参考了先前慢性应激的量表和生理评估方法,对93名肝癌患者进行了应激的多角度评估,希望探索慢性应激量表的测量效度,研究采用癌症患者认知功能评估量表,对肝癌患者的认知功能进行了测评,并完成了空间工作记忆广度任务和操作广度任务,对肝癌患者的工作记忆能力进行了评估,为慢性应激与认知及工作记忆的相关研究提供证据。研究一旨在探究生理指标和心理问卷测量相结合的慢性应激评估方法,创新性地引入了非稳态负荷指标测量临床癌症病人的应激水平。旨在考察心理量表与生理指标的相关性和测量效度。研究采用感知应激量表、事件影响量表和NCCN痛苦温度计进行肝癌患者慢性应激的量表评估,其中既有普遍应激水平的评估,也有针对临床患者的应激问卷。在生理指标方面,研究收集了患者的毛发皮质醇浓度、心率变异性、C反应蛋白、白细胞介素-6、纤维蛋白原、BMI指数和血压等生理应激数据,并且应用非稳态负荷概念将生理指标进行整合。研究发现了舒张压和BMI指数与事件影响量表的显着正相关（r1=0.25,r2=0.31）,没有发现其他应激量表与应激生理指标关系的显着结果,应激量表结果和非稳态负荷也不存在显着相关。在应激生理评估的简化上,心率变异性指数与C反应蛋白（r=0.57）和纤维蛋白原水平（r=0.45）显着正相关,未来应激评估中心率变异性指数有替代部分血液生化指标的可能。研究二考察了肝癌患者慢性应激水平对认知功能的影响。研究二在先前研究收集应激数据的基础上增加了癌症患者认知功能评估量表,目的是探讨慢性应激水平与认知功能的关系。结果发现感知应激量表（r=-0.588）、事件影响量表（r=-0.712）和NCCN痛苦温度计（r=-0.377）与癌症患者认知功能量表结果显着负相关。研究三考察了肝癌患者慢性应激水平对工作记忆的影响。研究在应激数据的基础上采用空间工作记忆广度任务和操作广度任务,探究慢性应激水平对工作记忆任务水平的影响。结果发现三种应激量表和生理指标与肝癌患者的工作记忆水平相关不显着。综上所述,本研究对肝癌患者的慢性应激水平进行了评估,同时探究了慢性应激水平对认知功能及工作记忆的影响。研究讨论了慢性应激评估的综合性和简便化的可能,得出应激量表仅与部分生理评估相关的结论,研究发现心率变异性与C反应蛋白和纤维蛋白原指标有关联,未来可能以心率结果代替部分生理指标。研究发现了患者慢性应激水平会负向影响认知功能,但未发现慢性应激水平对工作记忆任务结果的影响。研究在一些方面具有创新价值:研究引入了临床应激量表和大量生理指标对肝癌患者进行评估,采用了应激评估新的技术,并将非稳态负荷这一概念引入癌症患者的应激评估;在研究群体上,研究关注癌症患者这一典型应激人群,对患者心理健康干预和认知功能的改善具有重要意义;研究相比于前人研究,关注了更为多元的癌症患者群体,补充了先前研究被试群体的空白,研究发现慢性应激会影响患者的普遍认知功能,但不会影响患者的工作记忆能力。
张折折[4]（2020）在《胚胎期暴露炎症和青春期应激对老年CD-1小鼠认知和突触蛋白的影响》文中认为背景:大量研究表明,胚胎期暴露炎症对个体神经系统的发育有不利影响,可以导致老年期认知行为的改变。突触蛋白表达的变化可用于评估突触可塑性,并进一步评估学习和记忆,且某些突触蛋白的表达水平变化与年龄相关性空间学习记忆能力下降（AISLM）相关。本课题组先前研究发现,胚胎期暴露炎症和青春期应激会加速AISLM及某些突触蛋白（如Synaptotagmin-1即Syt-1,Syntaxin-1,postsynaptic density protein 95等）表达的改变。然而,这些研究仅停留在蛋白质分子的水平上,而其上游的m RNA水平是否也发生了改变,及是否与AISLM有关?此外,与认知相关的其它突触蛋白是否也参与其中,比如活动相关的细胞骨架相关蛋白（Arc）?胚胎期暴露炎症联合青春期应激处理是否会影响AISLM和突触蛋白的表达,为探讨脑衰老的机制及寻找有效防止脑衰老的方法提供了新的思路。目的:探究胚胎期暴露炎症和青春期应激对老年CD-1小鼠空间学习记忆、海马突触蛋白及其m RNA（Arc和Syt-1）表达的影响。方法:CD-1母鼠在妊娠15-17天每天接受腹膜内注射50μg/kg脂多糖（LPS）或等容积的生理盐水,随机抽取部分子鼠在青春期（2月龄）给予应激处理,即小鼠每天随机抽取悬吊、束缚、夜间光照或夜间禁食等一种方法处理,四天一周期,共七个周期。此时,小鼠共分为四组:对照组（CON）、对照应激组（CON+S）、LPS组（LPS）、LPS应激组（LPS+S）。在子鼠3月龄和15月龄时采用Morris水迷宫（MWM）评估其空间学习和记忆能力,MWM测试后15天处死小鼠,取脑组织,利用免疫组织化学和Western Blotting检测海马突触蛋白Arc和Syt-1的表达水平,及使用RNA-scope技术检测Arc m RNA和Syt-1 m RNA在海马不同区域的表达水平。结果:（1）Morris水迷宫:与3月龄CON组相比,15月龄CON小鼠学习期路程明显延长,记忆期靶象限内的路程百分比明显降低（Ps<0.05）。与同龄CON组相比,3月龄和15月龄处理组小鼠学习期路程均显着延长,且LPS组小鼠路程比CON+S组延长而比LPS+S组路程明显缩短（Ps<0.05）;不同处理组小鼠记忆期靶象限内路程百分比明显减少,且LPS组路程百分比显着低于CON+S组而高于LPS+S组（Ps<0.05）。（2）突触蛋白表达:与3月龄CON组相比,15月龄CON小鼠海马Arc和Syt-1蛋白量和各亚区Arc和Syt-1 m RNA水平均明显升高（Ps<0.05）。与同龄CON组相比,3月龄和15月龄不同处理组小鼠Arc和Syt-1蛋白表达水平显着升高（Ps<0.05）,且LPS、LPS+S组明显高于CON+S组（尤其是LPS+S组）（Ps<0.05）。此外,3月龄和15月龄LPS+S组Arc m RNA在海马CA1、CA3区的表达显着高于CON、CON+S和LPS组（Ps<0.05）,15月龄LPS组比CON组（CA1、CA3区）和CON+S组（CA3区）Arc m RNA明显增高（Ps<0.05）。3月龄LPS+S组小鼠Syt-1 m RNA在海马CA3区显着高于CON、CON+S和LPS组（Ps<0.05）;15月龄LPS、LPS+S组小鼠Syt-1 m RNA在海马CA1、CA3区水平显着高于CON（Ps<0.05）,LPS组比CON组（CA1、CA3区）和CON+S组（CA3区）Syt-1m RNA水平明显增高（Ps<0.05）。（3）相关分析表明:3月龄LPS、LPS+S组及15月龄各组小鼠Arc和Syt-1蛋白水平升高与学习期路程显着正相关（Ps<0.05）,而与记忆期靶象限内路程百分比显着负相关（Ps<0.05）。小鼠海马CA1、CA3区Arc m RNA和Syt-1 m RNA水平改变与小鼠学习记忆能力改变显着相关（Ps<0.05）。结论:胚胎期炎症暴露或青春期应激可加剧AISLM及海马突触蛋白Syt-1和Arc表达的增加,并且胚胎期炎症和青春期慢性应激二者具有协同恶化作用。
邹华围[5]（2019）在《饥饿后恢复饲喂和β-羟基丁酸灌注对牦牛脂肪代谢的影响》文中研究表明饥饿是影响青藏高原放牧牦牛冷季生产性能和机体健康的主要因素。随着饥饿时间的延长,血糖水平降低,机体通过分解肝糖原和肌糖原以及动员脂肪和蛋白质降解满足动物的基本生命活动需求。其中脂肪是饥饿动物最主要的能量来源,通过在肝脏氧化生成β-羟基丁酸（BHBA）等酮体为肝外组织供能,BHBA是动物体内最主要的酮体。近年来研究发现BHBA除了作为能源物质外,还能作为信号物质调控机体代谢。因此,本试验通过建立饥饿牦牛动物模型,利用qPCR、Western Blot、高通量测序和代谢组学等技术,研究恢复饲喂和BHBA静脉灌注对饥饿牦牛脂肪代谢的影响,以期阐明牦牛应对饥饿胁迫的瘤胃微生物和脂肪代谢的适应性变化,并揭示其影响机理。试验一 牦牛饥饿模型建立与恢复饲喂效果评价本试验选用健康无病、年龄相同和体重相近的九龙牦牛公牛12头,随机分为正常饲喂组和饥饿组。正常饲喂组全期自由采食,饥饿组进行绝食处理。在饥饿前和饥饿第7天对牦牛称重、采血和采集瘤胃液,评价牦牛饥饿模型。在饥饿模型建立成功后,饥饿牦牛恢复正常饲喂,评价饥饿后恢复饲喂效果。结果表明:（1）饥饿导致牦牛体重损失,日增重为负值,血清中葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）浓度显着降低（P<0.05）,非酯化脂肪酸（NEFA）、BHBA显着升高（P<0.05）,脂肪分解代谢增强,饥饿模型建立成功。（2）饥饿显着降低了瘤胃微生物多样性指数,增加了厚壁菌门与拟杆菌门比例,减少了淀粉和蛋白降解菌Prevotella 1、丙酸生成菌Succiniclasticum及纤维降解菌Ruminococcaceae NK4A214 group的丰度（P<0.05）,瘤胃内乙酸、丙酸、丁酸、总挥发性脂肪酸、氨氮和微生物蛋白浓度显着降低（P<0.05）,瘤胃发酵减弱。（3）饥饿后牦牛血清中脂肪合成酶脂肪酸合成酶（FAS）活性显着降低（P<0.05）,脂肪分解酶脂酰辅酶A氧化酶（ACOX）和激素敏感酯酶（HSL）活性显着升高（P<0.05）,促进脂肪分解代谢。（4）饥饿后恢复饲喂牦牛日增重比正常饲喂牦牛提高了376.32%（P<0.05）。恢复饲喂期的饥饿组牦牛对粗蛋白（CP）、粗脂肪（EE）和酸性洗涤纤维（ADF）的表观消化率显着高于正常饲喂组（P<0.05）,料重比（F/G）比正常饲喂组牦牛降低了78.00%（P<0.05）,补偿生长效应显着（P<0.05）。（5）恢复饲喂后,牦牛瘤胃微生物多样性指数ChaoⅠ比饥饿期显着升高,但仍显着低于饥饿前（P<0.05）。瘤胃降解淀粉和蛋白的Prevotella 1和琥珀酸生成菌Succinivibrionaceae UCG-002等的丰度显着增加（P<0.05）,广古菌门显着降低（P<0.05）,瘤胃内乙酸、总挥发性脂肪酸和NH3-N浓度比饥饿期显着升高,丙酸和MCP显着高于饥饿前（P<0.05）,乙酸/丙酸显着降低。（6）恢复饲喂后,血清中脂肪合成酶FAS活性较饥饿期显着升高（P<0.05）,脂肪分解酶ACOX和HSL活性较饥饿期显着降低（P<0.05）。血清中NEFA和BHBA浓度比饥饿期显着降低（P<0.05）,脂肪分解代谢受到抑制。以上结果表明牦牛饥饿后体重降低,瘤胃微生物多样性和丰度降低,瘤胃发酵减弱,脂肪分解代谢增强,BHBA显着增加。恢复饲喂后,牦牛瘤胃微生物多样性和丰度增加,瘤胃发酵增强,血清BHBA浓度显着降低,脂肪分解代谢被抑制,日增重显着增加,补偿生长效应显着。试验二 饥饿和恢复饲喂对牦牛血清和尿液代谢组的影响在试验一的基础上,利用LC-MS检测了饥饿组牦牛饥饿前（正常饲喂期,NFP）、饥饿期（SP）和恢复饲喂期（RFP）血清和尿液的代谢组变化。结果表明:（1）与正常饲喂期相比,饥饿显着增加了血清中3-羟基癸酸、月桂酸和十四酸等饱和脂肪酸的浓度（P<0.05）,显着降低了3-磷酸甘油、丙酮酸盐、乌头酸、柠檬酸等的浓度（P<0.05）,显着增加了促进脂肪分解的支链氨基酸浓度,甘油磷脂和甘油脂分解代谢增强,三羧酸循环（TCA循环）途径受到抑制。（2）与正常饲喂期相比,饥饿显着降低了尿液中游离脂肪酸浓度,显着增加了β-羟基丁酸、丙酮、油酸酰胺、甘油磷酸胆碱等脂肪分解产物和癸酰肉碱浓度（P<0.05）,并显着增加了尿液中异丙肾上腺素和环磷酸腺苷（cAMP）浓度（P<0.05）,显着降低了乳酸盐、琥珀酸和乌头酸的浓度。酮体的合成途径增强,TCA循环途径被抑制。（3）与饥饿期相比,恢复饲喂显着降低了血清中饱和脂肪酸浓度,显着增加了3-磷酸甘油、丙酮酸盐、乌头酸和柠檬酸等的浓度（P<0.05）,甘油脂和甘油磷脂分解代谢受到抑制,TCA循环途径增强。（4）与饥饿期相比,恢复饲喂显着降低了尿液中β-羟基丁酸、丙酮、甘油磷酸胆碱等脂肪分解产物和癸酰肉碱浓度（P<0.05）,显着增加了辛二酸、十二烯酸、庚二酸、花生四烯酸和十二烷二酸等脂肪酸浓度（P<0.05）,显着降低了尿液中氨基酸浓度（P<0.05）,显着增加了尿液中乳酸盐、琥珀酸和乌头酸浓度,但显着降低了3-磷酸甘油酸、苯丙酮酸、葡糖酸浓度（P<0.05）,并显着降低了异丙肾上腺素和cAMP浓度（P<0.05）,酮体的合成被抑制,TCA循环途径增强。（5）与正常饲喂期相比,恢复饲喂显着降低了血清中甘油磷酸胆碱、亚油酸、十四酸和3-磷酸甘油浓度（P<0.05）,显着增加了柠檬酸的浓度（P<0.05）。（6）与正常饲喂期相比,恢复饲喂显着增加了尿液中不饱和脂肪酸及其衍生物浓度,显着降低了苯丙氨酸和脯氨酸等游离氨基酸浓度（P<0.05）,显着降低了苯丙酮酸和葡糖酸浓度（P<0.05）,氮代谢利用率高于正常饲喂期。上述结果表明,饥饿导致饱和脂肪酸氧化分解增加,BHBA等酮体合成增加,三羧酸循环途径减弱。恢复饲喂后脂肪分解作用减弱,BHBA等酮体合成代谢被抑制。试验三 静脉灌注β-羟基丁酸对饥饿牦牛脂肪代谢的影响选用年龄和体重相近的九龙牦牛公牛18头,随机分为正常饲喂组（NG）、饥饿组（SG）和BHBA灌注组（SBG）。正常饲喂组全期自由采食,饥饿组和BHBA灌注组全期绝食处理,从试验第7天开始进行连续48小时的静脉灌注,正常饲喂组和饥饿组等量灌注0.9%生理盐水,BHBA灌注组灌注1.71 mmol/L的BHBA溶液,研究揭示饥饿和脂肪分解产物BHBA对牦牛脂肪代谢及其信号通路关键基因和蛋白表达的影响。结果表明:（1）饥饿后牦牛血清GLU浓度在饥饿第3天显着降低后维持低水平稳定,TG和TC浓度显着降低（P<0.05）,BHBA和NEFA浓度分别在饥饿第1天和第3天显着增加后维持高水平稳定（P<0.05）。灌注BHBA显着降低了饥饿牦牛血清NEFA浓度（P<0.05）,血清中TG浓度比饥饿组提高了25.00%（P>0.05）。（2）饥饿显着降低了血清中胰岛素（INS）、生长激素（GH）和脂联素（APN）浓度（P<0.05）,显着升高了胰高血糖素（GC）和皮质醇（Cor）浓度（P<0.05）。灌注BHBA显着降低饥饿牦牛血清GC浓度（P<0.05）,显着增加了INS和APN浓度（P<0.05）,但对GH和胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）影响不显着（P>0.05）。（3）饥饿组和BHBA灌注组牦牛皮下脂肪组织中饱和脂肪酸（SFA）比例较正常饲喂组显着降低（P<0.05）,单不饱和脂肪酸（MUFA）和多不饱和脂肪酸（PUFA）比例显着增加（P<0.05）。饥饿显着降低牦牛皮下脂肪组织中脂肪细胞直径和面积（P<0.05）,灌注BHBA显着增加饥饿牦牛脂肪细胞直径和面积,但仍显着低于正常饲喂组（P<0.05）。（4）饥饿显着降低了皮下脂肪组织中脂肪合成酶ACC、DGAT1和FAS的活性（P<0.05）,显着增加了脂肪分解酶ACOX和HSL的活性（P<0.05）,脂肪分解代谢增强。灌注BHBA显着提高了饥饿牦牛皮下脂肪组织中ACC和DGAT1活性（P<0.05）,显着降低了ACOX和HSL的活性（P<0.05）,抑制了脂肪分解代谢。（5）饥饿显着降低了牦牛皮下脂肪组织中脂肪代谢关键因子C/EBPα、SREBP1和PPARγ的m RNA和蛋白表达量（P<0.05）,显着增加了FOXO1的m RNA和蛋白的表达量（P<0.05）。灌注BHBA显着提高了饥饿牦牛皮下脂肪组织中C/EBPα、SREBP1和PPARγ的m RNA和蛋白表达量（P<0.05）,显着降低了FOXO1的m RNA和蛋白表达量（P<0.05）,促进脂肪合成代谢。（6）饥饿显着上调了皮下脂肪组织中PKA和CREB的m RNA和蛋白表达量,下调了MEK、PKC和ERK1/2的m RNA表达量（P<0.05）。相比于饥饿组牦牛,灌注BHBA显着促进了受体GPR109A的m RNA和蛋白的表达（P<0.05）,抑制了AC和PKA的m RNA和蛋白的表达,下调了CREB的磷酸化水平,但对MEK、PKC和ERK1/2的m RNA和蛋白表达量没有显着影响（P>0.05）。以上结果表明饥饿显着降低了牦牛血清中INS、GH和APN等激素,抑制MEK/PKC/ERK1/2信号通路关键基因和蛋白表达,促进cAMP/PKA/CREB信号通路关键基因和蛋白表达,促进脂肪分解代谢。灌注BHBA促进GPR109A受体m RNA和蛋白表达,抑制cAMP/PKA/CREB信号通路关键基因和蛋白表达,抑制脂肪分解。综上所述,饥饿导致牦牛体重损失,瘤胃微生物多样性和丰度降低,瘤胃发酵减弱,脂肪分解代谢增强。恢复饲喂后瘤胃栖瘤胃普雷沃氏菌和琥珀酸弧菌等丰度增加,广古菌门降低,瘤胃发酵增强,脂肪分解代谢被抑制。饥饿牦牛主要通过氧化饱和脂肪酸供能,甘油磷脂和甘油酯分解代谢增强,三羧酸循环途径被抑制,酮体合成途径增强。恢复饲喂后甘油磷脂和甘油酯分解代谢减弱,三羧酸循环途径增强。饥饿降低牦牛血清中INS、GH和APN浓度,增加异丙肾上腺素等激素浓度,促进cAMP/PKA/CREB信号通路关键基因和蛋白表达,抑制MEK/PKC/ERK1/2信号通路关键基因和蛋白表达。灌注BHBA上调皮下脂肪组织中受体GPR109A的m RNA和蛋白表达,抑制cAMP/PKA/CREB信号通路关键基因和蛋白表达,抑制脂肪分解。
田沛[6]（2019）在《不同温度水疗干预对大鼠慢性应激损伤的防护效应及机制》文中研究指明应激与人类健康密切相关,适度的应激可调动防御机制对机体有利,但持续过高强度的慢性应激会在生理、心理和行为等方面对机体产生不良影响,甚至引起多种应激性疾病。研究表明,持续较高强度的应激负荷可造成机体损伤,影响个体健康、降低工作效率、导致疲劳;甚至会诱发多种疾病,发生猝死等极端事件。研究表明,75%90%的人类疾病和应激有关。心血管是应激所致损伤的首要靶器官,多种应激动物模型（如噪声、电击、束缚、湿热和力竭游泳等）均证实,应激可引起心肌损伤和血管内皮功能障碍,引发或加重心血管疾病。飞行人员作为一个特殊群体,长期应对航空特殊环境（噪声、振动、加速度、缺氧等）和特殊情况（雷暴、大风等特殊气象,空中发动机故障等特殊事件）所造成的各种心理生理应激。飞行人员所面临的应激因素更加复杂、刺激强度更加强大、危害程度更加严重。飞行人员虽然经过层层严格健康选拔,但心血管病还是时有发生,且心血管病后果严重,减少飞行寿命,甚至危及飞行安全。调查发现,我国军事飞行员高血压患病率在2.59.8%,而高血压前期人数比例却高达38.1%。然而,目前关于飞行应激损伤机制和防护措施研究还相对比较滞后,尚远远不能满足航空事业飞速发展的现实需要,特别是国内对应激损伤干预手段还主要以精神心理卫生干预为主、药物治疗为辅,非药物措施十分缺乏,因此寻找一种安全、无创、简单、快速、有效,具有防应激、抗疲劳作用的措施办法显得更加迫切和重要。水疗法（Hydrotherapy）作为一种传统康复疗法具有无创、安全、高效等特点,主要利用水对人体产生的温度、机械和化学刺激,达到治疗和预防疾病的目的。当前水疗在运动医学和康复医学领域发展迅速。临床实践表明,水疗对高血压、类风湿性关节炎、脑瘫等多种疾病以及亚健康的预防和康复具有明显有益效果,同时也被应用于高水平运动员运动后疲劳和损伤的恢复。可能主要与水的温热效应促进血液循环、调控细胞代谢、诱导热休克蛋白的合成与释放、降低氧化应激反应等有关。然而,国内外对于不同温度水疗干预是否能够缓解慢性应激及其造成的心血管损伤尚未见报道。我国关于水疗的应用虽然具有悠久历史,但长期以来水疗在现代医学和军事医学中的作用未被充分认识和应用,国内外虽有研究观察了水疗后人体生理生化指标的改变,仍缺乏系统性的基础理论研究,针对水疗的生物学效应和机制尚未完全阐明。因此,本研究拟通过构建慢性应激大鼠动物模型,观察不同温度水疗干预对慢性应激损伤尤其是心血管损伤的影响,探寻最优的抗慢性应激损伤水疗干预方案,并研究其机制。实验目的1.观察热水浴、冷水浴、常温水浴和冷热交替水浴4种不同温度水疗干预方案对大鼠慢性应激损伤的防护效果。2.研究特定水疗干预方案的在慢性应激所致心血管损伤中的保护效应及机制。实验方法1.建立慢性应激动物模型:选取8周龄成年雄性SD大鼠,采用噪声复合足底电击刺激诱导大鼠应激模型,电流强度35 m A,随机间隔220 s,持续电击12 s,随机电击结束当天夜间继续给予持续噪声（2002000 Hz,80100 d B）,每天电击4小时（上下午各1次,每次2小时）,噪声刺激4小时,共持续28天。2.水疗干预方案:每天下午大鼠电击刺激结束,自由饮食休息1小时后给于水疗干预处理,水疗在特制塑料圆筒（直径20 cm,高60 cm）中进行,水深1025 cm,时间10 min。水温根据具体实验分组方案分别设定,其中热水浴（Hot water immersion,HWI）水温3840℃;冷水浴（Cold water immersion,CWI）水温1315℃;常温水浴（Thermoneutral water immersion,TWI）水温3436℃;冷热交替水浴（Contrast water therapy,CWT）的热水温3840℃,冷水温1315℃,热水2 min后换入冷水1 min,交替循环3次,共10 min。3.血压测量:隔天于电击结束后2 h使用智能无创血压计测量各组大鼠的尾动脉收缩压（SBP）和舒张压（DBP）,每隔4天测量1次,每只大鼠测量5次取平均值。4.血清激素和炎症因子等测定:采用ELISA法测定血清中应激激素皮质醇（Cor）、血管紧张素Ⅱ（Ang II）、去甲肾上腺素（NE）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）含量,应激28天后采用30 g/L戊巴比妥钠按50 mg/kg腹腔注射麻醉,取腔静脉血,离心,检测血清Cor、Ang II、NE、TNF-α、CK和LDH含量。5.测定肠系膜血管收缩和舒张功能:使用微血管灌流仪（DMT）对大鼠肠系膜微动脉进行功能检测。血管初始预负荷设置为2 m N,稳定1 h,随后用60 mmol/L KCl溶液作用血管2次,选取收缩幅度相差<10%,且张力大于l m N的血管。血管功能测定时,采用浓度累加法,分别加入血管舒张和收缩试剂。最后,根据舒张程度和数值,评定血管舒张和内皮功能;根据收缩程度和数值,评定血管平滑肌收缩功能。6.免疫荧光染色:石蜡切片脱蜡,蒸馏水和PBST漂洗,正常血清封闭液室温封闭20 min,滴加LC3II一抗工作液。湿盒内37℃恒温箱内孵育1小时,PBST漂洗,滴加二抗工作液,湿盒内37℃恒温箱内孵育20 min,PBST漂洗后滴加荧光素工作液,湿盒内37℃恒温箱内孵育30 min,避光保存,PBST充分漂洗,滴加2050μl DAPI,充分漂洗后用封片剂进行封片。倒置荧光显微镜观察,采集图像。7.透射电镜及线粒体数目测算:将新鲜心肌组织切成1 mm3的组织块,置于30ml/L戊二醛磷酸缓冲液中,4℃避光固定。梯度乙醇脱水和丙酮浸5 min,Epon812包埋,制成超薄切片,在透射电镜下观察心肌线粒体超微结构并测算数目。8.Western blotting检测蛋白水平:采用RIPA提取大鼠左心室和腹主动脉血管组织蛋白,BCA法进行蛋白定量。将蛋白样品（每孔5-10μL）行SDS-PAGE电泳后转移至PVDF膜。在50 g/L脱脂牛奶中室温封闭1 h,加入相应一抗（1:1000）4℃孵育过夜,洗去多余一抗后加入相应二抗,37℃孵育1 h,洗去多余二抗后使用ECL-Plus试剂盒进行化学发光检测,β-actin为各组内参对照。用成像软件系统（aplegen Omega Lum C）进行条带光密度值分析。9.行为学实验:旷场实验和高架十字迷宫实验均在安静的环境下进行,分别将大鼠放入旷场反应箱内底面中心/高架十字迷宫中心,同时开启摄像并计时,旷场实验和高架十字迷宫实验均观察5 min后停止摄像。10.采用Graph Pad Prism version 8.0统计软件进行统计学分析。实验结果表示为平均数±标准差,P<0.05为差异有统计学意义。实验结果1.噪声复合足底电击28天能够成功构建大鼠慢性应激损伤模型。与对照组大鼠相比,应激组大鼠存在明显应激反应和心血管损伤,主要表现为体重显着降低（P<0.01）、血糖明显升高（P<0.05）、血压明显升高（P<0.05）,血清Cor、NE、Ang II、TNF-α、ADMA浓度和CK、LDH水平升高（P<0.05）;血清中NO含量降低（P<0.05）;心肌组织自噬相关蛋白LC3II/I、p62、Beclin1表达增加（P<0.05）,线粒体数量减少并呈现结构紊乱。此外,旷场实验和高架十字迷宫实验结果表明大鼠自发活动行为及探索行为明显减少,焦虑增加。2.不同温度水疗干预对大鼠慢性应激的效应各不相同,长期热水浴干预改善慢性应激的效果最佳。与应激组大鼠相比,每天仅10分钟的热水浴干预,就能显着降低大鼠全身的慢性应激反应,减缓应激大鼠的体重下降,加速应激后血糖水平的恢复,逆转应激大鼠的血压升高（P<0.05）,降低应激大鼠焦虑水平,改善应激大鼠自发活动和探索行为（P<0.05）。此外,冷热交替水浴也可逆转应激大鼠的血压升高,但起效较晚,直到干预末期（24天）才出现血压降低（P<0.05）。而其他温度水疗干预对应激大鼠体重、血压、血糖和行为学等均无明显影响（P>0.05）。3.热水浴能有效改善慢性应激大鼠血管内皮功能。与应激组大鼠相比,热水浴组大鼠内皮依赖的血管舒张显着改善,血清NO水平升高（P<0.05）、ADMA浓度下降（P<0.05）,血管组织e NOS磷酸化水平、DDAH1表达水平增加（P<0.05）。在培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中每天10分钟40℃孵育能较好模拟热水浴对血管内皮的效应,体现为温热孵育使应激激素处理后HUVECs分泌NO增加,ADMA浓度下降,DDAH1表达增加,使用si DDAH1可特异性阻断DDAH1表达,从而增加ADMA浓度,降低NO分泌水平。4.热水浴能有效减轻慢性应激大鼠心肌损伤。与应激组大鼠相比,热水浴组大鼠CK、LDH水平降低,p62和Beclin1表达水平减少（P<0.05）,心肌线粒体结构损伤亦有所逆转。结论1.本研究首次发现,长期热水浴较冷水浴、常温水浴和冷热交替水浴等其他温度水浴能有效减轻大鼠慢性应激状态。2.热水浴降低慢性应激诱发的血压升高,其机制与热水浴增加内皮DDAH1表达、降低内源性e NOS抑制物ADMA生成,从而增加内皮NO生物利用度有关。3.热水浴调控应激所致心肌细胞自噬紊乱和促进心肌线粒体结构恢复,减轻慢性应激性心肌损伤。热水浴可望作为缓解慢性应激、预防应激性高血压和心肌损伤的有效防护手段。
刘林林[7]（2019）在《岛礁驻守人员应激指标的相关性研究及应激快速检测试纸的研制》文中研究说明研究背景:特殊工作和职业环境所致的应激反应对机体的影响,一直受到人们的关注。岛礁驻守人员作为国家安全的守卫力量,是一个具有特殊化使命和任务的群体。随着中国实力的不断发展,沿海方向国际形势更趋复杂,重视并关注岛礁驻守人员的心身健康成为必然趋势。应激检测是应激预警、干预、防护以及身心健康维护的基础和前提,而传统应激评估方法因受到耗时长、主观性大、需要专业人员实施等因素的限制,其可靠性、时效性和普及性有待提高。因此,深入研究应激生理标志物的响应规律,研发简单、快速、客观的应激评估方法和/或设备显得尤为重要。研究目的:首先,从应激检测的多个方法和手段出发,运用心理学问卷调查、行为学仪器测量和唾液样本检测,结合入伍时间、文化程度、婚姻状况等人口学特征,全面分析岛礁环境对驻守人员身心健康的影响及相关因素。其次,从应激反应的多个方面和层次出发,探索心理学、行为学和生理学指标的相关性,筛选出客观稳定的应激生理评价指标。最后,以人体唾液为样本,利用免疫层析技术原理,研发基于客观生理指标和三维纸质微流控技术的无创、实时、快速、简便的应激自我检测试纸,实现在13min内完成应激水平的快速检测,为应激检测开辟全新思路和方法。研究方法:1、采用随机抽样的方法,对某偏远海岛军人（后称岛礁驻守人员）和沿海陆地军人（后称陆地人员）各80名进行应激心理学、行为学和生理学指标的测量,心理学指标主要以团体应激评价量表、焦虑自评量表和抑郁自评量表为主,行为学指标主要包括对声音反应时和肢体协调性测量,生理学指标使用ELISA方法检测唾液皮质醇、IL-1β、IL-6浓度。最后,应用SPSS统计学软件对数据结果进行对比分析。2、使用统计学Pearson或Spearman相关分析应激水平的心理学、行为学和生理学指标相关性,并结合国内外文献,筛选确认唾液内特异性应激检测客观标志物,为应激快速检测试纸的研发提依据。3、以人体唾液为检测样本,以三维纸质微流控芯片技术为基础,以免疫层析技术为原理,研制应激快速检测试纸,并在部队试用,验证其可行性和准确性,以便下一步的改进和完善。研究结果:1、岛礁驻守人员的心理学量表得分和阳性检出率及唾液皮质醇、IL-6和IL-1β等生理指标,平均反应时间、操作错误率、双手协调性操作时间等行为学指标均高于陆地人员;岛礁驻守人员应激指标的变化具有人口学特征,驻守时间2年以上、具有较高文化程度人员以及独生子女,应激反应更为明显。2、心理学、行为学和生理学指标对应激的评估具有一致性,唾液皮质醇浓度与应激心理学和行为学指标均具有高度的线性相关关系,可作为评价应激水平理想的客观生理指标。3、以唾液皮质醇为检测靶点、三维纸质微流控技术为基础、纳米碳为标记的免疫层析试纸,基本满足了在13min内完成应激快速检测的要求,达到了无创、实时、快速、简便、可自我检测的目标。研究结论:岛礁驻守人员应激水平较高,心理健康状况不容乐观;心理学、行为学和生理学指标对应激的评估具有一致性,唾液皮质醇可作为评价应激水平的客观生理指标;纳米碳为标记的唾液免疫层析微流控试纸,适用于应激的简便快速检测,值得推广使用。
陈勇[8]（2019）在《姜黄素对果蝇和小鼠应激反应的影响及分子机制研究》文中研究表明大量体内外研究报道证实,姜黄素具有多种生物活性（如抗炎、抗氧化、抗肿瘤等）功效,但其对改善机体应激应答反应及其分子机制尚未阐明。所谓应激是机体在各种内外环境因素及社会、心理因素刺激时所出现的全身性非特异性适应反应。应激应答反应则是机体在应激源（如高温、极寒、缺氧、力竭运动等）刺激下,机体通过激活一系列应答机制从而适应内外环境变化。当应激超出机体调节能力,持续应激将导致机体应激损伤、组织损伤,甚至细胞凋亡。随着全球气候变暖,环境气候变化对人类健康构成威胁以及对农业生产造成较大影响。本实验室前期试验表明,在高温环境下用姜黄残渣（含姜黄素1.69μg/g）喂养中华鳖,与对照组相对提高存活率51.3%,揭示姜黄素在中华鳖抗高温热应激中起重要作用,为进一步探索姜黄素对机体应激应答反应的改善作用的分子机制,本课题分别采用高温热应激与力竭运动应激两种方式,开展了姜黄素抗热应激与抗运动应激性疲劳作用的研究,主要研究内容和结果如下:1.姜黄素减缓高温热应激诱导的氧化应激损伤,提高果蝇抗热应激能力。以野生型Canton-S果蝇为模式生物,设置四种不同温度处理,研究了姜黄素对高温热胁迫果蝇寿命的影响及分子机制,通过果蝇体内氧化应激水平、抗氧化相关酶活力、抗氧化酶基因表达量以及热休克蛋白相关基因表达量分析,结果表明姜黄素能够显着提高高温热胁迫果蝇的抗氧化酶活力,减缓高温热应激诱导的氧化应激损伤,并抑制热休克相关蛋白基因表达量,减缓热应激反应诱导的机体损伤,从而提高果蝇抗热应激能力,提高果蝇高温环境下的存活率。2.姜黄素缓解高温热应激对小鼠肝脏和心脏的损伤。为探索姜黄素抗热应激作用对哺乳动物的功效,以C57BL/6J雄性小鼠为模式生物,研究了姜黄素对高温热应激处理小鼠肝脏和心脏的保护作用及其分子机制。试验设定了无热应激处理对照组、热应激处理对照组、阿司匹林药物组及三个不同剂量姜黄素干预组。通过对小鼠肝脏和心脏多项生理与生化指标测定,结果表明了姜黄素通过激活Nrf2/Keap1信号通路提高肝脏抗氧化水平,以减缓高温热应激诱导的氧化应激损伤以及抑制心脏血管紧张素受体1和内质网应激介导的细胞凋亡信号通路,减缓高温热应激诱导的心肌损伤。3.姜黄素激活Nrf2/Keap1信号通路提高抗氧化水平,减少运动应激损伤。基于姜黄素抗热应激结果,进一步研究了姜黄素在其他应激条件下的调节机制。采用力竭游泳为运动应激诱导方式,研究了姜黄素对力竭运动小鼠抗疲劳能力的改善作用及其分子机制。试验设定了空白对照组、力竭游泳对照组、维生素C组以及三个不同剂量姜黄素干预组,测定了力竭游泳后小鼠血清、肝脏和骨骼肌中的多项生理与生化指标,结果表明了姜黄素能有效提高小鼠负重游泳时间（姜黄素中剂量干预组小鼠负重游泳是力竭游泳对照组的3.7倍）,其机制主要通过调节糖异生途径相关酶活力以提高能力代谢水平,以及激活Nrf2/Keap1信号通路提高抗氧化水平,减少氧化应激损伤。4.转录组学分析结果提出了姜黄素抗疲劳作用新靶点。基于姜黄素对小鼠运动应激性疲劳的改善作用,选取姜黄素中剂量干预组和力竭游泳对照组小鼠肝脏组织进行转录组高通量测序分析。结果表明姜黄素对力竭游泳小鼠的抗疲劳作用可能是通过调控PI3K-Akt、cAMP-Creb、cGMP-PKG、PPAR-γ以及脂肪细胞脂解作用信号通路实现,试验结果首次提出了Fabp3、Ucp1、Atp2a1、Aqp7、Creb5可能是姜黄素抗疲劳作用关键靶点,为今后天然活性物质抗疲劳功效研究提供新的研究靶点。总结:姜黄素激活Nrf2/Keap1信号通路提高机体抗氧化水平是姜黄素改善机体应对应激应答反应主要调节机制,在运动应激中姜黄素对机体能量代谢的改善作用以及对疲劳代谢产物的清除作用,可能是姜黄素提高力竭游泳小鼠抗运动应激性疲劳的关键调节机制。本研究明确了姜黄素在不同应激条件下调节机制的区别与联系,为姜黄素对机体应激应答反应改善作用提供一定的理论基础。
张勇[9]（2016）在《空气暴露及运输胁迫对美洲鲥亲鱼生理生化指标及hsp70基因表达的影响》文中研究指明在水产养殖的生产管理中,操作胁迫是鱼类不可避免的一类应激因子,它包括换水、吸污、拉网、捕捉、离水、运输等多个环节,这些操作往往会对鱼体造成一定胁迫,进而引发鱼体代谢、内分泌、免疫系统等一系列的应激反应,给鱼类带来了巨大的负面影响。本试验以饲养在温室水泥池内性成熟的体质量（683.53±22.10）g的美洲鲥（Alosasapidissima）亲鱼为研究对象,分别开展空气暴露和运输胁迫试验,通过检测应激前后美洲鲥亲鱼血液生理生化、组织酶活、激素以及组织hsp70mRNA水平等多项指标,研究空气暴露和运输胁迫对美洲鲥亲鱼生理生化及机能的影响。1.空气暴露对美洲鲥亲鱼多项生理生化指标产生显着影响。试验设置不进行空气暴露处理的对照组和空气暴露时间为15s、30s、60s三个不同强度处理组。美洲鲥亲鱼在空气暴露试验后其红细胞数量、红细胞压积、血红蛋白含量、血清过氧化氢酶、甲状腺素均有显着下降（P<0.05）;血糖、总胆固醇、甘油三酯、总蛋白、K+、Ca2+、超氧化物歧化酶、丙二醛、溶菌酶、谷胱甘肽S转移酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、皮质醇激素等均出现显着升高（P<0.05）;而红细胞平均血红蛋白含量、Na+、Cl-、三碘甲腺原氨酸等指标并无显着变化（P>0.05）。鳃组织超氧化物歧化酶及过氧化氢酶活力在空气暴露15s、60s组均出现显着降低（P<0.05）;肝脏谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平在空气暴露30s、60s显着升高（P<0.05）,肝糖元含量显着下降（P<0.05）;心脏肌酸激酶仅在60s空气暴露组出现升高（P<0.05）,乙酰胆碱酯酶活力在15s、60s空气暴露组均显着下降（P<0.05）。2.运输胁迫对美洲鲥亲鱼多项生理生化指标亦产生显着影响。与运输前（运输0h）相比,实验组美洲鲥亲鱼的红细胞数量、红细胞压积、血红蛋白含量、甘油三酯、血清超氧化物歧化酶、甲状腺素等在运输2h、4h均有显着下降（P<0.05）;实验组血糖、总胆固醇、K+、Cl-、丙二醛、溶菌酶、谷胱甘肽S转移酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、皮质醇激素、三碘甲腺原氨酸等在运输2h、4h出现显着升高（P<0.05）;而实验组红细胞平均血红蛋白含量、Na+、Ca2+、过氧化氢酶与运输前相比并无明显差异（P>0.05）。鳃组织Na+-K+-ATP酶和过氧化氢酶活力在运输2h、4h时出现显着下降（P<0.05）;肝组织过氧化氢酶、糖原含量在运输后出现显着下降（P<0.05）,肝脏谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平显着升高（P<0.05）;心脏肌酸激酶在运输4h时出现显着上升（P<0.05）,乙酰胆碱酯酶活力在运输4h时出现明显下降（P<0.05）。可见,运输应激能影响美洲鲥亲鱼的生理机能,使其鳃、肝、心脏出现一定程度的损伤。3.运用同源克隆和cDNA末端快速扩增技术获取了美洲鲥热应激蛋白70（Heat Shock Protein70,HSP70）的全长cDNA序列,其总长度为2 545 bp,开放阅读框区为1914 bp,推测编码637个氨基酸,其氨基酸的二级结构含有HSP70家族的3个特征序列。氨基酸同源性分析显示,美洲鲥HSP70与墨西哥脂鲤（Astyanax mexicanus）等鱼类的相似性达84%以上,与无脊椎动物果蝇、大肠杆菌的相似性分别为73%和38%,表明其基因在进化上具有很高的保守性。4.荧光定量PCR检测hsp70基因在各组织中的表达分布,该基因在美洲鲥鳃、肌肉、头肾中高表达,在脑和心脏中相对高表达,在肝脏、脾脏、肠、肾脏中微量表达。本研究中不同强度空气暴露胁迫后并未引起hsp70 mRNA在鳃、头肾中的明显变化（P>0.05）,肝脏hs70 mRNA水平在15s、30s、60s空气暴露组均有显着升高（P<0.05）,而其升高幅度并不与操作胁迫的强度呈正相关。运输应激过程中鳃、肝脏hsp70mRNA水平呈先升高后降低的变化趋势,头肾hsp70 mRNA水平呈现递增趋势。综上表明,空气暴露和运输胁迫对美洲鲥亲鱼血液多项生理和生化指标以及鳃、肝、心脏组织酶活指标等均造成一定的影响。鱼体的呼吸及循环系统功能在应激后出现减弱,氧化应激反应导致了鳃、肝、心脏等组织受损。肝脏hsp70基因在空气暴露和运输胁迫下具有较好的应答,但鉴于hsp70基因对不同应激源应答的复杂性,仍需要进一步研究其在多种应激源下的反应,以便将其合理应用来提高鱼体抗性。
张伯伟,赵红琼,周玉东,张丹,陶万春,王丽芳,卡力比夏提·艾木拉江,王雷刚,闫书平,姚刚[10]（2015）在《禁食禁水对新疆伊犁马生化指标及应激相关激素的影响》文中研究指明为探究禁食禁水双重应激对马匹机体的影响,试验选取8匹成年伊犁骟马,采用不完全拉丁方试验设计,分为禁食禁水组（禁食禁水49h）和正常饲喂组（对照组）,在试验过程中监测马匹基本生命体征、血液生化指标及应激相关激素含量的变化。结果表明,禁食禁水组心率在1248h均显着低于对照组（P<0.05）,呼吸频率在48和49h显着低于对照组（P<0.05）,血糖浓度在18、24和36h均显着低于对照组（P<0.05）,血浆皮质醇水平在18、30和36h均显着高于对照组（P<0.05）,血浆抗利尿激素水平在48和49h均显着高于对照组（P<0.05）,其他指标未见显着变化（P>0.05）。由此可知,在禁食禁水双重应激情况下,马匹通过降低心血管活动、减少机体能量消耗、提高应激能力来维持基本生命活动。
二、逆境对应激犬激素及血液生理生化指标的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、逆境对应激犬激素及血液生理生化指标的影响（论文提纲范文）
（1）非编码RNA参与虹鳟热应激的调控作用及其在ceRNA机制中的功能验证（论文提纲范文）
| 摘要 |
| SUMMARY |
| 缩略词中英文对照表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 应激 |
| 1.1 应激概述 |
| 1.2 热应激 |
| 1.2.1 热应激机理简介 |
| 1.2.2 鱼类热应激分子调控研究进展 |
| 1.2.2.1 热应激对鱼类抗氧化能力的影响 |
| 1.2.2.2 热应激对鱼类热休克基因/蛋白表达的影响 |
| 1.2.2.3 热应激对激素分泌的影响 |
| 2 非编码RNA |
| 2.1 转录组学简介 |
| 2.2 非编码RNA在热应激中的研究进展 |
| 2.2.1 microRNAs(miRNAs)在热应激中的研究进展 |
| 2.2.1.1 miRNA概念及作用机制 |
| 2.2.1.2 应激相关的miRNA研究 |
| 2.2.1.3 miRNA在动物热应激中的研究 |
| 2.2.1.4 水产动物中miRNA相关的研究 |
| 2.2.2 lncRNA在鱼类热应激中的研究 |
| 2.2.2.1 lncRNA概念及作用机制 |
| 2.2.2.2 应激相关的lncRNA研究 |
| 2.2.2.3 lncRNAs在动物热应激中的研究 |
| 2.2.2.4 水产动物中lncRNA相关的研究 |
| 2.2.3 circRNA在鱼类热应激中的研究 |
| 2.2.3.1 circRNA概念及作用机制 |
| 2.2.3.2 circRNAs在动物应激中的研究 |
| 2.2.3.3 circRNAs在水产动物中的研究 |
| 2.3 竞争性内源RNA(ceRNA)机制研究 |
| 2.3.1 竞争性内源RNA(ceRNA)概念 |
| 2.3.2 竞争性内源RNA(ceRNA)作用机制 |
| 3 本研究的目的和意义 |
| 第二章 热应激下虹鳟肝脏组织全转录组数据分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 热应激处理 |
| 1.3 与热应激相关的抗氧化酶活性检测 |
| 1.4 RNA提取、链特异性文库构建及测序 |
| 1.4.1 mRNA、lncRNA以及circRNA文库构建及测序 |
| 1.4.2 miRNA文库构建及测序 |
| 1.5 测序数据过滤与质控 |
| 1.5.1 测序数据过滤 |
| 1.5.2 测序数据质量评估 |
| 1.6 比对参考基因组 |
| 1.7 RNA鉴定与表征 |
| 1.8 样品间相关性与重复性分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 热应激对虹鳟肝脏中抗氧化相关酶的影响 |
| 2.2 数据过滤与质量评估 |
| 2.2.1 过滤前后数据量比较 |
| 2.2.2 过滤后数据质量评估 |
| 2.3 比对参考基因组 |
| 2.3.1 比对去除核糖体RNA |
| 2.3.2 比对参考基因组 |
| 2.4 各类RNA的鉴定与表征 |
| 2.5 样品间相关性分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 热应激对虹鳟肝脏抗氧化相关酶的影响 |
| 3.2 热应激下虹鳟肝脏全转录组数据分析 |
| 4 小结 |
| 第三章 热应激下虹鳟肝脏中差异表达的circRNA及其在ceRNA中的调控机制 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 circRNA、miRNA、mRNA表达分析 |
| 1.3 热应激下虹鳟肝脏中差异表达的circRNA、miRNA、mRNA鉴定 |
| 1.4 差异表达circRNA、miRNA和 mRNA靶向关系预测 |
| 1.5 ceRNA(DEcircRNA–DEmiRNA–DEmRNA)调控网络构建 |
| 1.6 ceRNA GO和 KEGG功能分析 |
| 1.7 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)验证 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 circRNA、miRNA、mRNA的鉴定 |
| 2.2 差异表达的circRNA、miRNA、mRNA |
| 2.3 差异表达circRNA、miRNA与 mRNA之间的靶向关系 |
| 2.4 ceRNA(DEcircRNA–DEmiRNA–DEmRNA)调控网络 |
| 2.5 circRNA参与ceRNA调控靶基因GO和 KEGG功能富集分析 |
| 2.6 RT-qPCR验证 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四章 热应激下虹鳟肝脏中差异表达的lncRNA及其在ceRNA中的调控机制 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 lncRNA表达谱分析 |
| 1.3 热应激下虹鳟肝脏中差异表达的lncRNA鉴定 |
| 1.4 差异表达lncRNA和 mRNA关联分析 |
| 1.5 ceRNA(DElncRNA–DEmiRNA–DEmRNA)调控网络构建 |
| 1.6 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)验证 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 lncRNA表达谱 |
| 2.2 差异表达的lncRNA |
| 2.3 antisense-lncRNA、cis-lncRNA以及trans-lncRNA与 mRNA关联分析 |
| 2.3.1 antisense-lncRNA与 mRNA关联分析 |
| 2.3.2 cis-lncRNA与 mRNA关联分析 |
| 2.3.3 trans-lncRNA与 mRNA关联分析 |
| 2.4 ceRNA(DElncRNA–DEmiRNA–DEmRNA)调控网络 |
| 2.5 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)验证 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第五章 LOC110485411、hsp90ab1与novel-m0007-5p靶向关系验证 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验原理 |
| 1.2 野生型重组载体和突变型重组载体构建 |
| 1.2.1 pmir GLO载体 |
| 1.2.2 hsp90ab1、LOC110485411与novel-m0007-5p靶向关系预测 |
| 1.2.3 hsp90ab1-WT 重组载体和hsp90ab1-MUT 重组载体 |
| 1.2.4 LOC110485411-WT 重组载体和LOC110485411-MUT 重组载体 |
| 1.2.5 酶切验证 |
| 1.2.6 hsp90ab1和LOC110485411 目的片段扩增测序 |
| 1.3 novel-m0007-5p mimics、mimics NC、inhibitor以及inhibitor NC合成 |
| 1.4 HEK293T细胞复苏、冻存与传代培养 |
| 1.4.1 HEK293T细胞复苏 |
| 1.4.2 HEK293T细胞冻存 |
| 1.4.3 HEK293T细胞传代培养 |
| 1.5 细胞转染 |
| 1.6 双荧光素酶系统检测 |
| 1.7 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 hsp90ab1、LOC110485411与novel-m0007-5p靶向关系预测结果 |
| 2.2 野生型重组载体和突变型重组载体酶切验证 |
| 2.3 野生型重组载体和突变型重组载体测序验证 |
| 2.4 双荧光素酶系统检测靶向关系结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第六章 LOC110485411、novel-m0007-5p和 hsp90ab1 参与ceRNA调控的功能验证 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 虹鳟原代肝细胞分离培养与鉴定 |
| 1.1.1 虹鳟原代肝细胞分离与培养 |
| 1.1.2 虹鳟原代肝细胞鉴定 |
| 1.2 虹鳟原代肝细胞中支原体检测 |
| 1.3 novel-m0007-5p转染效率检测 |
| 1.3.1 转染 |
| 1.3.2 RNA提取 |
| 1.3.3 反转录cDNA |
| 1.3.4 RT-qPCR检测 |
| 1.4 LOC110485411和hsp90ab1 mRNA相对表达量检测 |
| 1.5 肝细胞活力检测 |
| 1.6 细胞增殖和凋亡检测 |
| 1.6.1 细胞增殖 |
| 1.6.2 细胞凋亡 |
| 1.7 转染novel-m0007-5p热应激下LOC110485411和hsp90ab1 mRNA和蛋白表达检测 |
| 1.7.1 转染miRNA后热应激处理 |
| 1.7.2 RT-qPCR检测hsp90ab1和LOC110485411 表达 |
| 1.7.3 western blot检测hsp90ab1 蛋白表达 |
| 1.7.3.1 蛋白纯化与定量 |
| 1.7.3.2 蛋白样品制备 |
| 1.7.3.3 western blot实验步骤 |
| 1.8 转染siRNA热应激下LOC110485411和hsp90ab1 mRNA表达水平检测 |
| 1.9 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 虹鳟原代肝细胞鉴定结果 |
| 2.2 虹鳟肝细胞中支原体检测结果 |
| 2.3 miRNA转染效率检测结果 |
| 2.4 转染miRNA对虹鳟肝细胞LOC110485411和hsp90ab1 mRNA表达的影响 |
| 2.5 转染novel-m0007-5p后对虹鳟肝细胞活力的影响 |
| 2.6 转染miRNA后对虹鳟肝细胞增殖和凋亡的影响 |
| 2.7 热应激下miRNA对 hsp90ab1 mRNA和蛋白表达的影响 |
| 2.8 热应激下novel-m0007-5p对 LOC110485411 表达的影响 |
| 2.9 热应激下siRNA对 LOC110485411和hsp90ab1 mRNA表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 全文总结 |
| 1 结论 |
| 2 创新点 |
| 3 有待进一步解决的问题 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录一 本研究中主要仪器设备 |
| 附录二 本研究中主要试剂 |
| 附录三 |
| 作者简介 |
| 导师简介 |
（2）急性冷暴露对断奶仔猪血液代谢指标及部分免疫指标的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 冷应激的研究概况 |
| 1.1.1 应激及冷应激的概念 |
| 1.1.2 冷应激影响机体神经内分泌调节功能 |
| 1.1.3 冷应激影响机体免疫性能 |
| 1.1.4 冷应激影响机体代谢性能 |
| 1.2 动物冷应激的防治措施 |
| 1.2.1 改善动物房舍系统 |
| 1.2.2 选育优良耐寒品种 |
| 1.2.3 改善饲料配方 |
| 1.3 研究目的与意义 |
| 2 断奶仔猪急性冷暴露模型的构建 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 主要仪器设备 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 实验动物与分组 |
| 2.1.4 样品采集 |
| 2.1.5 样品处理 |
| 2.1.6 断奶仔猪动脉血气指标的检测 |
| 2.1.7 断奶仔猪血清中皮质醇(CORT)的检测 |
| 2.1.8 数据统计分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 不同冷暴露时间断奶仔猪动脉血电解质与血气参数的水平变化 |
| 2.2.2 不同冷暴露时间断奶仔猪血清中CORT的水平变化 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 3 急性冷暴露对断奶仔猪血液中代谢指标的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 主要仪器设备 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 实验动物与分组 |
| 3.1.4 样品采集 |
| 3.1.5 断奶仔猪血液中生化指标的检测 |
| 3.1.6 断奶仔猪血清中花生四烯酸(AA)和谷氨酰胺(GLN)的检测 |
| 3.1.7 数据统计分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 急性冷暴露对断奶仔猪血清中葡萄糖(Glu)浓度的影响 |
| 3.2.2 急性冷暴露对断奶仔猪血清中总蛋白(TB)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)浓度的影响 |
| 3.2.3 急性冷暴露对断奶仔猪血清中尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)浓度的影响 |
| 3.2.4 急性冷暴露对断奶仔猪血清中甘油三酯(TG)浓度的影响 |
| 3.2.5 急性冷暴露对断奶仔猪血清中总胆红素(TBil)浓度的影响 |
| 3.2.6 急性冷暴露对断奶仔猪血清中钙(Ca)和无机磷(P)浓度的影响 |
| 3.2.7 急性冷暴露对断奶仔猪血清中肌酸激酶(CK)浓度的影响 |
| 3.2.8 急性冷暴露对断奶仔猪血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)浓度的影响 |
| 3.2.9 急性冷暴露对断奶仔猪血清中淀粉酶(AMY)浓度的影响 |
| 3.2.10 急性冷暴露对断奶仔猪血清中花生四烯酸(AA)浓度的影响 |
| 3.2.11 急性冷暴露对断奶仔猪血清中谷氨酰胺(GLN)浓度的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 4 急性冷暴露对断奶仔猪血液中部分免疫指标的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 主要仪器设备 |
| 4.1.2 主要试剂 |
| 4.1.3 实验动物与分组 |
| 4.1.4 样品采集 |
| 4.1.5 断奶仔猪血清中IgG和 IgM的检测 |
| 4.1.6 引物设计和合成 |
| 4.1.7 断奶仔猪全血中总RNA的提取 |
| 4.1.8 cDNA的合成 |
| 4.1.9 QRT-PCR |
| 4.1.10 数据统计分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 急性冷暴露对断奶仔猪血清中IgG和 IgM水平的影响 |
| 4.2.2 急性冷暴露对断奶仔猪全血中TNF-αmRNA表达的影响 |
| 4.2.3 急性冷暴露对断奶仔猪全血中IL-6 mRNA表达的影响 |
| 4.2.4 急性冷暴露对断奶仔猪全血中IL-10 mRNA表达的影响 |
| 4.2.5 急性冷暴露对断奶仔猪全血中HSP70 mRNA表达的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）肝癌病人慢性应激的测评及其对认知功能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 文献综述 |
| 1.1 肿瘤及肝癌现状 |
| 1.2 慢性应激及其评估 |
| 1.2.1 慢性应激 |
| 1.2.2 慢性应激评估的主要方法 |
| 1.2.3 其他生理指标的应用 |
| 1.2.4 非稳态负荷 |
| 1.2.5 癌症和慢性应激 |
| 1.3 认知能力和工作记忆 |
| 1.3.1 癌症对认知能力的影响 |
| 1.3.2 工作记忆理论及模型 |
| 1.3.3 慢性应激与工作记忆 |
| 1.3.4 工作记忆与癌症 |
| 1.3.5 工作记忆任务 |
| 1.4 问题提出与假设 |
| 1.4.1 问题提出 |
| 1.4.2 假设 |
| 1.5 研究创新 |
| 2 研究1肝癌病人的慢性应激评估 |
| 2.1 目的与假设 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 被试 |
| 2.2.2 心理测量工具 |
| 2.2.3 生理测量工具 |
| 2.2.4 程序 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 描述性统计 |
| 2.3.2 人口学变量 |
| 2.3.3 事件影响量表对生理指标的预测 |
| 2.3.4 应激生理评估的简化 |
| 2.4 讨论 |
| 3 研究2肝癌病人慢性应激与认知功能的关系研究 |
| 3.1 目的和假设 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 被试 |
| 3.2.2 测量工具 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 应激量表与认知功能量表的关系 |
| 3.3.2 应激量表与认知功能量表的回归分析 |
| 3.4 讨论 |
| 4 研究3肝癌病人慢性应激与工作记忆的关系研究 |
| 4.1 目的和假设 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 被试 |
| 4.2.2 实验设计 |
| 4.2.3 测量工具 |
| 4.2.4 程序 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 描述性统计 |
| 4.3.2 人口学变量 |
| 4.3.3 应激水平与工作记忆的关系 |
| 4.4 讨论 |
| 5 总讨论 |
| 5.1 应激水平的评估 |
| 5.2 应激对认知功能的影响 |
| 5.3 应激对工作记忆的影响 |
| 5.4 不足与展望 |
| 6 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（4）胚胎期暴露炎症和青春期应激对老年CD-1小鼠认知和突触蛋白的影响（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1. 前言 |
| 2. 材料与方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 6. 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 应激对认知功能的影响的研究进展 |
| 参考文献 |
（5）饥饿后恢复饲喂和β-羟基丁酸灌注对牦牛脂肪代谢的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 本文缩略词表 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.我国牦牛的产业现状 |
| 1.1 我国的牦牛养殖现状 |
| 1.2 牦牛营养研究现状 |
| 2.饥饿对动物的影响 |
| 2.1 饥饿的特点 |
| 2.2 饥饿对动物体重的影响 |
| 2.3 饥饿对动物机体组织的影响 |
| 2.4 饥饿对动物内分泌的影响 |
| 2.5 饥饿对动物消化道微生物的影响 |
| 2.6 饥饿对脂肪代谢的影响 |
| 2.6.1 饥饿对脂肪合成代谢的影响 |
| 2.6.2 饥饿对脂肪分解代谢的影响 |
| 3.恢复饲喂对动物的影响 |
| 3.1 恢复饲喂对动物生产性能的影响 |
| 3.2 恢复饲喂对动物机体代谢的影响 |
| 4. β-羟基丁酸的来源与作用 |
| 4.1 β-羟基丁酸的来源 |
| 4.2 β-羟基丁酸作为能源物质的作用 |
| 4.3 β-羟基丁酸作为信号物质的作用 |
| 4.3.1 β-羟基丁酸信号传递功能 |
| 4.3.2 β-羟基丁酸受体 |
| 4.4 β-羟基丁酸对脂肪代谢的调控作用 |
| 4.4.1 β-羟基丁酸对脂肪代谢的影响 |
| 4.4.2 β-羟基丁酸调节脂肪代谢的信号通路 |
| 5.主要存在的问题 |
| 第二章 研究目的、意义、内容以及技术路线 |
| 1.研究目的 |
| 2.研究意义 |
| 3.研究内容 |
| 4.技术路线 |
| 第三章 试验研究 |
| 试验一 牦牛饥饿模型建立与恢复饲喂效果评价 |
| 1.前言 |
| 2.材料与方法 |
| 2.1 试验动物与试验设计 |
| 2.2 试验日粮 |
| 2.3 饲养管理 |
| 2.4 样品采集与指标测定 |
| 2.4.1 生产性能的测定 |
| 2.4.2 营养物质表观消化率测定 |
| 2.4.3 血样采集与测定 |
| 2.4.4 瘤胃液采集与瘤胃发酵参数测定 |
| 2.4.5 瘤胃微生物测定 |
| 2.5 数据统计与分析 |
| 3.结果与分析 |
| 3.1 饥饿对牦牛体重的影响 |
| 3.2 恢复饲喂对牦牛生长性能的影响 |
| 3.3 饥饿后恢复饲喂对牦牛营养物质表观消化率的影响 |
| 3.4 饥饿及恢复饲喂对牦牛血液生化指标的影响 |
| 3.5 饥饿及恢复饲喂对牦牛血清脂肪代谢关键酶活性的影响 |
| 3.6 饥饿及恢复饲喂对牦牛瘤胃发酵的影响 |
| 3.7 饥饿及恢复饲喂对牦牛瘤胃微生物组成的影响 |
| 4.讨论 |
| 4.1 饥饿及恢复饲喂对牦牛生长性能的影响 |
| 4.2 饥饿后恢复饲喂对牦牛营养物质表观消化率的影响 |
| 4.3 饥饿及恢复饲喂对牦牛血液生化指标的影响 |
| 4.4 饥饿及恢复饲喂对牦牛血清脂肪代谢关键酶活性的影响 |
| 4.5 饥饿及恢复饲喂对牦牛瘤胃发酵参数的影响 |
| 4.6 饥饿及恢复饲喂对牦牛瘤胃微生物组成的影响 |
| 5.小结 |
| 试验二 饥饿和恢复饲喂对牦牛血清和尿液代谢组的影响 |
| 1.前言 |
| 2.材料与方法 |
| 2.1 试验动物与试验设计 |
| 2.2 试验饲粮 |
| 2.3 饲养管理 |
| 2.4 样品采集 |
| 2.5 测定指标和方法 |
| 2.6 数据统计与分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 数据质量控制 |
| 3.2 PCA、PLS-DA和OPLS-DA分析 |
| 3.3 差异代谢物的筛选 |
| 3.4 代谢生物标志物的选取 |
| 3.5 差异代谢分子通路富集分析 |
| 4.讨论 |
| 4.1 饥饿和恢复饲喂对牦牛机体脂肪代谢的影响 |
| 4.2 饥饿和恢复饲喂对牦牛机体氨基酸代谢的影响 |
| 4.3 饥饿和恢复饲喂对牦牛机体碳水化合物代谢的影响 |
| 4.4 饥饿和恢复饲喂对牦牛机体核苷酸代谢的影响 |
| 5.小结 |
| 试验三 静脉灌注β-羟基丁酸对饥饿牦牛脂肪代谢的影响 |
| 1.前言 |
| 2.材料与方法 |
| 2.1 试验动物与试验设计 |
| 2.2 试验日粮 |
| 2.3 饲养管理 |
| 2.4 BHBA溶液制备与静脉灌注 |
| 2.5 样品采集 |
| 2.5.1 血样采集 |
| 2.5.2 皮下脂肪组织采集 |
| 2.6 指标测定与方法 |
| 2.6.1 体重 |
| 2.6.2 血清代谢物 |
| 2.6.3 血清激素 |
| 2.6.4 脂肪酸组成 |
| 2.6.5 脂肪细胞数目和面积测定 |
| 2.6.6 脂肪代谢关键酶活性 |
| 2.6.7 关键基因mRNA表达量 |
| 2.6.8 关键蛋白表达量 |
| 2.7 数据统计与分析 |
| 3.结果与分析 |
| 3.1 饥饿和BHBA灌注对牦牛体重的影响 |
| 3.2 饥饿和BHBA灌注对牦牛血清血糖和脂肪代谢物的影响 |
| 3.3 饥饿和BHBA灌注对牦牛血清激素的影响 |
| 3.4 饥饿和BHBA灌注对牦牛皮下脂肪细胞形态的影响 |
| 3.5 饥饿和BHBA灌注对牦牛皮下脂肪组织脂肪酸组成的影响 |
| 3.6 饥饿和BHBA灌注对牦牛脂肪代谢关键酶活性的影响 |
| 3.7 饥饿和BHBA灌注对脂肪代谢关键因子m RNA和蛋白表达量的影响 |
| 3.8 BHBA调控脂肪代谢的信号通路关键因子m RNA和蛋白表达量 |
| 4.讨论 |
| 4.1 饥饿和BHBA灌注对牦牛血清血糖和脂肪代谢产物的影响 |
| 4.2 饥饿和BHBA灌注对牦牛血清激素的影响 |
| 4.3 饥饿和BHBA灌注对牦牛皮下脂肪细胞数量和大小的影响 |
| 4.4 饥饿和BHBA灌注对牦牛皮下脂肪组织脂肪酸组成的影响 |
| 4.5 饥饿和BHBA灌注对牦牛脂肪代谢关键酶活性的影响 |
| 4.6 饥饿和BHBA灌注对牦牛皮下脂肪组织脂肪代谢关键因子的影响 |
| 4.7 BHBA调控饥饿牦牛脂肪代谢的信号通路 |
| 5.小结 |
| 第四章 总体讨论和结论 |
| 1.总体讨论 |
| 1.1 牦牛瘤胃微生物对饥饿和恢复饲喂的适应性变化 |
| 1.2 牦牛应对饥饿胁迫和恢复饲喂的脂肪代谢差异 |
| 1.3 饥饿和脂肪分解产物BHBA调节牦牛脂肪代谢的信号途径 |
| 2.总体结论 |
| 3.本研究的创新点 |
| 4.有待进一步研究的问题 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（6）不同温度水疗干预对大鼠慢性应激损伤的防护效应及机制（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 主要试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 实验方案 |
| 2.2 慢性应激动物模型制备 |
| 2.3 水疗干预方案 |
| 2.4 无创血压测量 |
| 2.5 血糖测定和糖耐量实验 |
| 2.6 血清激素和组织炎症因子检测 |
| 2.7 肠系膜微动脉分离和血管功能检测 |
| 2.8 蛋白定量-BCA法 |
| 2.9 蛋白免疫印迹 |
| 2.10 离体细胞实验方案 |
| 2.11 旷场实验、高架十字迷宫实验和转棒实验 |
| 2.12 透射电镜及线粒体数目测算 |
| 2.13 统计分析方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 噪声复合足底电击刺激28 天可更好的构建大鼠慢性应激模型 |
| 3.2 不同温度水疗对大鼠慢性应激的效应不同,其中热水浴对抗应激的综合效应最好 |
| 3.3 长期冷水浴、冷热交替水浴影响慢性应激大鼠糖耐量变化 |
| 3.4 热水浴对慢性应激大鼠探索行为能力与焦虑的影响 |
| 3.5 冷水浴、冷热交替水浴改善慢性应激大鼠运动协调能力 |
| 3.6 热水浴改善慢性应激大鼠肠系膜微血管内皮功能 |
| 3.7 热水浴影响应激大鼠血管抗氧化蛋白、抗衰老蛋白和热休克蛋白表达 |
| 3.8 热水浴增加血管NO生物利用度 |
| 3.9 温热效应增加内皮细胞DDAH1 表达和NO分泌水平 |
| 3.10 热水浴减轻慢性应激大鼠心肌损伤 |
| 3.11 热水浴对慢性应激大鼠心肌自噬相关蛋白表达的影响 |
| 3.12 热水浴对慢性应激大鼠心肌线粒体结构的影响 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（7）岛礁驻守人员应激指标的相关性研究及应激快速检测试纸的研制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 一、研究背景 |
| 二、研究目的及意义 |
| 三、研究思路及技术路线 |
| 四、研究问题与假设 |
| 第一部分 岛礁驻守人员应激指标的变化及相关性研究 |
| 一、引言 |
| 二、研究对象与方法 |
| (一)研究对象 |
| (二)仪器与耗材 |
| (三)研究方法 |
| (四)研究程序 |
| (五)统计学分析方法 |
| 三、研究结果 |
| (一)量表回收、唾液样本采集及行为学测试情况 |
| (二)一般情况比较 |
| (三)岛礁驻守人员应激心理学指标的变化 |
| (四)岛礁驻守人员应激行为学指标的变化 |
| (五)岛礁驻守人员应激生理学指标的变化 |
| (六)应激水平“心理-行为-生理”指标的相关性分析 |
| 四、讨论 |
| (一)岛礁驻守人员整体应激程度较高 |
| (二)岛礁驻守人员应激指标的变化具有人口学特征 |
| (三)应激心理学、行为学、生理学指标间具有相关性 |
| 五、小结 |
| 第二部分 应激唾液快速检测试纸的研制 |
| 一、引言 |
| 二、材料与方法 |
| (一)材料与设备 |
| (二)技术原理 |
| (三)研制方法 |
| 三、实验结果 |
| (一)纳米碳标记免疫检测试纸芯片的构建 |
| (二)不同浓度唾液皮质醇的显色梯度 |
| (三)三维纸质微流控唾液检测试纸的组装 |
| (四)唾液应激检测试纸的使用方法 |
| (五)唾液检测试纸的应用与验证 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 研究结论、创新性与局限性 |
| 一、研究结论 |
| 二、研究创新性 |
| 三、研究局限性及展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 唾液应激生理指标研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表论文和参加科研工作情况 |
| 致谢 |
（8）姜黄素对果蝇和小鼠应激反应的影响及分子机制研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词 |
| 第一章 文献综述 |
| 1. 姜黄素及其对慢病的预防和治疗功能 |
| 1.1. 姜黄素 |
| 1.2. 姜黄素对慢病的预防和治疗功能 |
| 1.2.1 姜黄素与抗肿瘤 |
| 1.2.2 姜黄素与肝病 |
| 1.2.3 姜黄素与心血管病 |
| 1.2.4 姜黄素与神经退行性疾病 |
| 1.2.5 姜黄素与皮肤病 |
| 1.2.6 抗衰老与抗氧化作用 |
| 1.2.7 姜黄素的其他功能 |
| 2. 姜黄素作用的信号通路 |
| 2.1. 胞内NF-κB蛋白 |
| 2.2. 蛋白激酶B (Akt) |
| 2.3. 人体抑癌基因p53 |
| 2.4. 核因子 E-2-相关因子(Nrf2) |
| 3. 高温热应激对机体的损伤及其作用机制 |
| 3.1. 高温热应激与热射病 |
| 3.2. 高温环境对心脏的影响 |
| 3.3. 机体应对高温热应激机制 |
| 3.3.1 高温热应激诱导机体热休克蛋白表达 |
| 3.3.2 高温热应激与内质网应激介导的细胞凋亡机制 |
| 3.3.3 高温热应激诱导氧化应激 |
| 3.3.4 抗热应激天然活性物质 |
| 4. 运动应激损伤与运动性疲劳 |
| 4.1. 运动应激损伤 |
| 4.2. 运动性疲劳 |
| 4.3. 抗疲劳机制研究 |
| 5. 转录组测序技术与应用 |
| 5.1. 转录组测序技术 |
| 5.2. 转录组测序技术应用 |
| 6. 立题背景、研究意义和研究内容 |
| 6.1. 立题背景和研究意义 |
| 6.2. 研究内容 |
| 6.3. 技术路线 |
| 第二章 姜黄素对受高温胁迫果蝇寿命的影响 |
| 2.1. 前言 |
| 2.2. 材料与仪器 |
| 2.2.1 材料与试剂 |
| 2.2.2 仪器与设备 |
| 2.3. 实验方法 |
| 2.3.1 扩种培养基的配制 |
| 2.3.2 实验培养基的配制 |
| 2.3.3 果蝇饲养方法 |
| 2.3.4 果蝇高温胁迫实验方法 |
| 2.3.5 数据分析 |
| 2.4. 结果与分析 |
| 2.4.1 果蝇平均寿命3因素方差分析 |
| 2.4.2 姜黄素对 25°C下果蝇寿命的影响 |
| 2.4.3 姜黄素对 29°C下果蝇寿命的影响 |
| 2.4.4 姜黄素对 34°C下果蝇寿命的影响 |
| 2.4.5 姜黄素对 39°C下果蝇寿命的影响 |
| 2.5. 讨论 |
| 2.6. 本章小结 |
| 第三章 姜黄素对受高温胁迫果蝇抗热应激作用的分子机制研究 |
| 3.1. 前言 |
| 3.2. 材料与仪器 |
| 3.2.1 材料与试剂 |
| 3.2.2 仪器与设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 果蝇饲养培养基及饲养方法 |
| 3.3.2 果蝇收集 |
| 3.3.3 果蝇MDA水平以及相关抗氧化指标测定 |
| 3.3.4 q-PCR检测果蝇体内相关抗氧化基因及热休克蛋白基因表达量 |
| 3.3.5 数据分析 |
| 3.4. 结果与分析 |
| 3.4.1 姜黄素对热胁迫果蝇体内MDA水平的影响 |
| 3.4.2 姜黄素对热胁迫果蝇体内SOD活力的影响 |
| 3.4.3 姜黄素对热胁迫果蝇体内CAT活力的影响 |
| 3.4.4 姜黄素对热胁迫果蝇体内GSH-Px活力的影响 |
| 3.4.5 姜黄素对热胁迫果蝇体内抗氧化相关基因表达量的影响 |
| 3.4.6 姜黄素对热胁迫果蝇热休克蛋白相关基因表达量的影响 |
| 3.5. 讨论 |
| 3.6. 本章小结 |
| 第四章 姜黄素对高温热应激小鼠肝脏的保护作用及其分子机制研究 |
| 4.1. 前言 |
| 4.2. 材料与仪器 |
| 4.2.1 材料与试剂 |
| 4.2.2 仪器与设备 |
| 4.3. 实验方法 |
| 4.3.1 动物实验 |
| 4.3.2 小鼠体重及脏器指数 |
| 4.3.3 血清生化分析 |
| 4.3.4 组织形态学观察 |
| 4.3.5 丙二醛含量及抗氧化酶活力测定 |
| 4.3.6 炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α、TGF-β1 测定 |
| 4.3.7 q-PCR检测测定肝组织中Nrf2/Keap1信号通路相关基因表达量 |
| 4.3.8 数据分析 |
| 4.4. 结果与分析 |
| 4.4.1 高温热应激对小鼠体重的影响 |
| 4.4.2 高温热应激对小鼠脏器指数的影响 |
| 4.4.3 高温热应激对小鼠肝脏组织形态的影响 |
| 4.4.4 高温热应激对小鼠血清生化指标的影响 |
| 4.4.5 姜黄素对热应激小鼠肝脏抗氧化水平的影响 |
| 4.4.6 姜黄素对热应激小鼠肝脏炎症因子水平的影响 |
| 4.4.7 姜黄素作用的Nrf2/Keap1信号通路分析 |
| 4.5. 讨论 |
| 4.6. 本章小结 |
| 第五章 姜黄素对高温热应激小鼠心脏的保护作用及其分子机制研究 |
| 5.1. 前言 |
| 5.2. 材料与仪器 |
| 5.2.1 材料与试剂 |
| 5.2.2 仪器与设备 |
| 5.3. 实验方法 |
| 5.3.1 动物实验 |
| 5.3.2 血压测量 |
| 5.3.3 直肠温度测定 |
| 5.3.4 心脏脏器指数及组织形态学观察 |
| 5.3.5 血清乳酸脱氢酶含量测定 |
| 5.3.6 心肌肌钙蛋白和血管紧张素Ⅱ测定 |
| 5.3.6 q-PCR检测血管紧张素受体1与内质网应激相关基因 |
| 5.3.7 免疫印迹法测定心脏组织中AT1与内质网应激相关蛋白表达水平 |
| 5.3.8 数据分析 |
| 5.4. 结果与分析 |
| 5.4.1 高温热应激对小鼠直肠温度的影响 |
| 5.4.2 高温热应激对小鼠血压的影响 |
| 5.4.3 高温热应激对小鼠心率的影响 |
| 5.4.4 脏器指数及心脏组织切片病理分析 |
| 5.4.5 高温热应激对小鼠血清中乳酸脱氢酶的影响 |
| 5.4.6 高温热应激对小鼠心肌肌钙蛋白与血管紧张素Ⅱ水平的影响 |
| 5.4.7 姜黄素对热应激小鼠心脏血管紧张素受体1表达量的影响 |
| 5.4.8 姜黄素作用的内质网应激细胞凋亡信号通路分析 |
| 5.5. 讨论 |
| 5.6. 本章小结 |
| 第六章 姜黄素对小鼠的抗疲劳作用分子机制研究 |
| 6.1. 前言 |
| 6.2. 材料与仪器 |
| 6.2.1 材料与试剂 |
| 6.2.2 仪器与设备 |
| 6.3. 实验方法 |
| 6.3.1 动物饲养与实验设计 |
| 6.3.2 负重游泳试验 |
| 6.3.3 小鼠体重及脏器指数 |
| 6.3.4 组织形态学观察 |
| 6.3.4 血清生化指标测定 |
| 6.3.5 肝糖原和肌糖原含量测定 |
| 6.3.6 肝组织能量代谢相关酶水平分析 |
| 6.3.7 肝脏丙二醛含量及抗氧化酶活力测定 |
| 6.3.8 q-PCR测定小鼠肝组织中Nrf2/Keap1信号通路相关基因表达量 |
| 6.3.9 数据分析 |
| 6.4. 结果与分析 |
| 6.4.1 姜黄素对小鼠体重及脏器指数的影响 |
| 6.4.2 肌肉和肾脏组织切片病理分析 |
| 6.4.3 姜黄素对小鼠负重游泳耐力的影响 |
| 6.4.4 姜黄素对力竭游泳小鼠血清生化指标的影响 |
| 6.4.5 姜黄素对力竭游泳小鼠肝糖原和肌糖原含量的影响 |
| 6.4.6 姜黄素对力竭游泳小鼠肝脏能量代谢相关酶活力的影响 |
| 6.4.7 姜黄素对力竭游泳小鼠肝脏丙二醛含量和抗氧化酶活力的影响 |
| 6.4.8 姜黄素作用的Nrf2/Keap1信号通路分析 |
| 6.5. 讨论 |
| 6.6. 本章小结 |
| 第七章 姜黄素对力竭游泳小鼠肝脏影响的转录组学分析 |
| 7.1. 前言 |
| 7.2. 材料与仪器 |
| 7.2.1 材料与试剂 |
| 7.2.2 仪器与设备 |
| 7.3. 实验方法 |
| 7.3.1 RNA提取与质控 |
| 7.3.2 转录组测序 |
| 7.3.2.1 转录组测序实验流程与信息分析流程 |
| 7.3.2.2 测序数据过滤 |
| 7.3.2.3 参考基因组比对 |
| 7.3.2.4 新转录本预测 |
| 7.3.2.5 差异剪接基因检测 |
| 7.3.2.6 基因表达量和差异表达基因分析 |
| 7.3.2.7 差异表达基因GO功能和Pathway功能分析 |
| 7.3.3 q-PCR检测验证差异表达基因 |
| 7.3.4 数据统计与分析 |
| 7.4. 结果与分析 |
| 7.4.1 样品检测结果 |
| 7.4.2 测序分析结果与测序数据过滤 |
| 7.4.3 参考基因组比对 |
| 7.4.4 样品间的相关性 |
| 7.4.5 差异表达基因(DEG)检测 |
| 7.4.6 差异表达基因GO功能分析 |
| 7.4.7 差异表达基因Pathway功能分析 |
| 7.4.8 转录组中差异表达基因q-PCR验证 |
| 7.5. 讨论 |
| 7.6. 本章小结 |
| 第八章 结论与展望 |
| 8.1. 结论 |
| 8.2. 主要创新点 |
| 8.3. 展望 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 在学期间取得的科研成果 |
（9）空气暴露及运输胁迫对美洲鲥亲鱼生理生化指标及hsp70基因表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1 美洲鲥研究概况 |
| 1.1 主要生物学特征 |
| 1.2 国内外研究概述 |
| 2 鱼类应激生理研究 |
| 2.1 鱼类应激的概念 |
| 2.2 鱼类应激生理反应过程 |
| 2.3 鱼类应激常用的监测指标 |
| 3 鱼类热应激蛋白70的研究概况 |
| 3.1 热应激蛋白的早期研究 |
| 3.2 热应激蛋白的分类 |
| 3.3 鱼类hsp70基因的克隆 |
| 3.4 鱼类hsp70基因表达与调控 |
| 3.5 鱼类HSP70的功能 |
| 3.6 鱼类HSP70的应用 |
| 3.6.1 作为鱼类应激状态的监测指标 |
| 3.6.2 参与细胞保护 |
| 3.6.3 作为生物标记 |
| 4 本研究的目的及意义 |
| 第二章 空气暴露对美洲鲥亲鱼血液生化、组织酶活及激素等指标的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验鱼种及暂养 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.3 样品采集与处理 |
| 1.4 主要指标的检测 |
| 1.5 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 空气暴露胁迫下鱼体状况观察 |
| 2.2 空气暴露胁迫对美洲鲥亲鱼血液主要生理生化指标的影响 |
| 2.3 空气暴露胁迫对美洲鲥亲鱼血清酶活的影响 |
| 2.4 空气暴露胁迫对美洲鲥亲鱼组织酶活的影响 |
| 2.5 空气暴露胁迫对美洲鲥亲鱼血清激素的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 空气暴露胁迫对血液生理和生化指标的影响 |
| 3.2 空气暴露胁迫对组织酶活的影响 |
| 3.3 空气暴露胁迫对血清激素的影响 |
| 第三章 运输应激对美洲鲥亲鱼血液生化、组织酶活及激素等指标的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验鱼种及暂养 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.3 样品采集与处理 |
| 1.4 指标检测 |
| 1.5 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 运输应激期间鱼体状况观察 |
| 2.2 运输应激对美洲鲥亲鱼血液主要生理和生化指标的影响 |
| 2.3 运输应激对美洲鲥亲鱼血清酶活的影响 |
| 2.4 运输应激对美洲鲥亲鱼组织酶活的影响 |
| 2.5 运输应激对美洲鲥亲鱼血清激素的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 运输应激对血液生理及生化指标的影响 |
| 3.2 运输应激对组织酶活的影响 |
| 3.3 运输应激对血清激素的影响 |
| 第四章 美洲鲥亲鱼hsp70基因全序列克隆与分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验鱼种 |
| 1.2 样品采集与处理 |
| 1.3 使用试剂和仪器 |
| 1.4 总RNA提取 |
| 1.5 cDNA模板的制备 |
| 1.6 引物设计与合成 |
| 1.7 hsp70基因保守区片段的克隆 |
| 1.8 hsp70基因RACE扩增 |
| 1.9 基因序列特征分析 |
| 1.10 氨基酸同源性比较和系统进化分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 美洲鲥亲鱼hsp70基因cDNA全长序列及分析 |
| 2.2 美洲鲥亲鱼HSP70氨基酸同源性比较 |
| 2.3 美洲鲥亲鱼HSP70蛋白的系统进化分析 |
| 3. 讨论 |
| 第五章 空气暴露及运输胁迫对美洲鲥亲鱼不同组织hsp70基因表达的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验鱼种 |
| 1.2 样品采集与处理 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.3.1 使用仪器和试剂 |
| 1.3.2 总RNA提取 |
| 1.3.3 cDNA模板的制备 |
| 1.3.4 引物设计与合成 |
| 1.3.5 美洲鲥亲鱼hsp70基因在不同组织中的表达分布 |
| 1.3.6 美洲鲥亲鱼hsp70基因在空气暴露及运输胁迫试验中的表达情况 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 美洲鲥亲鱼hsp70基因mRNA组织表达差异 |
| 2.2 不同强度空气暴露胁迫下hsp70基因表达水平检测 |
| 2.3 运输应激下hsp70基因表达水平检测 |
| 3 讨论 |
| 3.1 美洲鲥hsp70基因在不同组织器官中的表达分布 |
| 3.2 不同强度空气暴露胁迫对美洲鲥亲鱼hsp70 mRNA表达的影响 |
| 3.3 运输对美洲鲥亲鱼hsp70基因mRNA表达水平的影响 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间参加的科研项目和成果 |
（10）禁食禁水对新疆伊犁马生化指标及应激相关激素的影响（论文提纲范文）
| 1材料与方法 |
| 1.1试验设计 |
| 1.2试验日粮与饲养管理 |
| 1.3样品采集与处理 |
| 1.4测定指标与方法 |
| 1.5数据分析 |
| 2结果与分析 |
| 2.1禁食禁水对新疆伊犁马生化指标的影响 |
| 2.2禁食禁水对新疆伊犁马应激相关激素的影响 |
| 3讨论 |
| 3.1禁食禁水对新疆伊犁马生化指标的影响 |
| 3.2禁食禁水对新疆伊犁马应激相关激素的影响 |
| 4小结 |
四、逆境对应激犬激素及血液生理生化指标的影响（论文参考文献）
- [1]非编码RNA参与虹鳟热应激的调控作用及其在ceRNA机制中的功能验证[D]. 权金强. 甘肃农业大学, 2021
- [2]急性冷暴露对断奶仔猪血液代谢指标及部分免疫指标的影响[D]. 陈妍. 黑龙江八一农垦大学, 2020(08)
- [3]肝癌病人慢性应激的测评及其对认知功能的影响[D]. 陈一尘. 西南大学, 2020(01)
- [4]胚胎期暴露炎症和青春期应激对老年CD-1小鼠认知和突触蛋白的影响[D]. 张折折. 安徽医科大学, 2020(02)
- [5]饥饿后恢复饲喂和β-羟基丁酸灌注对牦牛脂肪代谢的影响[D]. 邹华围. 四川农业大学, 2019
- [6]不同温度水疗干预对大鼠慢性应激损伤的防护效应及机制[D]. 田沛. 中国人民解放军空军军医大学, 2019(06)
- [7]岛礁驻守人员应激指标的相关性研究及应激快速检测试纸的研制[D]. 刘林林. 中国人民解放军海军军医大学, 2019(10)
- [8]姜黄素对果蝇和小鼠应激反应的影响及分子机制研究[D]. 陈勇. 浙江大学, 2019(01)
- [9]空气暴露及运输胁迫对美洲鲥亲鱼生理生化指标及hsp70基因表达的影响[D]. 张勇. 南京农业大学, 2016(04)
- [10]禁食禁水对新疆伊犁马生化指标及应激相关激素的影响[J]. 张伯伟,赵红琼,周玉东,张丹,陶万春,王丽芳,卡力比夏提·艾木拉江,王雷刚,闫书平,姚刚. 中国畜牧兽医, 2015(08)